[發(fā)明專利]一種西羅莫司的檢測(cè)方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810258009.0
• 申請(qǐng)日: 2018-03-27
• 公開（公告）號(hào): CN108680658A
• 公開（公告）日: 2018-10-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 束曉文
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 蘇州桓晨醫(yī)療科技有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 蘇州創(chuàng)元專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 32103
• 代理人: 范晴

本發(fā)明要求保護(hù)一種西羅莫司的檢測(cè)方法，其包括如下步驟：配制西羅莫司最穩(wěn)定的磷酸鹽緩沖液；配制含有抗氧化劑的乙腈溶液；再將待測(cè)樣品溶于含有抗氧化劑乙腈溶液中，得到西羅莫司的乙腈溶液，將待測(cè)樣品溶于含有抗氧化劑乙腈中，磷酸緩沖液定容；西羅莫司標(biāo)準(zhǔn)品含有抗氧化劑乙腈溶液中，磷酸緩沖液定容并稀釋，分別進(jìn)樣標(biāo)準(zhǔn)品與待測(cè)樣品溶液至高效液相色譜，以標(biāo)準(zhǔn)品溶液測(cè)試結(jié)果作圖，計(jì)算回歸方程，用樣品測(cè)試結(jié)果帶入方程計(jì)算濃度。本發(fā)明的西羅莫司的檢測(cè)方法采用更加穩(wěn)定的溶劑對(duì)西羅莫司進(jìn)行溶解，使待測(cè)西羅莫司溶液以及西羅莫司標(biāo)準(zhǔn)品更加穩(wěn)定，減少西羅莫司隨時(shí)間降解對(duì)測(cè)試的影響。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)療技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種西羅莫司的檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

西羅莫司(Sirolimus)，屬大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，具有免疫抑制作用，其透過(guò)細(xì)胞膜可以與FKBP-12(FK506結(jié)合蛋白)結(jié)合生成Sirolimus－FKBP-12復(fù)合物，抑制mTOR激酶的活性，從而起到抑制細(xì)胞增殖的作用。微量西羅莫司的檢測(cè)通常采用高效液相色譜，用乙腈為溶液，乙腈和水的混合物為流動(dòng)相進(jìn)行檢測(cè)，西羅莫司對(duì)酸堿敏感，溶液的不穩(wěn)定容易造成西羅莫司降解。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明針對(duì)目前西羅莫司易降解的問題，采用更加穩(wěn)定的溶劑及抗氧化劑對(duì)西羅莫司進(jìn)行溶解，減少西羅莫司隨時(shí)間降解對(duì)測(cè)試的影響。

本發(fā)明的目的是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：一種西羅莫司的檢測(cè)方法，其包括如下步驟：

(1)配制西羅莫司最穩(wěn)定的磷酸鹽緩沖液，用于配制西羅莫司溶液，防止pH值的變化造成西羅莫司降解；

(2)在乙腈中加入適量抗氧化劑，制成含有抗氧化劑的乙腈溶液，防止西羅莫司在溶液中的氧化降解；

(3)A.將待測(cè)樣品溶于步驟(2)的含有抗氧化劑乙腈溶液中，得到西羅莫司的乙腈溶液，

B.取已知重量西羅莫司標(biāo)準(zhǔn)品溶于步驟(2)的含有抗氧化劑乙腈溶液中得到西羅莫司標(biāo)準(zhǔn)品的乙腈溶液；

(4)A.西羅莫司的乙腈溶液加入步驟(1)的磷酸鹽緩沖液并定容，得到待測(cè)液，

B.西羅莫司標(biāo)準(zhǔn)品的乙腈溶液加入步驟(1)的磷酸鹽緩沖液并定容，分別稀釋至復(fù)數(shù)個(gè)不同濃度，作為標(biāo)準(zhǔn)液，用于標(biāo)準(zhǔn)曲線制備；

(5)分別進(jìn)樣待測(cè)液和標(biāo)準(zhǔn)液到高效液相色譜中進(jìn)行檢測(cè)，以復(fù)數(shù)個(gè)不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)液測(cè)量結(jié)果做圖，得到回歸方程，計(jì)算得出待測(cè)液中西羅莫司濃度。

本發(fā)明優(yōu)選的技術(shù)方案中，步驟(5)中，以3-10個(gè)不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)液測(cè)量結(jié)果做圖，得到回歸方程。

本發(fā)明的西羅莫司的檢測(cè)方法針對(duì)目前西羅莫司易降解的問題，采用更加穩(wěn)定的溶劑對(duì)西羅莫司進(jìn)行溶解，使待測(cè)西羅莫司溶液以及西羅莫司標(biāo)準(zhǔn)品更加穩(wěn)定，減少西羅莫司隨時(shí)間降解對(duì)測(cè)試的影響。

附圖說(shuō)明

圖1是配制本發(fā)明的西羅莫司的檢測(cè)方法一實(shí)施例流程圖。

具體實(shí)施方式

為進(jìn)一步理解本發(fā)明，下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明優(yōu)選方案進(jìn)行描述，但是應(yīng)當(dāng)理解，這些描述只是為進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的特征和優(yōu)點(diǎn)，而不是對(duì)本發(fā)明權(quán)利要求的限制。

以下結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)上述方案做進(jìn)一步說(shuō)明。實(shí)施例中采用的實(shí)施條件可以根據(jù)具體廠家的條件做進(jìn)一步調(diào)整，未注明的實(shí)施條件通常為常規(guī)實(shí)驗(yàn)中的條件。

實(shí)施例1

一種西羅莫司的檢測(cè)方法，其包括如下步驟：

(1)根據(jù)前期實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以及文獻(xiàn)資料，配制西羅莫司最穩(wěn)定pH值的磷酸鹽緩沖液，用于配制西羅莫司溶液，防止pH值的變化造成西羅莫司降解；