[發明專利]一種用于農用廢棄物發酵的復合菌劑及其制備方法在審
| 申請號: | 201810304417.5 | 申請日: | 2018-04-04 |
| 公開(公告)號: | CN108587944A | 公開(公告)日: | 2018-09-28 |
| 發明(設計)人: | 劉海明 | 申請(專利權)人: | 北京航天恒豐科技股份有限公司 |
| 主分類號: | C12N1/20 | 分類號: | C12N1/20;C12N1/16;C12N1/14;C05F11/08;C12R1/10;C12R1/72;C12R1/885;C12R1/69;C12R1/645 |
| 代理公司: | 北京細軟智谷知識產權代理有限責任公司 11471 | 代理人: | 王金寶 |
| 地址: | 102402 北京市*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 復合菌劑 發酵 制備 乳酸菌 農用廢棄物 微生物 產朊假絲酵母 地衣芽孢桿菌 綠色木霉 雜菌污染 最終成品 培養基 白腐菌 米曲霉 復配 菌劑 菌種 抵抗 | ||
1.一種用于農用廢棄物發酵的復合菌劑,其特征在于,所述復合菌劑包括地衣芽孢桿菌、乳酸菌、產朊假絲酵母、綠色木霉、米曲霉和白腐菌,所述地衣芽孢桿菌、乳酸菌、產朊假絲酵母、綠色木霉、米曲霉和白腐菌的數量比為:7-9:1-3:3-5:2-4:1-3:1-3。
2.根據權利要求1所述的復合菌劑,其特征在于,所述復合菌劑采用如下制備方法制備而成:
A、將各菌種分為細菌組、酵母菌組和真菌組,分別經過發酵培養后,分別得到細菌菌液、酵母菌菌液和真菌菌液;
B、將步驟A得到的所述細菌菌液、酵母菌菌液和真菌菌液混合均勻后,得到所述復合菌劑。
3.根據權利要求2所述的復合菌劑,其特征在于,步驟A中,所述細菌菌液的制備方法為:將地衣芽孢桿菌和乳酸菌混合,在細菌種子培養基、36-38℃下培養16-20小時;然后在細菌搖床培養基、36-38℃、搖床轉速為120-160r/min下培養12-16小時;最后在細菌發酵培養基、36-38℃、搖床轉速為120-160r/min下發酵培養16-20小時,發酵培養完成后獲得母液,即為細菌菌液;
所述細菌種子培養基由以下重量百分數的組分制成:蔗糖5-10%,牛肉膏4-8%,磷酸氫二鈉0.1-0.3%,瓊脂1.5-2.5%,余量為水,pH值為7.0-7.5;
所述細菌搖床培養基由以下重量百分數的組分制成:蔗糖10-15%,豆粕粉6-10%,牛肉膏0.5-1%,酵母膏2-5%,硫酸鎂0.1-0.3%,磷酸氫二鈉0.1-0.4%,余量為水,pH值為7.0-7.5;
所述細菌發酵培養基由以下重量百分數的組分制成:蔗糖7-12%,豆粕粉0.5-1%,酵母膏4-6%,硫酸鎂0.15-0.25%,磷酸氫二鈉0.15-0.25%,磷酸二氫鉀0.1-0.3%,余量為水,pH值為7.0-7.5。
4.根據權利要求2所述的復合菌劑,其特征在于,步驟A中,所述酵母菌菌液的制備方法為:將產朊假絲酵母在酵母菌種子培養基、28-32℃、搖床轉速為140-160r/min下培養18-24小時;然后在酵母菌發酵培養基、29-33℃、搖床轉速為140-160r/min下發酵培養36-48小時,發酵培養完成后獲得母液,即為酵母菌菌液;
所述酵母菌種子培養基為:蔗糖8-12%,酵母膏0.7-1%,硫酸鎂0.05-0.15%,氯化鈣0.004-0.008%,其余為水,pH為4.5-5.0;
所述酵母菌發酵培養基為:蔗糖20-30%、牛肉膏0.4-0.6%、磷酸氫二鉀0.1-0.2%、硫酸鎂0.05-0.08%、氯化鈣0.004-0.008%,其余為水,pH為4.5-5.0。
5.根據權利要求2所述的復合菌劑,其特征在于,步驟A中,所述真菌菌液的制備方法為:將綠色木霉、米曲霉和白腐菌混合,在PD培養基、28-32℃、搖床轉速為140-160r/min下培養24-36小時;然后在真菌發酵培養基、29-33℃下靜置培養64-72小時,培養完成后獲得母液,即為真菌菌液;
所述PD培養基為馬鈴薯葡萄糖培養基;
所述真菌發酵培養基的含水量為55%,還包括硫酸銨0.5%和硫酸鎂0.05%,真菌發酵培養基含有的其他固體成分為麩皮和玉米粉,麩皮和玉米粉的重量比為8-10:0.8-1.2。
6.根據權利要求2所述的復合菌劑,其特征在于,步驟B中,將步驟A得到的所述細菌菌液、酵母菌菌液和真菌菌液混合均勻后,接種到綜合培養基上,在28-32℃、搖床轉速為120-140r/min下發酵培養,檢測有效活菌總數達到1億cfu/mL時,發酵培養結束,得到所述復合菌劑;
所述綜合培養基由以下重量百分數的組分制成:蔗糖5-10%,蜂蜜1-2%,抗壞血酸0.2-0.5%,硫酸鎂0.1-0.3%,磷酸氫二鈉0.1-0.4%,磷酸二氫鉀0.1-0.5%,余量為水,pH值為7.0-7.5。
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