[發明專利]一種微流控芯片及循環外泌體的檢測方法

有效

• 申請號: 201810287309.1
• 申請日: 2018-03-30
• 公開（公告）號: CN110320355B
• 公開（公告）日: 2022-03-01
• 發明（設計）人: 段友容;趙德;武志華;付豪;董陽;王麗婷;張燕華
• 申請（專利權）人: 上海市腫瘤研究所
• 主分類號: G01N33/533
• 分類號: G01N33/533;G01N33/543;B01L3/00
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 馬思敏;馬莉華

1.一種微流控芯片，其特征在于，所述微流控芯片包括：一微流控通道，所述微流控通道設有通道入口、通道出口和至少一個用于捕獲外泌體的捕獲段；

其中，所述捕獲段從外至內包括基體層、位于所述基體層上的Zn基材料層、位于所述Zn基材料層上的表面修飾層和負載于所述表面修飾層上的捕獲抗體，所述捕獲抗體用于捕獲外泌體；

所述Zn基材料選自下組：Zn(OH)F和ZnO/Zn(OH)F；

所述Zn基材料層為Zn基納米結構陣列。

2.如權利要求1所述微流控芯片，其特征在于，所述表面修飾層的材料選自下組：陰離子聚電解質、硅烷偶聯劑，或其組合。

3.如權利要求1所述微流控芯片，其特征在于，所述表面修飾層的材料為陰離子聚電解質。

4.如權利要求1所述微流控芯片，其特征在于，所述微流控通道的基體的內徑為100-1000μm，外徑尺寸為內徑尺寸110-200％。

5.如權利要求1所述微流控芯片，其特征在于，所述捕獲抗體選自下組：anti-CD 63、anti-CD81、anti-CD9、anti-EpCAM，或其組合。

6.如權利要求1所述微流控芯片，其特征在于，所述Zn基材料為ZnO/Zn(OH)F。

7.如權利要求2所述微流控芯片，其特征在于，所述納米結構陣列為由納米棒組成的網絡狀結構。

8.如權利要求7所述微流控芯片，其特征在于，所述納米棒直徑為10-500nm；和/或

所述納米棒長度為100-30000nm。

9.如權利要求2所述微流控芯片，其特征在于，所述陰離子聚電解質選自下組：聚苯乙烯磺酸鈉、聚乙烯磺酸鉀、聚丙烯酰胺，或其組合。

10.如權利要求2所述微流控芯片，其特征在于，所述硅烷偶聯劑選自下組：3-縮水甘油基氧基丙基三甲氧基硅烷、3-氨丙基三乙氧基硅烷，3-(三甲氧基甲硅基)甲基丙烯酸丙酯，或其組合。

11.如權利要求1所述微流控芯片，其特征在于，所述微流控通道的長度為1-10cm。

12.如權利要求1所述微流控芯片，其特征在于，所述微流控通道的基體的材質為硅酸鹽。

13.如權利要求1所述微流控芯片，其特征在于，所述微流控通道的基體的材質為石英或玻璃。

14.一種試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括：

(a)如權利要求1所述微流控芯片；和

(b)免疫金納米粒和/或熒光抗體。

15.如權利要求14所述試劑盒，其特征在于，所述免疫金納米粒表面負載的抗體選自下組：anti-CD 63、anti-CD81、anti-CD9、anti-EpCAM，或其組合。

16.如權利要求14所述試劑盒，其特征在于，所述熒光抗體選自下組：anti-CD63、anti-CD81、anti-CD9、anti-EpCAM，或其組合。

17.如權利要求14所述試劑盒，其特征在于，所述捕獲抗體、免疫金納米粒表面負載的抗體和熒光抗體所分別針不同的循環外泌體表面特異性標志物。

18.一種用如權利要求1所述微流控芯片檢測循環外泌體的方法，其特征在于，所述方法包括步驟：

(1)向微流控通道中注入待測樣本，使待測樣本中的循環外泌體與負載于所述表面修飾層上的捕獲抗體結合后，清洗微流控通道，完成對循環外泌體的捕獲；

(2)向微流控通道通入熒光抗體和/或免疫金納米粒，使熒光抗體和/或免疫金納米粒與循環外泌體結合后，清洗；

(3)進行熒光測定和/或表面增強拉曼光譜測定。