[發明專利]一種耐低溫脫色復合功能菌劑及其制備方法

在審

• 申請號: 201810256823.9
• 申請日: 2018-03-27
• 公開（公告）號: CN110157629A
• 公開（公告）日: 2019-08-23
• 發明（設計）人: 張錦玉;張如來;周鎮江;許白羽
• 申請（專利權）人: 新疆水處理工程技術研究中心有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/14;C02F3/34;C12R1/07;C12R1/22;C12R1/01;C12R1/645;C02F101/30
• 代理公司: 北京華仲龍騰專利代理事務所(普通合伙) 11548
• 代理人: 李靜

1.一種耐低溫脫色復合功能菌劑，其特征在于，包含如下重量百分比計的原料：黃孢原毛平革菌培養物20-25％、耐冷嗜冷芽孢桿菌培養物15％-20％、脫色芽孢桿菌培養物15％-20％、脫色希瓦氏菌培養物15％-20％、采絨革蓋菌培養物10％-15％、克雷伯氏菌培養物10％-15％、復合維生素0.05％-0.08％。

2.根據權利要求1所述的一種耐低溫脫色復合功能菌劑，其特征在于，所述黃孢原毛平革菌培養物的制備方法為：將水、馬鈴薯粉、棉籽粉、玉米粉、氯化鈉按照1000:20:5:10:2的質量百分比混合均勻后經121℃蒸汽滅菌30min，并接種5％的黃孢原毛平革菌，在28℃、pH＝6.6-7.0、攪拌轉速80r/min條件下發酵培養至有效活菌數達到3.50×108CFU/ml后停止發酵，將該發酵液以1500r/min離心后冷凍干燥，即得黃孢原毛平革菌培養物。

3.根據權利要求1所述的一種耐低溫脫色復合功能菌劑，其特征在于，所述耐冷嗜冷芽孢桿菌培養物的制備方法為：將水、糖蜜、豆餅粉、玉米秸稈粉、氯化鈉按照1000:15:5:15:2的質量百分比混合均勻后經121℃蒸汽滅菌30min，并接種8％的耐冷嗜冷芽孢桿菌，在15℃、pH＝6.4-6.8、攪拌轉速150r/min、溶氧量10％的條件下發酵培養至有效活菌數達到4.90×108CFU/ml后停止發酵，將該發酵液以1500r/min離心后冷凍干燥，即得耐冷嗜冷芽孢桿菌培養物。

4.根據權利要求1所述的一種耐低溫脫色復合功能菌劑，其特征在于，所述脫色芽孢桿菌培養物的制備方法為：將水、酵母粉、棉籽粉、玉米秸稈粉、氯化鈉按照1000:10:10:5:3的質量百分比混合均勻后經121℃蒸汽滅菌30min，并接種8％的脫色芽孢桿菌實驗室，在25℃、pH＝6.3-6.6、攪拌轉速150r/min、溶氧量10％的條件下發酵培養至有效活菌數達到5.20×108CFU/ml后停止發酵，將該發酵液以1500r/min離心后冷凍干燥，即得脫色芽孢桿菌培養物。

5.根據權利要求1所述的一種耐低溫脫色復合功能菌劑，其特征在于，所述脫色希瓦氏菌培養物的制備方法為：將水、木薯淀粉、棉籽粉、玉米漿按照1000:15:5:2的質量百分比混合均勻后經121℃蒸汽滅菌30min，并接種5％的脫色希瓦氏菌，在22℃、pH＝6.8-7.5、攪拌轉速100r/min的條件下發酵培養至有效活菌數達到4.80×108CFU/ml后停止發酵，將該發酵液以1500r/min離心后冷凍干燥，即得脫色芽孢桿菌培養物。

6.根據權利要求1所述的一種耐低溫脫色復合功能菌劑，其特征在于，所述采絨革蓋菌培養物的制備方法為：將水、酵母粉、棉籽粉、玉米漿、氯化鈉、磷酸二氫鉀按照1000:15:5:5:3:2的質量百分比混合均勻后經121℃蒸汽滅菌30min，并接種5％的采絨革蓋菌，在25℃、pH＝6.8-7.5、攪拌轉速80r/min的條件下發酵培養至有效活菌數達到3.50×108CFU/ml后停止發酵，將該發酵液以1500r/min離心后冷凍干燥，即得采絨革蓋菌培養物。

7.根據權利要求1所述的一種耐低溫脫色復合功能菌劑，其特征在于，所述克雷伯氏菌培養物的制備方法為：將水、糖蜜、棉籽粉、玉米漿、七水硫酸鎂按照1000:20:5:5:1的質量百分比混合均勻后經121℃蒸汽滅菌30min，并接種10％的克雷伯氏菌，在28℃、pH＝7-7.2、攪拌轉速120r/min的條件下發酵培養至有效活菌數達到3.80×108CFU/ml后停止發酵，將該發酵液以1500r/min離心后冷凍干燥，即得克雷伯氏菌培養物。

8.根據權利要求1所述的一種耐低溫脫色復合功能菌劑，其特征在于，所述復合維生素各組分的質量占比為生物素25％、硫胺素20％、硫辛酸20％、葉酸20％、核黃素15％。

9.根據權利要求1-8任一項所述的耐低溫脫色復合功能菌劑的制備方法，其特征在于，方法步驟如下：

S1：將所購商業黃孢原毛平革菌株、采絨革蓋菌株分別接種到經滅菌的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基上，于28℃恒溫培養5天；所購商業耐冷嗜冷芽孢桿菌株、脫色芽孢桿菌株、脫色希瓦氏菌株、克雷伯氏菌株分別接種到經滅菌的LB固體培養基上，于20℃恒溫培養2天；

S2：從馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基上分別挑取黃孢原毛平革菌株、采絨革蓋菌株接種于100ml馬鈴薯葡萄糖液體培養基中，于60r/min、28℃振蕩培養12h；從LB固體培養基上分別挑取脫色芽孢桿菌株、脫色希瓦氏菌株、克雷伯氏菌株接種于100mlLB液體培養基中，于100r/min、25℃條件下振蕩培養10h；從LB固體培養基上挑取耐冷嗜冷芽孢桿菌株接種于100mlLB液體培養基中，于120r/min、15℃條件下振蕩培養10h；

S3：將步驟二中得到的各菌株液體培養液分別接種于發酵培養基中發酵培養，即得各菌株培養物；

S4：制備時依次將各培養物干粉及復合維生素按照比例加入攪拌容器中，常溫、常壓下，攪拌速度60r/min，攪拌時間為20min，即得產品。