[發明專利]分離蛋白的方法及設備

在審

• 申請號: 201810307711.1
• 申請日: 2018-04-08
• 公開（公告）號: CN108503684A
• 公開（公告）日: 2018-09-07
• 發明（設計）人: 徐小楊
• 申請（專利權）人: 廣州藍日生物科技有限公司
• 主分類號: C07K1/14
• 分類號: C07K1/14;C07K1/24;C07K14/78
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 梁順宜;郝傳鑫

本發明公開了一種分離蛋白的方法及設備，包括：將組織塊進行玻璃化冷凍，得到玻璃化冷凍后產物；對所述玻璃化冷凍產物進行凍干脫水，獲得凍干產物；對所述凍干產物進行脫脂處理，以獲得脫脂類凍干本底組分；將所述脫脂凍干本底組分進行分子粉體制備，以得到脫脂凍干本底組分分子粉體；將所述脫脂凍干本底組分分子粉體通過氣體離心法進行蛋白分離，以分離得到若干蛋白組分。本發明無需加入難以祛除的生理毒性物質，同時工序簡單，生產效率高，成本低。

技術領域

本發明涉及生物工程領域，尤其涉及一種分離蛋白的方法及設備。

背景技術

細胞與細胞間質，是再生醫療技術依賴的兩類基礎材料。比較而言，細胞的制備方法更受關注，而細胞間質的大規模分離純化技術與裝備的開發比較弱勢。細胞間質主要是蛋白成分，包括各種類型的膠原蛋白。

生物工程來源的人膠原蛋白相似物和直接人體組織來源的人源膠原蛋白，都需要經過分離純化工序以獲得臨床可用的成品。目前的蛋白純化工藝總體上是低溫液態分離，從組織糜產物中以沉淀、親和層析等方法分離目標分子。該工藝方法工序繁雜，生產效率低，需要加入難以祛除的生理毒性物質，如蛋白酶抑制劑，直接導致蛋白產品的價格高昂，無法普及應用。

發明內容

本發明實施例的目的是提供一種分離蛋白的方法及設備，本發明安全無污染，同時工序簡單，生產效率高，成本低。

為實現上述目的，本發明實施例提供了一種分離蛋白的方法，包括：

將組織塊進行玻璃化冷凍，得到玻璃化冷凍后產物；

對所述玻璃化冷凍產物進行真空凍干脫水，獲得凍干產物；其中，所述真空凍干脫水的起點溫度為所述玻璃化冷凍的溫度；

對所述凍干產物進行脫脂處理，以獲得脫脂類凍干本底組分；

將所述脫脂凍干本底組分進行分子粉體制備，以得到脫脂凍干本底組分分子粉體；

將所述脫脂凍干本底組分分子粉體通過氣體離心法進行蛋白分離，以分離得到若干蛋白組分。

進一步的，所述將所述脫脂凍干本底組分分子粉體通過氣體離心法進行蛋白分離，以分離得到若干蛋白組分后還包括：

對每一所述蛋白組分進行電場分離，從而得到純化后的蛋白組分。

進一步的，所述組織塊的獲取的方法包括：將組織或組織集合物進行切割，得到若干預定規格尺寸的組織塊。

進一步的，所述將組織塊進行玻璃化冷凍包括：將所述組織塊混入冷凍保護劑后置入液氮中進行玻璃化冷凍。

進一步的，所述對所述凍干產物進行脫脂處理，以獲得脫脂類凍干本底組分包括：

對所述凍干產物通過超臨界二氧化碳萃取法萃取所述糖類組分和脂類組分，以得到脫脂類凍干本底組分。

進一步的，所述將所述脫脂凍干本底組分分子粉體通過氣體離心法進行蛋白分離包括：將所述脫脂凍干本底組分分子粉體放入高速渦輪氣體梯度離心機以實現通過氣體離心法進行蛋白分離。

相應的，本發明實施例還提供的一種分離蛋白的設備，包括：

玻璃化冷凍裝置，用于將組織塊進行玻璃化冷凍，得到玻璃化冷凍后產物；

凍干脫水裝置，用于對所述玻璃化冷凍產物進行凍干脫水，獲得凍干產物；其中，所述凍干脫水的起點溫度為所述玻璃化冷凍的溫度；

脫脂裝置，用于對所述凍干產物進行脫脂處理，以獲得脫脂類凍干本底組分；

分子粉體制備裝置，用于將所述脫脂凍干本底組分進行分子粉體制備，以得到脫脂凍干本底組分分子粉體；