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[發明專利]一種復合微生物制劑及其在防治疫霉中的用途有效

專利信息
申請號: 201810280288.0 申請日: 2018-04-02
公開(公告)號: CN108410740B 公開(公告)日: 2021-03-26
發明(設計)人: 葉志堅;周競夫;齊曄;朱錫杭;朱增湖 申請(專利權)人: 武漢潤遠暢維生物科技有限公司
主分類號: C12N1/14 分類號: C12N1/14;C12N1/16;C12N1/20;A01N63/32;A01N63/38;A01N63/22;A01N63/20;A01P3/00;C12R1/885;C12R1/645;C12R1/125;C12R1/38
代理公司: 北京成實知識產權代理有限公司 11724 代理人: 陳永虔
地址: 430000 湖北省武漢市東湖新技術開*** 國省代碼: 湖北;42
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摘要:
搜索關鍵詞: 一種 復合 微生物 制劑 及其 防治 中的 用途
【權利要求書】:

1.一種復合微生物制劑,其特征在于,所述復合微生物制劑按照如下工藝制備而得:將康氏木霉-絲孢酵母混合發酵液、沼澤紅假單胞菌發酵液、枯草芽孢桿菌發酵液按照5-8:2-3:2-3的體積比混合均勻,然后真空冷凍干燥制得菌粉,即得;所述康氏木霉(Trichoderma koningii)為ATCC66766;所述絲孢酵母(Trichosproom sp.)為ATCC201110;所述沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudanonas palustris)為ATCC 17001;所述枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)為ATCC 6633。

2.根據權利要求1所述的微生物制劑,其特征在于,所述康氏木霉-絲孢酵母混合發酵液按照如下步驟制備而得:

1)將絲孢酵母劃線接種在YPDA培養基上培養,得到單菌落;挑取單菌落接種到YPD液體培養基上培養,30℃培養24h,得到絲孢酵母種子液,待用;

2)將康氏木霉劃線接種在PDA培養基上培養,得到單菌落;挑取單菌落接種到PDA液體培養基上培養,30℃、200rpm搖床培養36h,得到康氏木霉種子液,待用;

3)先將康氏木霉種子液按照10%的接種量接入到發酵培養基中,30℃培養6小時,然后將絲孢酵母種子液按照5%的接種量接入到發酵培養基,繼續以30℃培養18小時,得到康氏木霉-絲孢酵母混合發酵液;所述發酵培養基的組分為:玉米秸稈粉16g/L、豆粕10g/L、氯化銨5g/L、磷酸氫二鉀2g/L、磷酸二氫鉀1g/L、氯化鈉0.5g/L、硫酸鎂0.1g/L、硫酸亞鐵0.01g/L。

3.根據權利要求1所述的微生物制劑,其特征在于,所述沼澤紅假單胞菌發酵液按照如下步驟制備而得:

將沼澤紅假單胞菌在LB平板上劃線培養,得到單菌落;挑取單菌落接入種子培養基上培養至對數生長期,培養條件為:30-32℃,光照3000-4000Lux,制成種子液;然后按照10%的接種量接入到發酵培養基中,30-32℃培養24h,得到沼澤紅假單胞菌發酵液;所述種子培養基和發酵培養基的組分均為:葡萄糖 8g/L、酵母提取物5g/L、硫酸銨1g/L、磷酸二氫鉀0.2g/L、磷酸氫二鉀0.2g/L、碳酸氫鈉0.1g/L、硫酸鎂0.01g/L。

4.根據權利要求1所述的微生物制劑,其特征在于,所述枯草芽孢桿菌發酵液按照如下步驟制備而得:

將枯草芽孢桿菌在牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基上劃線培養,得到單菌落;挑取單菌落接入種子培養基上,30℃、200rpm搖床培養至對數生長期,制成種子液;然后按照8%的接種量接入到發酵培養基中,30℃培養36h,得到枯草芽孢桿菌發酵液。

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