[發明專利]苯并氧雜惡二唑衍生物及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201810253774.3
• 申請日: 2018-03-26
• 公開（公告）號: CN108484523A
• 公開（公告）日: 2018-09-04
• 發明（設計）人: 王忠長;孔繁蕾;王鳴華;尤令夏
• 申請（專利權）人: 江蘇省農用激素工程技術研究中心有限公司;南京農業大學
• 主分類號: C07D271/12
• 分類號: C07D271/12;C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 常州市江海陽光知識產權代理有限公司 32214
• 代理人: 孫曉暉

本發明公開了一種苯并氧雜惡二唑衍生物及其制備方法和應用，該苯并氧雜惡二唑衍生物是先由NBD?Cl與哌嗪反應得到NBD?PZ；再由NBD?PZ與丙烯酰氯反應得到4?硝基?7?（N?1'?丙烯酰基哌嗪）?2,1,3?苯并氧雜惡二唑。本發明的苯并氧雜惡二唑衍生物BGAS作為熒光探針對半胱氨酸具有高選擇性，能夠特異性地檢測出半胱氨酸，尤其是對水中的半胱氨酸具有快速檢測效果，同時還具有較高的靈敏度，從而能夠應用于活細胞內半胱氨酸的檢測。

技術領域

本發明屬于分析化學技術領域，具體涉及一種苯并氧雜惡二唑衍生物及其制備方法和應用。

背景技術

半胱氨酸（Cysteine，Cys）和高半胱氨酸（HomoCysteine，Hcy）是同時表達在真核細胞內的含巰基（-SH）氨基酸，它們分子結構雖然只有一個亞甲基的區別，但是生物功能卻有顯著差異。Cys是人體必須的氨基酸之一，是參與蛋白質合成的20中氨基酸中的一種。Hcy則不參與蛋白質的合成，但卻與很多疾病有關，比如老年癡呆癥、帕金森疾病、心血管疾病。

熒光檢測法不僅具有靈敏度高、檢測限低、選擇性好等優點，而且能夠在活細胞中可視化檢測分析物，因此，是目前檢測Cys和/或Hcy最為常用的方法。

目前，用于檢測Cys和/或Hcy的熒光探針主要分為兩大類：

（1）一類是能夠同時檢測出Cys和Hcy。

這類熒光探針顯然不適合需要單獨檢測出Cys的場合。

（2）另一類則是能夠特異性地檢測出Cys。

而現有的能夠特異性檢測出Cys的熒光探針存在靈敏度不高、選擇性不好、發光效率低、透過性較差、傳輸性不佳等問題。

發明內容

本發明的目的在于解決上述問題，提供一種能夠特異性檢測出半胱氨酸且具有高選擇性和高靈敏度的苯并氧雜惡二唑衍生物及其制備方法和應用。

實現本發明目的的技術方案是：一種苯并氧雜惡二唑衍生物，其結構如下所示：

。

上述苯并氧雜惡二唑衍生物的制備方法如下：

①由4-氯-7-硝基-2,1,3-苯并氧雜惡二唑【以下簡稱NBD-Cl】與哌嗪反應得到4-硝基-7-哌嗪-2,1,3-苯并氧雜惡二唑【以下簡稱NBD-PZ】；

②由步驟①得到的NBD-PZ與丙烯酰氯反應得到4-硝基-7-（N-1'-丙烯酰基哌嗪）-2,1,3-苯并氧雜惡二唑【以下簡稱BGAS】。

具體合成路線如下：

。

上述步驟①中，所述NBD-Cl與所述哌嗪的摩爾比為1∶2～1∶5，優選為1∶3。

上述步驟①是在有機溶劑中進行的；所述有機溶劑優選為甲醇。

上述步驟①的反應溫度為-5℃～5℃，優選為0℃。

上述步驟②中，所述NBD-PZ與所述丙烯酰氯的摩爾比為1∶10～1∶20。

上述步驟②是在有機溶劑中進行的；所述有機溶劑優選為二氯甲烷。

上述步驟②是在堿性催化劑的存在下進行的；所述堿性催化劑優選為三乙胺；所述NBD-PZ與所述三乙胺的摩爾比為1∶5～1∶10。

上述步驟②的反應溫度為室溫（20±5℃，下同）。

上述苯并氧雜惡二唑衍生物作為熒光探針在特異性檢測半胱氨酸上的應用。

本發明具有的積極效果：