[發(fā)明專利]陽離子修飾的瓊脂糖和核酸藥物組合物及制備方法和應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810290405.1
• 申請日: 2018-04-03
• 公開（公告）號: CN108553479A
• 公開（公告）日: 2018-09-21
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張峻峰;胡俊青;黃振;董磊
• 申請（專利權(quán)）人: 南京大學(xué)
• 主分類號: A61K31/7088
• 分類號: A61K31/7088;A61K47/36;A61P35/04
• 代理公司: 南京知識律師事務(wù)所 32207
• 代理人: 胡錫瑜

本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種陽離子修飾的瓊脂糖和核酸藥物組合物及其制備方法和靶向淋巴結(jié)免疫治療用于阻斷腫瘤遷移的應(yīng)用。氨基修飾的方式是氨基為伯氨基或仲氨基或叔氨基，氨基化形式為單氨基化或多氨基化，連接方式和數(shù)量不受限制；核酸藥物為質(zhì)粒或小片段的DNA或RNA或DNA和RNA的雜合。所述靶向淋巴結(jié)的載體?核酸藥物給藥體系可以有效破壞淋巴結(jié)中的免疫抑制性環(huán)境，恢復(fù)淋巴結(jié)固有的免疫應(yīng)答體制，從而達(dá)到阻斷腫瘤經(jīng)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的目的，可在阻斷腫瘤遷移中應(yīng)用。

一、技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種陽離子修飾的瓊脂糖和核酸藥物組合物及其制備方法和靶向淋巴結(jié)免疫治療用于阻斷腫瘤遷移的應(yīng)用。

二、背景技術(shù)

腫瘤轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致惡性腫瘤患者死亡的主要原因。惡性腫瘤轉(zhuǎn)移的途徑主要有直接蔓延、血行轉(zhuǎn)移、淋巴轉(zhuǎn)移和種植轉(zhuǎn)移。淋巴結(jié)作為哺乳動物特有的周圍淋巴器官，廣泛分布于全身的淋巴通道上，是天然免疫反應(yīng)與獲得性免疫反應(yīng)相互作用的重要場所，是腫瘤細(xì)胞淋巴轉(zhuǎn)移的必經(jīng)部位。其中臨床和病理研究已經(jīng)證實淋巴轉(zhuǎn)移是大部分實體腫瘤擴(kuò)散的早期事件，也是黑色素瘤、乳腺癌等腫瘤轉(zhuǎn)移的首要途徑。腫瘤細(xì)胞最早入侵的前哨淋巴結(jié)以及后續(xù)到達(dá)的腫瘤引流淋巴結(jié)內(nèi)部會因為接受來自于腫瘤的含有大量免疫抑制性物質(zhì)的組織液后而形成有利于腫瘤細(xì)胞生長的溫床，腫瘤細(xì)胞可以在腫瘤相關(guān)區(qū)域淋巴結(jié)中迅速增殖，并以此為跳板通過血管轉(zhuǎn)移至遠(yuǎn)端淋巴結(jié)和其它內(nèi)臟器官，而次發(fā)部位的腫瘤急劇生長通常會影響正常的機(jī)體功能導(dǎo)致患者死亡。因此通過阻斷腫瘤細(xì)胞經(jīng)淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移進(jìn)程可以顯著降低癌癥患者死亡幾率。

然而，長期以來，阻斷腫瘤淋巴轉(zhuǎn)移的主要臨床手段還僅僅是淋巴結(jié)清掃術(shù)，而淋巴結(jié)清掃術(shù)很可能誤將處于抗腫瘤免疫活躍狀態(tài)的正常淋巴結(jié)切除從而破壞機(jī)體針對腫瘤的正常免疫反應(yīng)，此外淋巴結(jié)清掃術(shù)帶來的術(shù)后并發(fā)癥比如疼痛、淋巴回流水腫及關(guān)節(jié)運(yùn)動障礙會給患者術(shù)后恢復(fù)和生活質(zhì)量都會造成較大的影響。因此，為提高腫瘤患者的生活質(zhì)量，探索并建立全新的非手術(shù)治療手段用于阻斷腫瘤的淋巴轉(zhuǎn)移是極為必要的。鑒于腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)區(qū)域的淋巴結(jié)處于免疫抑制的狀態(tài)，而腫瘤細(xì)胞偏好在免疫抑制的微環(huán)境中生長增殖，理論上通過藥物治療破壞淋巴結(jié)中的免疫抑制性環(huán)境，恢復(fù)淋巴結(jié)固有的免疫應(yīng)答體制同樣可以達(dá)到阻斷腫瘤經(jīng)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的目的。然而目前為止臨床上卻很少通過藥物治療這種非手術(shù)的措施來阻止腫瘤的淋巴轉(zhuǎn)移。這主要是因為淋巴結(jié)與其它內(nèi)臟器官不同，其定位散布于全身，而且淋巴結(jié)的主要組成細(xì)胞如T細(xì)胞，B細(xì)胞，樹突狀細(xì)胞(DC)等免疫細(xì)胞主要來自于外周循環(huán)系統(tǒng)和其它免疫器官，淋巴結(jié)自身獨有的細(xì)胞種類較少。淋巴結(jié)中的絕大部分免疫細(xì)胞都處于動態(tài)移動的狀態(tài)，因此在缺少淋巴結(jié)特異性的治療分子靶點的情況下，全身給藥無法保證小分子藥物以及蛋白類藥物特異性的針對淋巴結(jié)發(fā)揮功能，其治療效果不確定的同時還會帶來嚴(yán)重的副作用。

三、發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明需要解決的問題就是公開了一種靶向淋巴結(jié)特有的被膜下竇巨噬細(xì)胞(SCS巨噬細(xì)胞)的載體-核酸藥物給藥體系及其在抗腫瘤轉(zhuǎn)移中的應(yīng)用，具體涉及到陽離子修飾的瓊脂糖(C-agarose)和核酸藥物組合物的淋巴結(jié)靶向特性在阻斷腫瘤遷移的治療應(yīng)用。

本發(fā)明提供的陽離子修飾的瓊脂糖是具有以下結(jié)構(gòu)的化合物：

陽離子修飾的瓊脂糖的R1，R2，R3，R4可以分別是一個氫原子或者是一個選自以下基團(tuán)組的取代基，這個基團(tuán)組為伯氨基或仲氨基或叔氨基或長鏈長為一到十個碳原子的直鏈或者支鏈的含有氨基的碳鏈，上述化合物至少含有一個取代基。

陽離子修飾的瓊脂糖制備過程中所采用的各種試劑配比是獲取陽離子修飾的瓊脂糖的最佳反應(yīng)試劑配比，但是不應(yīng)視為對陽離子修飾的瓊脂糖制備方法的限制。

本發(fā)明中使用的核酸藥物為質(zhì)粒或小片段的DNA，RNA或DNA和RNA的雜合。本次實驗中采用的核酸藥物為富含CG的寡聚核苷酸(CpG)，但是不應(yīng)視為對核酸藥物使用種類的限制。