[發(fā)明專利]抑制PD-1/PD-L1信號(hào)通路的結(jié)合分子

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810272574.2
• 申請(qǐng)日: 2018-03-29
• 公開（公告）號(hào): CN108610422B
• 公開（公告）日: 2019-05-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳國江;羅龍龍;馮健男;喬春霞;李新穎;肖鶴;呂忠霖;沈倍奮
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國人民解放軍軍事科學(xué)院軍事醫(yī)學(xué)研究院
• 主分類號(hào): C07K16/28
• 分類號(hào): C07K16/28;C12N15/13;G01N33/68;A61K39/395;A61P37/04
• 代理公司: 北京中譽(yù)威圣知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11279
• 代理人: 朱萍;孟祥斌

本發(fā)明公開了一種分離的結(jié)合分子，該結(jié)合分子是針對(duì)PD?1蛋白的單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段。體外實(shí)驗(yàn)證明該單克隆抗體能夠與PD?1蛋白特異性結(jié)合，有較強(qiáng)的親和活性，進(jìn)而能夠逆轉(zhuǎn)T細(xì)胞免疫抑制。本發(fā)明的研究成果一方面為臨床診斷提供了新的方法，另一方面為臨床治療腫瘤等免疫障礙提供了候選藥物。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于腫瘤治療、分子免疫學(xué)領(lǐng)域，涉及一種抑制PD-1/PD-L1信號(hào)通路的結(jié)合分子，具體涉及一種特異性結(jié)合PD-1的單克隆抗體。

背景技術(shù)

雙信號(hào)理論是調(diào)控免疫反應(yīng)的重要理論。T細(xì)胞的激活除了依靠T細(xì)胞受體刺激信號(hào)以外還需要通過CD28受體家族提供的第二信號(hào)來促進(jìn)或者下調(diào)T細(xì)胞反應(yīng)。CD28受體家族包括：CD28，CTLA-4，ICOS，PD-1，和BTLA等分子。其中CD28和ICOS這兩種受體是用來傳遞共刺激信號(hào)來激活免疫反應(yīng)，CTLA-4，PD-1和BTLA分子用來傳遞共抑制信號(hào)來抑制免疫反應(yīng)。PD-1(Programmed cell death 1)程序性死亡受體1，CD279，在活化的T細(xì)胞而不是靜息狀態(tài)下的T細(xì)胞中表達(dá)。PD-1分子有兩個(gè)配體：PD-L1和PD-L2。在其和配體結(jié)合時(shí)能夠給T細(xì)胞傳遞抑制信號(hào)，從而抑制細(xì)胞的增殖并減少細(xì)胞因子的分泌例如IL-2和IFNγ等。PD-L1分子能夠與T細(xì)胞表面的PD-1分子或者B7-1(CD80)分子結(jié)合并抑制T細(xì)胞的激活。從而抑制免疫反應(yīng)，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的逃逸。

PD-1/PD-L1抑制劑可以封閉PD-1/PD-L1信號(hào)傳導(dǎo)通路，已成為腫瘤免疫治療的一個(gè)重要策略。PD-1/PD-L1抑制劑主要包括抗PD-1抗體、抗PD-L1抗體。國外很多大公司正在角逐抗PD-1抗體、抗PD-L1抗體，目前國外已上市的抗PD-1抗體藥物是百時(shí)美施寶貴的Nivolumab、默沙東的Keytruda。但是由于進(jìn)口大分子藥物對(duì)于病人來說需要花費(fèi)高昂的費(fèi)用，因此，研發(fā)新的抗PD-L1單克隆抗體，減少病人負(fù)擔(dān)，降低治療費(fèi)用是一個(gè)亟待解決的問題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種針對(duì)PD-1的結(jié)合分子，該結(jié)合分子對(duì)PD-1蛋白具有顯著的親和作用。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用了如下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供了一種分離的結(jié)合分子，所述結(jié)合分子包括：

(1)SEQ ID NO:1所示的重鏈CDR1、SEQ ID NO:2所示的重鏈CDR2、SEQ ID NO:3所示的重鏈CDR3；和/或

(2)SEQ ID NO:4所示的輕鏈CDR1、SEQ ID NO:5所示的輕鏈CDR2、SEQ ID NO:6所示的輕鏈CDR3。

作為本發(fā)明的一個(gè)方面，本發(fā)明的結(jié)合分子包括：

(1)重鏈可變區(qū)，所述重鏈可變區(qū)具有SEQ ID NO:7所示的氨基酸序列；和/或

(2)輕鏈可變區(qū)，所述輕鏈可變區(qū)具有SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列。

本發(fā)明的結(jié)合分子可以是完整的免疫球蛋白分子，還可以是抗原結(jié)合片段，包括但不限于Fab、F(ab’)、F(ab’)2、Fv、dAb、Fd、互補(bǔ)決定區(qū)(CDR)片段、單鏈抗體(scFv)、二價(jià)單鏈抗體、單鏈?zhǔn)删w抗體、雙特異雙鏈抗體、三鏈抗體、四鏈抗體以及至少含有足以賦予與PD-1結(jié)合免疫球蛋白的片段的(多)肽或其片段。

本發(fā)明的結(jié)合分子也可以特異性結(jié)合PD-1蛋白的一個(gè)或多個(gè)片段。

作為本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明的結(jié)合分子還包括前面所述的結(jié)合分子的功能變體。如果變體能與親代結(jié)合分子競(jìng)爭(zhēng)特異性結(jié)合PD-1或其蛋白片段，則認(rèn)為該變體分子是本發(fā)明結(jié)合分子的功能變體。換句話說，所述功能變體仍能結(jié)合PD-1蛋白或其蛋白片段。