[發(fā)明專利]一種毛發(fā)中巴比妥類藥物定量檢測(cè)方法及應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810272590.1
• 申請(qǐng)日: 2018-03-29
• 公開（公告）號(hào): CN108287206B
• 公開（公告）日: 2020-11-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 文迪;馬春玲;向平;于峰
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 河北醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 石家莊國(guó)為知識(shí)產(chǎn)權(quán)事務(wù)所 13120
• 代理人: 郝曉紅

1.一種毛發(fā)中巴比妥類藥物定量檢測(cè)方法，其特征在于，用液氮研磨和甲醇超聲提取對(duì)毛發(fā)樣品進(jìn)行前處理，用高分辨液相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用分析方法檢測(cè)所述毛發(fā)樣品中的巴比妥類藥物，所述巴比妥類藥物包括巴比妥、苯巴比妥、異戊巴比妥和司可巴比妥；包括以下步驟：

步驟a、將毛發(fā)樣本進(jìn)行清潔處理，得到待測(cè)樣本；

步驟b、將所述待測(cè)樣本進(jìn)行液氮研磨得到粉碎樣本，采用甲醇對(duì)所述粉碎樣本進(jìn)行超聲提取，得到待測(cè)溶液；

步驟c、用高分辨液相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用分析方法對(duì)步驟b所述待測(cè)溶液進(jìn)行檢測(cè)，獲取毛發(fā)中巴比妥類藥物的高分辨液相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用的檢測(cè)數(shù)據(jù)，計(jì)算毛發(fā)中巴比妥類藥物的含量；所述高分辨液相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用的色譜條件為：

色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱；

流動(dòng)相A為8～12mmol/L乙酸銨緩沖液，流動(dòng)相B為乙腈，進(jìn)行線性梯度洗脫，所述線性洗脫梯度如下：

所述質(zhì)譜的條件為：

離子源：ESI-；測(cè)定模式：多反應(yīng)離子監(jiān)測(cè)(MRM)模式掃描；源噴射電壓3200V；霧化溫度320℃；輔助氣體加熱器溫度300℃，碰撞能38V；一級(jí)分辨率35000；二級(jí)分辨率17500。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的毛發(fā)中巴比妥類藥物定量檢測(cè)方法，其特征在于，步驟b中所述液氮研磨的具體操作為：將所述待測(cè)樣本置于液氮溫度中預(yù)冷2.5～3.5min，以9～12次/s的頻率研磨1.5～2.5min后，靜置50～80s，再次預(yù)冷，重復(fù)操作1～2次；和/或

步驟b中所述甲醇超聲提取的具體操作為：向所述粉碎樣本中加入相當(dāng)于粉碎樣本重量80～120倍的甲醇，超聲25～35min后，在3～5℃條件下離心9～12min，取上清液，在氮?dú)饬飨麓蹈桑昧鲃?dòng)相和內(nèi)標(biāo)溶液的混合溶液溶解后，得待測(cè)溶液；其中，所述離心的轉(zhuǎn)速為11000～13000rpm；所述混合溶液中，所述流動(dòng)相和所述內(nèi)標(biāo)溶液的體積比為9∶1，所述流動(dòng)相為步驟c中所述高分辨液相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用分析方法中所述高分辨液相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用的色譜條件中的95％流動(dòng)相A與5％流動(dòng)相B，所述內(nèi)標(biāo)溶液為阿普巴比妥甲醇溶液。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的毛發(fā)中巴比妥類藥物定量檢測(cè)方法，其特征在于，所述液氮研磨的操作在冷凍研磨機(jī)中進(jìn)行。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的毛發(fā)中巴比妥類藥物定量檢測(cè)方法，其特征在于，步驟a中所述清潔處理的具體操作為：將毛發(fā)樣本，依次經(jīng)過1wt％洗潔精溶液、純化水、丙酮、純化水的洗滌后，置于室溫晾干。

5.一種追溯巴比妥類藥物用藥時(shí)間的方法，其特征在于，包括以下步驟：

將待測(cè)毛發(fā)樣品進(jìn)行分段，用權(quán)利要求1～4任一項(xiàng)所述方法對(duì)每段所述毛發(fā)樣品進(jìn)行檢測(cè)，得到每段所述毛發(fā)樣品中巴比妥類藥物的含量，根據(jù)所述含量推測(cè)巴比妥類藥物的用藥時(shí)間。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述追溯巴比妥類藥物用藥時(shí)間的方法用于法醫(yī)判斷迷奸案件作案時(shí)間的應(yīng)用。