[發明專利]一種用于菊糖酶活度檢測的碳量子點及制備方法和應用

有效

• 申請號: 201810270933.0
• 申請日: 2018-03-29
• 公開（公告）號: CN108562564B
• 公開（公告）日: 2021-04-02
• 發明（設計）人: 王宗花;孫華;桂日軍;金輝
• 申請（專利權）人: 青島大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;C09K11/65
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 王磊

1.一種用于菊糖酶活度檢測的碳量子點，其特征是，以菊糖和檸檬酸為碳源進行制備，制得的碳量子點的能夠發射最大波長為520nm的綠色熒光；

制備方法為：以菊糖和檸檬酸為碳源，采用水熱法進行反應即可獲得碳量子點；水熱法的溫度為150～180℃，反應時間為3～6h；

菊糖、檸檬酸與水的投入比為0.02～0.1:0.2～1:10～50，g:g:mL；

采用水熱法進行反應后先進行離心、過濾去除不溶性大顆粒，再將濾液進行透析去除未反應物，去除溶劑后萃取，然后離心獲得沉淀物，并將沉淀物干燥后即可；透析采用透析膜的截留分子量為1800Da。

2.如權利要求1所示的用于菊糖酶活度檢測的碳量子點，其特征是，水熱法中水的體積與壓力容器的容積比為2:4～5。

3.如權利要求1所示的用于菊糖酶活度檢測的碳量子點，其特征是，去除不溶性大顆粒的離心條件為，離心轉速6000～12000rpm，離心時間2～10min。

4.如權利要求1所示的用于菊糖酶活度檢測的碳量子點，其特征是，離心獲得沉淀物的條件為，離心轉速8000～12000rpm，離心時間5～15min。

5.如權利要求1所示的用于菊糖酶活度檢測的碳量子點，其特征是，干燥的方式為冷凍干燥，冷凍干燥的溫度和時間分別為-70～-50℃和12～48h。

6.一種權利要求1-5任一權利要求所述的碳量子點在檢測菊糖酶活度中應用。

7.一種在檢測菊糖酶活度的檢測方法，其特征是，將權利要求1-5任一權利要求所述的碳量子點作為熒光探針。

8.如權利要求7所述的檢測方法，其特征是，將權利要求1-5任一權利要求所述的碳量子點作為熒光探針溶解于水中制備若干份碳量子點水溶液，再分別向若干碳量子點水溶液加入不同特定活度的菊糖酶，制備獲得不同活度的菊糖酶標準溶液，檢測菊糖酶標準溶液的熒光強度，根據不同活度對應檢測獲得的熒光強度擬合繪制標準曲線，根據標準曲線及對實際樣品的檢測，從而實現菊糖酶的活度檢測。

9.如權利要求8所述的檢測方法，其特征是，碳量子點水溶液的濃度為0.50～5.00mg/mL；

或，不同特定活度的菊糖酶的特定活度分別為0U/mL、4U/mL、20U/mL、40U/mL；

或，菊糖酶標準溶液恒溫一段時間后再進行檢測熒光強度，恒溫的溫度和時間分別為40～60℃和1～10h。