[發明專利]一種巴氏染色液及應用方法

在審

• 申請號: 201810314097.1
• 申請日: 2018-04-10
• 公開（公告）號: CN108535077A
• 公開（公告）日: 2018-09-14
• 發明（設計）人: 姚斌;左露露
• 申請（專利權）人: 南京福怡科技發展股份有限公司
• 主分類號: G01N1/30
• 分類號: G01N1/30
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種巴氏染色液及其應用，屬于生物技術領域。具體的說該巴氏染色液包含細胞核染色液和胞漿染色液。本發明提供的巴氏染色液操作簡便，染色均勻，染色后的細胞結構清晰，細胞著色鮮艷，易于臨床病理診斷觀察判斷。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，特別涉及一種巴氏染色液，同時本發明還涉及該染色液應用方法。

背景技術

在目前的疾病診斷過程中，病理診斷是診斷信息的重要來源，具有重要臨床意義。巴氏染色法是病理切片和脫落細胞染色中最好的也是最常用的染色方法，該染色方法不但具有現實細胞核結構清晰，分色明顯，透明度好，胞漿受色鮮艷等特點，還能處理后使標本不易脫色，可長久保存。巴氏染色試劑包含蘇木素染液，橙黃染液，EA50染液，及95%乙醇，100%乙醇，無水乙醇等；巴氏染色操作流程為：95%乙醇固定（15min）→清水沖洗多次→蘇木素染液（3-5min）→清水沖洗三次→藍化→95%乙醇漂洗→橙黃染液（1-10s）→95%乙醇漂洗→95%乙醇漂洗→100%乙醇漂洗→EA50（3-5m）→95%乙醇漂洗→95%乙醇漂洗→無水乙醇漂洗→無水乙醇（2min）→二甲苯（2min）→中性樹膠封片。

傳統的巴氏顏色液配置復雜，染色手續繁雜，染色時間較長，染色結果受染色時間，漂洗時間，漂洗次數等多種因素影響，效果不穩定，影響病理診斷的判斷。

發明內容

本發明為解決上述現有技術所存在的不足，提供一種快速染色的巴氏染色液及應用方法。該巴氏染色液配置簡便，染色步驟簡短，染后著色穩定，操作簡單，分色與染色效果顯著。

具體來說：該巴氏染色液含有細胞核染色液和細胞漿染色液。

細胞核染色液為改良蘇木素染色液，每升染色液其組分為：醇50~150ml，冰乙酸5~40ml，蘇木色精1~4g，硫酸鋁鉀2~25g，碘酸鈉0.05~0.5g，余量為純化水。

細胞漿染色液為OG-EA染色液，每升染液其組分為：亮綠0.1~1g，曙紅微黃2~6g，無水乙醇400~700ml，磷鎢酸0.5~4g，醇100~450ml，冰乙酸5~40ml，緩沖液2~50ml，橘黃2~8g，余量為純化水。

上述染色液中的醇為：甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇及香豆素中的一種或幾種組合；上述染色液中的緩沖液為Tris緩沖溶液，磷酸緩沖溶液，檸檬酸緩沖溶液中的一種或幾種組合。

該巴氏染色液的使用方法為：

1）細胞學制片完成后，待濕固定；

2）流水清洗后使用所述改良蘇木素染色液進行細胞核染色1~2分鐘；

3）流水清洗后使用所述OG-EA染色液進行胞漿染色2~3分鐘；

4）梯度酒精清洗脫水晾干后封片；

5）鏡下閱片判讀結果。

本發明提供的巴氏染色液，分別對細胞核和細胞漿染色著色快，1~2分鐘就能完成很好著色，沖洗浮色方便簡潔，染色步驟簡短，染后著色穩定，操作簡單，分色與染色效果顯著。

附圖說明

附圖1實施例一鏡檢圖片。

附圖2實施例二鏡檢圖片。

具體實施方式

實施例一：

改良蘇木素染色液1，每升染色液其組分為：甲醇100ml，冰乙酸20ml，蘇木色精2g，硫酸鋁鉀10g，碘酸鈉0.1g，純化水870ml。

OG-EA染色液1，每升染液其組分為：亮綠0.5g，曙紅微黃2.5g，無水乙醇500ml，磷鎢酸1g，乙醇200ml，冰乙酸20ml，磷酸緩沖液12ml，橘黃3g，純化水265ml。