[發(fā)明專利]一種酶驅(qū)動瓶狀納米馬達及其制備方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810304951.6 | 申請日： | 2018-04-08 |
| 公開（公告）號： | CN108524941B | 公開（公告）日： | 2021-05-04 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 賀強;周昶;高長永;林之華 | 申請（專利權(quán)）人： | 哈爾濱工業(yè)大學(xué) |
| 主分類號： | A61K47/34 | 分類號： | A61K47/34;B81B1/00;B81C1/00 |
| 代理公司： | 北京隆源天恒知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11473 | 代理人： | 閆冬;吳航 |
| 地址： | 150001 黑龍江省*** | 國省代碼： | 黑龍江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 驅(qū)動 納米 馬達 及其 制備 方法 | ||
1.一種酶驅(qū)動瓶狀納米馬達，其特征在于，其包括瓶狀納米粒子骨架、位于所述骨架內(nèi)部的兩種酶，且所述酶驅(qū)動瓶狀納米馬達能沿葡萄糖濃度梯度進行趨化運動，且所述酶驅(qū)動瓶狀納米馬達采用如下方法制備：
步驟一、制備瓶狀納米粒子，
a、將0.0218-0.087 g聚環(huán)氧乙烷-聚環(huán)氧丙烷-聚環(huán)氧乙烷三嵌段共聚物和0.0182-0.073 g油酸鈉加入10 mL-30 mL去離子水中，得到混合溶液A，并在25 ℃水浴中以100 rpm的速度攪拌0.5-2 h；
b、將2-5 g核糖溶于20-50 mL去離子水中，并加入到所述混合溶液A中，在溫度為25 ℃水浴中，以100 rpm 的速度攪拌20-40 min，得到混合溶液B；
c、將所述混合溶液B轉(zhuǎn)移到75 mL反應(yīng)釜中，放入烘箱中，在160 ℃溫度下時，保持8-20h，并以8500 rpm 的速度離心10-30 min，收集得到瓶狀納米粒子粗產(chǎn)品；
d、用20mL-50 mL去離子水清洗所述粗產(chǎn)品3-5次，再用20mL-50 mL乙醇清洗2-3次，每次以8500 rpm 的速度離心15-25 min收集，最后在真空度130Pa-140 Pa，80 ℃環(huán)境下干燥，最終得到干燥的瓶狀納米粒子；
且所述瓶狀納米粒子為水熱碳化的碳基高分子，且所述瓶狀納米粒子的瓶壁厚為50-120 nm，瓶直徑為300-1000 nm，瓶長為400-1500 nm；
步驟二、將葡萄糖氧化酶和過氧化氫酶加入到緩沖溶液中，制備酶混合溶液；
步驟三、通過真空灌注法和超聲灌注法，將步驟二中所述酶混合溶液灌注進入步驟一所述的瓶狀納米粒子中；
步驟四、利用高速離心法去除步驟三所述瓶狀納米粒子外部多余的葡萄糖氧化酶和過氧化氫酶，最終獲得酶驅(qū)動瓶狀納米馬達。
2.一種如權(quán)利要求1所述的酶驅(qū)動瓶狀納米馬達的制備方法，其特征在于，其包括以下步驟：
步驟一、制備瓶狀納米粒子，
a、將0.0218-0.087 g聚環(huán)氧乙烷-聚環(huán)氧丙烷-聚環(huán)氧乙烷三嵌段共聚物和0.0182-0.073 g油酸鈉加入10 mL-30 mL去離子水中，得到混合溶液A，并在25 ℃水浴中以100 rpm的速度攪拌0.5-2 h；
b、將2-5 g核糖溶于20-50 mL去離子水中，并加入到所述混合溶液A中，在溫度為25 ℃水浴中，以100 rpm 的速度攪拌20-40 min，得到混合溶液B；
c、將所述混合溶液B轉(zhuǎn)移到75 mL反應(yīng)釜中，放入烘箱中，在160 ℃溫度下時，保持8-20h，并以8500 rpm 的速度離心10-30 min，收集得到瓶狀納米粒子粗產(chǎn)品；
d、用20mL-50 mL去離子水清洗所述粗產(chǎn)品3-5次，再用20mL-50 mL乙醇清洗2-3次，每次以8500 rpm 的速度離心15-25 min收集，最后在真空度130Pa-140 Pa，80 ℃環(huán)境下干燥，最終得到干燥的瓶狀納米粒子；
且所述瓶狀納米粒子為水熱碳化的碳基高分子，且所述瓶狀納米粒子的瓶壁厚為50-120 nm，瓶直徑為300-1000 nm，瓶長為400-1500 nm；
步驟二、將葡萄糖氧化酶和過氧化氫酶加入到緩沖溶液中，制備酶混合溶液；
步驟三、通過真空灌注法和超聲灌注法，將步驟二中所述酶混合溶液灌注進入步驟一所述的瓶狀納米粒子中；
步驟四、利用高速離心法去除步驟三所述瓶狀納米粒子外部多余的葡萄糖氧化酶和過氧化氫酶，最終獲得酶驅(qū)動瓶狀納米馬達。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的酶驅(qū)動瓶狀納米馬達的制備方法，其特征在于，步驟二中所述緩沖溶液為磷酸鹽緩沖液。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的酶驅(qū)動瓶狀納米馬達的制備方法，其特征在于，其包括以下步驟：
步驟一、制備瓶狀納米粒子；
a、將0.0218-0.087 g聚環(huán)氧乙烷-聚環(huán)氧丙烷-聚環(huán)氧乙烷三嵌段共聚物和0.0182-0.073 g油酸鈉加入10 mL-30 mL去離子水中，得到混合溶液A，并在25 ℃水浴中以100 rpm的速度攪拌0.5-2 h；
b、將2-5 g核糖溶于20-50 mL去離子水中，并加入到所述混合溶液A中，在溫度為25 ℃水浴中，以100 rpm 的速度攪拌20-40 min，得到混合溶液B；
c、將所述混合溶液B轉(zhuǎn)移到75 mL反應(yīng)釜中，放入烘箱中，在160 ℃溫度下時，保持8-20h，并以8500 rpm 的速度離心10-30 min，收集得到瓶狀納米粒子粗產(chǎn)品；
d、用20mL-50 mL去離子水清洗所述粗產(chǎn)品3-5次，再用20mL-50 mL乙醇清洗2-3次，每次以8500 rpm 的速度離心15-25 min收集，最后在真空度130Pa-140 Pa，80 ℃環(huán)境下干燥，最終得到干燥的瓶狀納米粒子；
步驟二、制備酶混合溶液；
將0.0025-0.02 g的葡萄糖氧化酶和0.0025-0.02 g的過氧化氫酶加入到1 mL的pH為6.5的磷酸鹽緩沖液中，超聲5-10 min，得到酶混合溶液C；
步驟三、灌注酶混合溶液進入瓶狀納米粒子中；
將0.15 mg-0.3 mg的步驟一所述的瓶狀納米粒子加入步驟二所述的酶混合溶液C中,超聲5-15 min,得到分散液D；將所述分散液D放入真空干燥箱中，干燥10-13 h后，取出分散液D，超聲20-40 min；
步驟四、去除多余的酶；
a、 將分散液D從超聲環(huán)境中取出，以8000 rpm 的速度離心8-15min，分離、收集瓶狀納米馬達粗產(chǎn)品；
b、向a中所述瓶狀納米馬達粗產(chǎn)品中加入10 mL pH為6.5的磷酸鹽緩沖液，以8000 rpm的速度離心8-15 min后，去除上層清液；
c、重復(fù)b中步驟3-5次，最終得到酶驅(qū)動瓶狀納米馬達。
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