[發(fā)明專利]降低由PD-L1誘導的免疫耐受性

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810281004.X
• 申請日: 2016-03-01
• 公開（公告）號: CN108410892B
• 公開（公告）日: 2021-05-28
• 發(fā)明（設計）人: 吳昭
• 申請（專利權）人: 上海斯丹賽生物技術有限公司
• 主分類號: C12N15/62
• 分類號: C12N15/62;C12N15/63;C12N5/10;A61K35/17;A61P35/00;A61P37/02;A61P37/04;A61P3/04
• 代理公司: 江蘇瑞途律師事務所 32346
• 代理人: 陳彬

本公開涉及用于降低與CAR T細胞療法相關的免疫耐受性的組合物和方法。本公開的實施例包括分離的核酸序列，所述分離的核酸序列包含編碼經修飾的程序性細胞死亡蛋白質1(PD?1)的核酸序列和編碼嵌合抗原受體(CAR)的核酸序列。

本申請是2016年3月1日提交的,申請?zhí)枮?01680002926.1,發(fā)明名稱為“降低由PD-L1誘導的免疫耐受性”的中國發(fā)明專利申請的分案申請。

技術領域

本公開涉及經修飾的細胞和使用者，尤其涉及用于降低與CAR T細胞療法相關的免疫耐受性的組合物和方法。

背景技術

T細胞療法已經證明了用于治療癌癥的療效和治療潛力。然而，它們的使用受到免疫抑制微環(huán)境的存在的限制。免疫抑制微環(huán)境包括由程序性死亡-1(PD-1)與PD-L1配體(PD-L1)之間的相互作用所誘導的免疫耐受性。PD-1是在T細胞和抗原呈遞細胞上的陰性共調節(jié)受體。PD-L1由幾種細胞類型(例如，腫瘤細胞和其它組織細胞)表達，并且表現為由免疫微環(huán)境進行動態(tài)調節(jié)。因此，需要解決由PD-L1誘導的免疫耐受性，以改善T細胞療法的療效。

發(fā)明內容

本公開的實施例涉及一種包含編碼經修飾的程序性細胞死亡蛋白質1(PD-1)的核酸序列和編碼嵌合抗原受體(CAR)的核酸序列的分離的核酸序列。在某些實施例中，經修飾的PD-1和CAR被表達為基因產物，所述基因產物為單獨的多肽。

在一些實施例中，CAR對存在于癌細胞上的腫瘤抗原是特異性的，并且其中所述癌細胞表達PD-L1。

在一些實施例中，腫瘤抗原包含HER2、CD19、CD20、CD22、κ輕鏈、CD30、CD33、CD123、CD38、ROR1、ErbB3/4、EGFR、EGFRvIII、EphA2、FAP、癌胚抗原、EGP2、EGP40、間皮素、TAG72、PSMA、NKG2D配體、B7-H6、IL-13受體α2、IL-11受體α、MUC1、MUC16、CA9、GD2、GD3、HMW-MAA、CD171、Lewis Y、G250/CAIX、HLA-AI MAGE A1、HLA-A2NY-ESO-1、PSC1、葉酸受體-α、CD44v7/8、8H9、NCAM、VEGF受體、5T4、胎兒型乙酰膽堿受體、NKG2D配體、CD44v6、TEM1、TEM8，或者由腫瘤表達的病毒相關抗原。

在一些實施例中，與編碼野生型PD-1的胞內部分的核酸序列相比，編碼經修飾的PD-1的核酸序列包含一個或多個核苷酸的取代或者缺失。

在一些實施例中，與編碼野生型PD-1的胞內部分的核酸序列相比，編碼經修飾的PD-1的核酸序列包含多個核苷酸的缺失。在某些實施例中，經修飾的PD-1包含SEQ ID NO:14的核酸序列。

在一些實施例中，編碼經修飾的PD-1的核酸序列包含編碼截斷的PD-1的核酸，所述截斷的PD-1不包括胞內結構域。在某些實施例中，編碼經修飾的PD-1的核酸序列包含SEQID NO:12的核酸序列。

在一些實施例中，與野生型PD-1相比，經修飾的PD-1包含一個或多個點突變。在某些實施例中，點突變包含野生型PD-1的磷酸化位點的一個或兩個氨基酸點突變。

實施例進一步涉及一種包含如上所述的核酸序列的表達載體。在一些實施例中，表達載體是選自由以下組成的群組的病毒載體：逆轉錄病毒載體、慢病毒載體、腺病毒載體和腺相關病毒載體。

實施例進一步涉及一種包含本公開的表達載體的細胞。在一些實施例中，所述細胞選自由以下組成的群組：T細胞、NK細胞和NKT細胞。

實施例進一步涉及一種包含抗腫瘤有效量的人T細胞群的藥物組合物，其中所述人T細胞群包括包含如上所述的分離的核酸序列的人T細胞。在一些實施例中，PD-L1對所述人T細胞群的細胞因子產生的抑制作用小于PD-L1對不包含編碼經修飾的PD-1的核酸序列的至少一部分的人T細胞的細胞因子產生的抑制作用。