[發明專利]一種快速測定液體中獸藥殘留及非法添加物的方法

在審

• 申請號: 201810259686.4
• 申請日: 2018-03-27
• 公開（公告）號: CN108827875A
• 公開（公告）日: 2018-11-16
• 發明（設計）人: 焦燕妮;楊路平;姜大峰;李鳳華;辛成龍;鄭鳳家
• 申請（專利權）人: 山東省疾病預防控制中心
• 主分類號: G01N21/17
• 分類號: G01N21/17;G01N33/543
• 代理公司: 濟南金迪知識產權代理有限公司 37219
• 代理人: 張宏松

1.一種分析樣品中獸藥殘留或非法添加物含量的方法，包括：

a)孵育：用經納米金顆粒標記的與獸藥或非法添加物分子特異性結合的抗體或受體與待檢液體混合，在便于抗體或受體與獸藥或非法添加物分子反應的條件下，使抗體或受體與待檢液體中的獸藥或非法添加物分子充分反應形成復合物；

b)平衡：將底部帶有與獸藥或者非法添加物分子與載體蛋白形成的共價偶聯物分子層的光纖生物生物傳感器暴露于陰性樣品或陰性樣品與納米金混合液，同時檢測信號變化；

c)結合：將底部帶有與獸藥或者非法添加物分子與載體蛋白形成的共價偶聯物分子層的光纖生物生物傳感器暴露于孵育后的液體中，同時檢測信號變化；

d)判斷：根據信號變化情況，對液體中相應獸藥殘留或非法添加物含量進行判定。

2.如權利要求1所述的分析樣品中獸藥殘留或非法添加物含量的方法，其特征在于是光纖生物傳感器是通過光纖耦合至光源及檢測器的光學元件，該元件的遠離光源的一端帶有與獸藥或非法添加物分子與載體蛋白形成的共價偶聯物。

3.如權利要求1所述的分析樣品中獸藥殘留或非法添加物含量的方法，其特征是孵育階段的反應條件為：20℃-50℃反應1min-15min，優選37℃-45℃反應1-5min。

4.如權利要求1所述的分析樣品中獸藥殘留或非法添加物含量的方法，其特征是陰性樣本與納米金混合液中的納米金表面被不與獸藥殘留或非法添加物分子發生結合反應的分子所覆蓋，如：BSA、OVA等。

5.如權利要求1所述的分析樣品中獸藥殘留或非法添加物含量的方法，其特征是獸藥或非法添加物與載體蛋白形成的共價偶聯物分子通過疏水作用力、共價鍵或者分子間作用力固定于光纖生物傳感器底部，優選疏水作用力。

6.如權利要求1所述的分析樣品中獸藥殘留或非法添加物含量的方法，其特征是若偶聯物分子以疏水作用力固定于光纖生物傳感器的底部，則偶聯物的包被濃度優選50μg/ml-5mg/ml。

7.如權利要求1所述分析樣品中獸藥殘留或非法添加物含量的方法，其特征是結合階段的反應條件為：20℃-50℃反應1min-15min，優選37℃-45℃反應5min。

8.如權利要求1所述的分析樣品中獸藥殘留或非法添加物含量的方法，其特征在于，將偶聯物分子固定于光纖生物傳感器底部之后，應再將光纖生物傳感器底部暴露于1％-5％的魚明膠、5％-20％的海藻糖或者5％-10％的蔗糖中，暴露時間為0.5min-10min，優選用1％-5％的魚明膠暴露1min-3min。

9.如權利要求1所述的分析樣品中獸藥殘留或非法添加物含量的方法，其特征是所述納米金顆粒的粒徑為20nm-60nm。

10.如權利要求1所述分析樣品中獸藥殘留或非法添加物含量的方法，其特征是納米金通過直接或者間接標記方式與抗體或受體結合在一起形成復合物；納米金標記與獸藥或非法添加物分子特異性結合的抗體或受體的條件為1毫升納米金與0.2μg-20μg的抗體或受體反應，優選1毫升納米金與15μg-20μg的抗體或受體反應；非法添加物是指三聚氰胺、羅丹明B、蘇丹紅、孔雀石綠等在動物生產加工領域中禁用的化學物質。