[發(fā)明專利]表達(dá)豬圓環(huán)病毒Cap蛋白基因的重組豬偽狂犬病病毒弱毒株、及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810301212.1
• 申請日: 2018-04-04
• 公開（公告）號: CN110343670B
• 公開（公告）日: 2022-08-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 田克恭;肖燕;張超林;孫進(jìn)忠;張?jiān)S科
• 申請（專利權(quán)）人: 普萊柯生物工程股份有限公司
• 主分類號: C12N7/01
• 分類號: C12N7/01;A61K39/295;A61K39/12;A61K39/245;A61P31/22;A61P31/20
• 代理公司: 北京華夏正合知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11017
• 代理人: 韓登營

本發(fā)明提供了一種重組豬偽狂犬病病毒弱毒株，該弱毒株同時具有豬偽狂犬病病毒抗原的免疫原性和豬圓環(huán)病毒抗原的免疫原性。該重組豬偽狂犬病病毒弱毒株制備的疫苗組合物不僅能同時提供對豬偽狂犬病病毒和豬圓環(huán)病毒的完全保護(hù)；還能針對不同地域來源的豬圓環(huán)病毒完全保護(hù)，且保護(hù)效果優(yōu)于相應(yīng)的亞單位疫苗。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種表達(dá)豬圓環(huán)病毒Cap蛋白基因的重組豬偽狂犬病病毒弱毒株、制備方法及利用該重組病毒株制備的疫苗組合物，屬于獸用生物制品領(lǐng)域。

背景技術(shù)

豬圓環(huán)病毒(Porcine circovirus，PCV)屬于圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬，是目前為止發(fā)現(xiàn)的最小的脊椎動物病毒。PCV根據(jù)致病性、抗原性及核苷酸序列的不同分為PCV1、PCV2和PCV3三種基因型。其中PCV1廣泛存在于豬群但對其無致病性，基因組長度為1759bp。PCV2具有致病性，基因組長度為1767bp或者1768bp。PCV3是新近在豬的繁殖障礙病例中分離并確認(rèn)致病病原的豬圓環(huán)病毒，基因組長度為2.0kb。

豬偽狂犬病毒(Pseudorabies virus，PRV)主要引起豬嚴(yán)重的神經(jīng)癥狀、呼吸道疾病和生殖障礙。豬的偽狂犬病在我國廣泛存在，危害嚴(yán)重，是制約規(guī)模化豬場生產(chǎn)的主要疫病之一。最近流行的豬偽狂犬病發(fā)生了新的特點(diǎn)，突出表現(xiàn)為任何年齡的豬都會感染，可在豬群水平傳播，潛伏期短(1～2天)，發(fā)病率最高可達(dá)100％，發(fā)病豬死亡率最高可達(dá)100％，感染后可引起豬只高熱(40～42℃，持續(xù)3日以上)。現(xiàn)有技術(shù)的疫苗免疫豬只后不能完全抵抗野毒攻擊，依然會出現(xiàn)高熱，精神沉郁，食欲下降或廢絕等癥狀，感染率超過80％，發(fā)病率超過30％，死亡率在10％～20％之間。

臨床上，PCV2、PCV3與PRV常呈現(xiàn)混合感染情況，從而使疫情變得更加嚴(yán)重。目前國內(nèi)外還沒有一種能同時控制PCV2、PCV3、PRV感染的疫苗，更沒有一種能同時控制最近流行的PCV2、PCV3、新的PRV感染的疫苗，因此，為應(yīng)對臨床上新的情況，急需提供一種能一針解決這幾種疫病爆發(fā)的疫苗。

發(fā)明內(nèi)容

為解決上述問題，本發(fā)明將豬圓環(huán)病毒Cap蛋白基因重組進(jìn)豬偽狂犬病病毒弱毒株，構(gòu)建表達(dá)豬圓環(huán)病毒Cap蛋白基因的重組豬偽狂犬病病毒株。

本發(fā)明提供一種重組豬偽狂犬病病毒弱毒株，其中，所述重組豬偽狂犬病病毒弱毒株基因組重組有豬圓環(huán)病毒Cap蛋白，能表達(dá)豬圓環(huán)病毒Cap蛋白，所述豬圓環(huán)病毒Cap蛋白基因?yàn)樨i圓環(huán)病毒2型和/或3型Cap蛋白基因。

本發(fā)明的重組豬偽狂犬病病毒弱毒株能表達(dá)豬圓環(huán)病毒Cap蛋白，因此不僅具有豬偽狂犬病病毒抗原的免疫原性，還具有豬圓環(huán)病毒抗原的免疫原性。

作為本發(fā)明的一種實(shí)施方式，本發(fā)明所述重組豬偽狂犬病病毒弱毒株來源的豬偽狂犬病病毒弱毒株為豬偽狂犬病病毒變異株的弱毒株。

作為本發(fā)明的一種優(yōu)選實(shí)施方式，所述豬偽狂犬病病毒的弱毒株為HN1201株或HN1202株的弱毒株。

作為本發(fā)明的一種更優(yōu)選實(shí)施方式，所述豬偽狂犬病病毒弱毒株為HN1201-R株。

作為本發(fā)明的一種實(shí)施方式，本發(fā)明的重組豬偽狂犬病病毒弱毒株中，所述豬圓環(huán)病毒2型Cap蛋白基因?yàn)樨i圓環(huán)病毒2型new基因亞型Cap蛋白基因。

作為本發(fā)明的一種優(yōu)選實(shí)施方式，本發(fā)明的重組豬偽狂犬病病毒弱毒株中，所述豬圓環(huán)病毒2型new基因亞型Cap蛋白基因?yàn)镾EQ ID.NO.1或其簡并序列所示，所述豬圓環(huán)病毒3型Cap蛋白基因?yàn)镾EQ ID.NO.2或其簡并序列所示。

本發(fā)明還涉及一種疫苗組合物，其中，所述疫苗組合物包括免疫量的上述的重組豬偽狂犬病病毒弱毒株和凍干保護(hù)劑。