[發明專利]一種預包被酶標板及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201810301911.6
• 申請日: 2018-04-04
• 公開（公告）號: CN108548919A
• 公開（公告）日: 2018-09-18
• 發明（設計）人: 茹志偉;楊翔;黃小燕;劉俊
• 申請（專利權）人: 廣州市雷德生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/535
• 分類號: G01N33/535
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟

1.一種預包被酶標板，其特征在于，所述酶標板依次包括抗體、隔離層溶液和抗原；

其中，所述抗原為與待檢樣本發生抗原抗體反應的特異性抗原，所述抗體為酶標記的抗人IgG抗體。

2.根據權利要求1所述的預包被酶標板，其特征在于，所述隔離層溶液為緩沖溶液體系；

優選地，所述緩沖溶液體系包括PBS緩沖溶液體系、碳酸氫鹽緩沖溶液體系或Tri-HCl緩沖溶液體系中的任意一種；

優選地，所述酶標記的抗人IgG抗體中的酶包括辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶、葡萄糖氧化酶、β-半乳糖苷酶、溶菌酶或蘋果酸脫氫酶中的任意一種或至少兩種的組合，優選為辣根過氧化物酶。

3.根據權利要求1或2所述的預包被酶標板，其特征在于，所述緩沖溶液體系中還包括BSA、海藻糖、蔗糖和甘氨酸；

優選地，所述BSA占緩沖溶液體系的質量濃度為1-10％，優選為3-8％；

優選地，所述海藻糖占緩沖溶液體系的質量濃度為0.1-3％，優選為0.8-2％；

優選地，所述蔗糖占緩沖溶液體系的質量濃度為0.1-3％，優選為0.3-1％；

優選地，所述甘氨酸占緩沖溶液體系的質量濃度為0.1-3％，優選為0.3-1％。

4.根據權利要求1-3中任一項所述的預包被酶標板，其特征在于，所述抗原為環瓜氨酸肽抗原；

優選地，所述抗原為生物素化抗原；

優選地，所述酶標板依次包括辣根過氧化物酶標記的抗人IgG抗體、包含有BSA、海藻糖、蔗糖和甘氨酸的PBS緩沖溶液體系的隔離層溶液以及結合在鏈霉親和素上的生物素化環瓜氨酸肽抗原。

5.根據權利要求1-4中任一項所述的預包被酶標板的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)將抗原加入到酶標板中，孵育包被；

(2)將隔離層溶液加入到步驟(1)包被抗原的酶標板中，封閉，干燥；

(3)將酶標記抗體加入到步驟(2)封閉后的酶標板中，干燥。

6.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述抗原的質量濃度為0.1-15μg/mL，優選為0.1-10μg/mL；

優選地，所述孵育的溫度為15-40℃，優選為18-37℃；

優選地，所述孵育的時間為0.1-4h，優選為0.5-2h；

優選地，所述封閉的溫度為15-40℃，優選為18-37℃；

優選地，所述封閉的時間為0.5-5h，優選為1-3h。

7.根據權利要求5或6所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)之前還包括包被鏈霉親和素的步驟；

優選地，所述鏈霉親和素的質量濃度為0.1-15μg/mL，優選為0.1-10μg/mL；

優選地，所述鏈霉親和素的孵育溫度為0-10℃，優選為2-8℃；

優選地，所述鏈霉親和素的孵育時間為10-20h，優選為12-18h。

8.一種試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括權利要求1-4中任一項所述的預包被酶標板。

9.根據權利要求8所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒中還包括樣本稀釋液、洗滌液、底物顯色液和終止反應液。

10.根據權利要求1-4中任一項所述的預包被酶標板和/或權利要求8所述的試劑盒用于檢測樣本中的抗體；

優選地，所述樣本包括血清樣本、血漿或滑膜液中的任意一種或至少兩種的組合。