[發明專利]一種雙抗夾心法酶免疫層析檢測試劑盒及制備方法與應用

有效

• 申請號: 201810283311.1
• 申請日: 2018-04-02
• 公開（公告）號: CN110346554B
• 公開（公告）日: 2023-04-18
• 發明（設計）人: 田克恭;王瑩
• 申請（專利權）人: 洛陽普泰生物技術有限公司;洛陽中科基因檢測診斷中心有限公司
• 主分類號: G01N33/535
• 分類號: G01N33/535;G01N33/543
• 代理公司: 北京華夏正合知識產權代理事務所(普通合伙) 11017
• 代理人: 韓登營

1.一種雙抗夾心法酶免疫層析檢測試劑盒，所述試劑盒包括酶免疫層析檢測試紙條、樣品處理液、緩沖液和緩沖液供應單元，其特征在于，

所述緩沖液包含磷酸鹽緩沖液、大分子蛋白、Tween-20和Proclin300，以及過氧化氫脲、過氧化氫尿素、雙氧水中的任一種；

所述磷酸鹽緩沖液為pH7.4?0.1M?PBS溶液；

所述大分子蛋白為BSA或OVA；

所述過氧化氫脲、過氧化氫尿素、雙氧水的濃度為0.02%～0.2%W/V；

所述酶免疫層析檢測試紙條包括底物墊，其上吸附有經底物墊稀釋液稀釋后干燥而成的酶底物，所述底物墊稀釋液包括無水乙醇、pH7.4?0.1M?PBS溶液以及0.5%～4%W/VPEG6000或PEG4000；

所述酶免疫層析檢測試紙條包括酶標墊，其上吸附有經酶標抗體稀釋液稀釋后干燥而成酶標抗體，所述酶標抗體稀釋液包括pH7.4?0.1M?PBS溶液、以及0.5%V/V?PEG4000、PEG6000或PEG8000中的任一種；

所述酶免疫層析檢測試紙條包括檢測線和質控線，所述檢測線上固定有經固定抗體稀釋液稀釋的固定抗體，所述固定抗體稀釋液包括pH7.4?0.1M?PBS溶液、0.5%V/V海藻糖、0.1%V/V?Tween-20；

酶標抗體中的單克隆抗體和固定抗體中的單克隆抗體

為CCTCC?No:?C2014198小鼠雜交瘤細胞3G12分泌的豬圓環病毒2型單克隆抗體3G12和CCTCC?No:?C2014199小鼠雜交瘤細胞2F8分泌的豬圓環病毒2型單克隆抗體2F8的任意組合；或者

為豬流行性腹瀉病毒單克隆抗體PEDV-McAB2和豬流行性腹瀉病毒單克隆抗體PEDV-McAB1的任意組合，所述單克隆抗體PEDV-McAB2重鏈可變區為SEQ?ID?No.1所示、輕鏈可變區為SEQ?ID?No.2所示，所述單克隆抗體PEDV-McAB1重鏈可變區為SEQ?ID?No.3所示、輕鏈可變區為SEQ?ID?No.4所示；或者

為豬傳染性胃腸炎病毒單克隆抗體TGEV-3D2和豬傳染性胃腸炎病毒單克隆抗體TGEV-4B4的任意組合，所述單克隆抗體TGEV-3D2重鏈可變區為SEQ?ID?No.5所示、輕鏈可變區為SEQ?ID?No.6所示，所述單克隆抗體TGEV-4B4重鏈可變區為SEQ?ID?No.7所示、輕鏈可變區為SEQ?ID?No.8所示；或者

為抗A型流感病毒核蛋白單克隆抗體IV-McAB1和抗A型流感病毒核蛋白單克隆抗體IV-McAB2的任意組合，所述單克隆抗體IV-McAB1重鏈可變區為SEQ?ID?No.9所示、輕鏈可變區為SEQ?ID?No.10所示，所述單克隆抗體IV-McAB2重鏈可變區為SEQ?ID?No.11所示、輕鏈可變區為SEQ?ID?No.12所示；或者

為CCTCC?No:?C201578小鼠骨髓雜交瘤細胞10B11株分泌的犬細小病毒單克隆抗體CPV-10B11和CCTCC?No:?C201579小鼠骨髓雜交瘤細胞10H4株分泌的犬細小病毒單克隆抗體CPV-10H4的任意組合；或者

為CCTCC?No：C2015201小鼠骨髓雜交瘤細胞1G5分泌的犬瘟熱病毒單克隆抗體CDV-1G5和CCTCC?No：C2015202小鼠骨髓雜交瘤細胞6E11株分泌的犬瘟熱病毒單克隆抗體CDV-6E11的任意組合；或者

為犬腺病毒單克隆抗體CAV-5G4和犬腺病毒單克隆抗體CAV-1A1的任意組合，所述單克隆抗體CAV-5G4重鏈可變區為SEQ.?ID?No.13所示、輕鏈可變區為SEQ.?ID?No.14所示，所述單克隆抗體CAV-1A1重鏈可變區為SEQ.?ID?No.15所示、輕鏈可變區為SEQ.?ID?No.16所示。

2.根據權利要求1所述的酶免疫層析檢測試劑盒，其特征在于，所述過氧化氫脲、過氧化氫尿素、雙氧水的濃度為0.05%～0.1%W/V。

3.根據權利要求1所述的酶免疫層析檢測試劑盒，其特征在于，所述緩沖液包含pH7.40.1M?PBS溶液、0.1%～0.5%V/V?Tween-20、0.02%V/V?Proclin300、0.05%V/V過氧化氫脲、以及0.5%～1%W/V的BSA或OVA。