[發明專利]一種集成細胞捕獲、三維基底培養及生物分析的芯片

在審

• 申請號: 201810281320.7
• 申請日: 2018-04-02
• 公開（公告）號: CN110343655A
• 公開（公告）日: 2019-10-18
• 發明（設計）人: 陸瑤;白瑞寒;李林梅;劉梅梅;顏世強;白雪;林炳承
• 申請（專利權）人: 中國科學院大連化學物理研究所
• 主分類號: C12N5/00
• 分類號: C12N5/00
• 代理公司: 沈陽晨創科技專利代理有限責任公司 21001
• 代理人: 鄭虹

1.一種集成細胞捕獲、三維基底培養及生物分析的芯片，其特征在于該芯片包括三層結構，下層是含有微納結構的細胞三維培養基底，中層是微孔陣列穿孔膜，上層是生物分析基底。

2.根據權利要求1所述的集成細胞捕獲、三維基底培養及生物分析的芯片，其特征在于所述細胞三維培養基底材料包括但不限于硅片、PDMS、水凝膠、聚合物支架、三維聚苯乙烯支架、聚偏二氟乙烯膜、硝酸纖維素膜或各種孔徑的濾紙。

3.根據權利要求1所述的集成細胞捕獲、三維基底培養及生物分析的芯片，其特征在于所述微孔陣列穿孔膜由彈性材料制成，所述彈性材料包括但不限于PDMS及各種修飾后的PDMS。

4.根據權利要求3所述的集成細胞捕獲、三維基底培養及生物分析的芯片，其特征在于所述微孔陣列穿孔膜含陣列分布的穿孔，穿孔形狀包括正多邊形、矩形或圓形，穿孔數目為1～1000000個/cm²，穿孔尺寸為1μm～1cm，穿孔膜厚度為1μm～1mm。

5.根據權利要求1所述的集成細胞捕獲、三維基底培養及生物分析的芯片，其特征在于所述生物分析基底包括但不限于多聚賴氨酸玻璃、環氧樹脂玻璃、或者包被了蛋白、抗體或DNA的玻片、或者包被了蛋白陣列、抗體陣列或DNA陣列的玻片。

6.根據權利要求1所述的一種集成細胞捕獲、三維基底培養及生物分析的芯片的應用，其特征在于該芯片可用于多種細胞分析、多種細胞的單細胞分析、多種細胞的多重生物分子分析或多種細胞的單細胞多重生物分子分析。

7.根據權利要求6所述的一種集成細胞捕獲、三維基底培養及生物分析的芯片的應用，其特征在于所述的多種細胞包括但不限于哺乳細胞、動物細胞。

8.根據權利要求1所述的一種集成細胞捕獲、三維基底培養及生物分析的芯片的應用，其特征在于所述的多重生物分子分析，包括但不限于分泌蛋白、細胞因子、多肽、肽段、核酸、細胞表面蛋白、細胞表面受體、激素、抗原、生長因子或外泌體的分析。

9.根據權利要求8所述的根據權利要求1所述的一種集成細胞捕獲、三維基底培養及生物分析的芯片的應用，其特征在于所述的多重生物分子分析中的多重分析包括從1到100個指標的分析。

10.根據權利要求8所述的根據權利要求1所述的一種集成細胞捕獲、三維基底培養及生物分析的芯片的應用，其特征在于檢測分泌蛋白的應用方法具體為：

在多聚賴氨酸玻片上包被上捕獲抗體；將細胞三維培養基底和微孔陣列穿孔膜組裝起來；將細胞以一定密度種在芯片上；蓋上包被了捕獲抗體的玻片，用夾具固定，置培養箱中培養一定時間；顯微鏡拍照；卸下夾具，夾心免疫法進行后續分泌蛋白的檢測。