[發明專利]鐵染色試劑

有效

• 申請號: 201810267260.3
• 申請日: 2018-03-28
• 公開（公告）號: CN108801740B
• 公開（公告）日: 2021-08-06
• 發明（設計）人: 劉靜;趙光波;陳其云
• 申請（專利權）人: 邁克生物股份有限公司
• 主分類號: G01N1/30
• 分類號: G01N1/30
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君;陳征

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種鐵染色試劑。所述鐵染色試劑包括沙黃染色液、固定劑、亞鐵氰化鉀溶液、鹽酸溶液。所述沙黃染色液含有沙黃、緩沖液和醇。本發明沙黃染色液采用緩沖液配制，可使骨髓鐵染色細胞結構清晰，易于將幼紅細胞、單核細胞和粒細胞區分開來大大縮短內鐵的觀察時間；特別是還可使核漿對比度更清晰，更易于觀察細胞內鐵。另外，當所述固定劑中含有戊二醛時，染色效果更好，更利于使核漿對比度更清晰，更易于觀察細胞內鐵。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種鐵染色試劑。

背景技術

鐵染色是骨髓細胞形態學檢查常用的細胞化學染色方法之一。它對于診斷和鑒別缺鐵性貧血、非缺鐵性貧血(如營養性巨幼紅細胞貧血、再生障礙性貧血、難治性貧血等)和鐵粒幼紅細胞貧血有重要的價值。普魯士藍染色是一種普遍使用的顯示鐵的染色方法，其檢測原理是骨髓中的細胞內外鐵在酸性環境下與亞鐵氰化鉀作用，可形成普魯士藍色的亞鐵氰化鐵沉淀，定位于含鐵部位，藍色沉淀顆粒的多少和深淺與細胞內外鐵的含量成正比。

現有技術在進行骨髓細胞鐵染色時大多出現細胞類型不易區分，細胞結構不清晰，嚴重影響細胞內鐵的對察。

中國專利公開號CN105136549A公開了一種含核固紅復染液的鐵染色試劑盒及其染色方法，所述鐵染色試劑盒中核固紅復染液包含去污劑TritonX-100。該發明調整了核固紅復染液的成分組成，加入了去污劑TritonX-100，使其在進行骨髓細胞鐵染色時相比常規核固紅復染液更易于區分細胞類型，細胞結構清晰，對察細胞內鐵的判定更準確，同時在本發明染色方法中，采用微波方式替代常規的水浴方式，使得整體的染色時間大幅縮短。

發明內容

本發明目的是提供一種鐵染色試劑，可使骨髓鐵染色細胞結構清晰，細胞類型易區分，從而更易于觀察細胞內鐵。

本發明采用如下技術方案：

一種沙黃染色液，含有沙黃和緩沖液。

進一步地，所述緩沖液選自Tris緩沖液、HEPES緩沖液、磷酸緩沖液、醋酸緩沖液、檸檬酸緩沖液等中的一種或幾種；優選包括磷酸二氫鈉-磷酸氫二鈉緩沖液、磷酸二氫鉀-磷酸氫二鈉緩沖液、醋酸-醋酸鈉緩沖液、檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液、檸檬酸-醋酸鈉緩沖液、檸檬酸-磷酸氫二鈉緩沖液等中的一種或幾種。

進一步地，上述沙黃染色液的pH值范圍為4.5-6.5；優選為5.2-6.2；進一步優選為5.8。

作為優選，所述緩沖液為磷酸二氫鉀-磷酸氫二鈉緩沖液；更優選地，磷酸二氫鉀在沙黃染色液中的濃度為14.46g/L，磷酸氫二鈉在沙黃染色液中的濃度為3.72g/L。

進一步地，上述沙黃染色液中，沙黃的濃度為0.04-5g/L，優選為0.06-1g/L，更優選為0.1g/L。

進一步地，上述沙黃染色液中還可含有適量防腐劑。所述防腐劑可選自ProClin系列防腐劑(SUPELCO公司提供)、疊氮鈉、苯酚、咪唑烷基脲(IZU)等中的一種或多種；其中所述ProClin系列防腐劑優選為ProClin300。

上述沙黃染色液中防腐劑的含量以0.1-5g/L為宜，可優選為1-4g/L，或可優選為1-2g/L。

上述沙黃染色液可按常規方法配制。

本發明意外地發現，當上述含有緩沖液的沙黃染色液用于骨髓細胞鐵染色時，不僅可使細胞結構清晰，易于將幼紅細胞、單核細胞和粒細胞區分開來；而且還可使核漿對比度更清晰，更易于觀察細胞內鐵。

本發明還提供一種鐵染色試劑(或鐵染色試劑盒)，其包括上述沙黃染色液。該鐵染色試劑(或鐵染色試劑盒)還包括固定劑(或固定液)、亞鐵氰化鉀溶液、鹽酸溶液等中的一種或幾種。

其中，固定劑(或稱固定液)、亞鐵氰化鉀溶液、鹽酸溶液均可按常規鐵染色方法的需要進行配制。