[發(fā)明專利]一種臍帶間充質(zhì)干細胞誘導(dǎo)成軟骨細胞的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810281561.1
• 申請日: 2018-04-02
• 公開（公告）號: CN108753700A
• 公開（公告）日: 2018-11-06
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳海佳;葛嘯虎;王一飛;羅二梅;王小燕
• 申請（專利權(quán)）人: 廣州賽萊拉干細胞科技股份有限公司
• 主分類號: C12N5/077
• 分類號: C12N5/077;C12N5/0775
• 代理公司: 北京集佳知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 劉偉;趙青朵

本發(fā)明屬于干細胞領(lǐng)域，公開了一種臍帶間充質(zhì)干細胞的成軟骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基及臍帶間充質(zhì)干細胞誘導(dǎo)成軟骨細胞的方法。本發(fā)明所述臍帶間充質(zhì)干細胞的成軟骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基，包含細胞因子bFGF。本發(fā)明所述方法以明膠微粒作為支架材料，采用三維培養(yǎng)的方式，以所述臍帶間充質(zhì)干細胞的成軟骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)培養(yǎng)臍帶間充質(zhì)干細胞成軟骨細胞，誘導(dǎo)效果更好，成功率較高、得到的細胞量較多。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于干細胞領(lǐng)域，具體涉及一種臍帶間充質(zhì)干細胞誘導(dǎo)成軟骨細胞的方法。

背景技術(shù)

在骨科工作中，各種原因所致的關(guān)節(jié)軟骨損傷很常見。由外傷、手術(shù)切除(如腫瘤)、感染、痛風和退變引起關(guān)節(jié)部位骨軟骨缺損，常表現(xiàn)為頑固性疼痛、關(guān)節(jié)活動障礙，嚴重者可喪失關(guān)節(jié)功能，成為導(dǎo)致殘廢和勞動能力喪失的主要原因之一。軟骨由于其自身的特點，如無血管、神經(jīng)和淋巴引流，僅靠關(guān)節(jié)腔內(nèi)滑液獲取營養(yǎng)為主的生理學(xué)特點，決定了它極其有限的再生能力，其不能自行修復(fù)。

目前治療軟骨損傷的方法均有明顯缺陷，組織工程軟骨修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷為微創(chuàng)治療軟骨缺損提供了新方法。然而種子細胞來源一直是限制軟骨組織工程發(fā)展的主要瓶頸。軟骨細胞增殖能力有限，體外大量擴增后容易發(fā)生老化和去分化，喪失軟骨的形成能力。且軟骨細胞的增殖能力隨年齡的增長而逐步下降進一步限制了其在組織工程中的應(yīng)用。因此，尋求一種合適的種子細胞的來源顯得尤為重要。

臍帶間充質(zhì)干細胞是指存在于新生兒臍帶組織中的一種多功能干細胞，在體內(nèi)或體外特定的誘導(dǎo)條件下，可分化為脂肪、骨、軟骨、肌肉、肌腱、韌帶、神經(jīng)、肝、心肌、內(nèi)皮等多種組織細胞，連續(xù)傳代培養(yǎng)和冷凍保存后仍具有多向分化潛能，可作為理想的種子細胞用于衰老和病變引起的組織器官損傷修復(fù)，具有廣闊的臨床應(yīng)用前景。

現(xiàn)有技術(shù)中臍帶間充質(zhì)干細胞誘導(dǎo)成軟骨主要采用傳統(tǒng)的二維誘導(dǎo)方法，即臍帶間充質(zhì)干細胞達到80％融合時換成成軟骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基(具體成分見表1)。但是傳統(tǒng)的二維誘導(dǎo)方法，成功率較低，且得到的細胞量較少，不夠臨床使用。

表1傳統(tǒng)的成軟骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基