[發(fā)明專利]布魯氏菌液體氣溶膠肺遞送感染小鼠模型的制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810252920.0
• 申請日: 2018-03-26
• 公開（公告）號: CN110354147A
• 公開（公告）日: 2019-10-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊文慧;周冬生;韋超;孫巖松;法云智;高波;邱業(yè)峰;楊慧盈;焦周光;胡凌飛;殷喆;趙月娥;于學(xué)東;王效義;熊小路;焦俊;靳愛軍
• 申請（專利權(quán)）人: 中國人民解放軍軍事科學(xué)院軍事醫(yī)學(xué)研究院
• 主分類號: A61K35/74
• 分類號: A61K35/74;A61K49/00;A01K67/027
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢;張立娜

本發(fā)明公開了一種布魯氏菌液體氣溶膠肺遞送感染小鼠模型的制備方法。本發(fā)明方法包括如下步驟：通過液體氣溶膠的方式將布魯氏菌A19遞送至動(dòng)物的肺部，得到動(dòng)物模型。本發(fā)明通過布魯氏菌A19液體氣溶膠肺遞送感染BALB/c小鼠，成功建立小鼠布病模型。A19引起B(yǎng)ALB/c小鼠慢性感染，感染的小鼠出現(xiàn)脾肺載菌多，持續(xù)時(shí)間長，脾腫大明顯等毒理反應(yīng)；同時(shí)激發(fā)了細(xì)胞免疫為主的免疫反應(yīng)，感染過程經(jīng)歷了Th1向Th2的轉(zhuǎn)變。本發(fā)明對于初步認(rèn)識布魯氏菌氣溶膠感染小鼠引起的免疫毒理反應(yīng)，為進(jìn)一步研究其感染機(jī)制和開展疫苗研發(fā)奠定基礎(chǔ)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種布魯氏菌液體氣溶膠肺遞送感染小鼠模型的制備方法。

背景技術(shù)

布魯氏菌(Brucella)是一種可以導(dǎo)致人獸共患傳染病-布魯氏菌病(簡稱布病)的革蘭氏陰性胞內(nèi)寄生菌[PAPPAS G,AKRITIDIS N,BOSILKOVSKI M,et al.Brucellosis[J].New England Journal of Medicine,2005,352(22):2325.]，根據(jù)宿主的不同分為10個(gè)種，其中以牛、羊、豬種感染發(fā)病最常見[AHMED W,ZHENG K,LIU Z F.Establishment ofChronic Infection:Brucella's Stealth Strategy[J].Frontiers in Cellular&Infection Microbiology,2016,6(83)]，在我國牛種感染率高[滿騰飛,王大力,崔步云,等2009年傘國布魯氏菌病監(jiān)測數(shù)據(jù)分析[J].疾病監(jiān)測,2010,25(12):944-946]。其感染途徑多樣：呼吸道、消化道和皮膚接觸，其中以氣溶膠形式經(jīng)呼吸道感染是最常見的感染途徑[李金嶺.布魯氏菌病的流行特點(diǎn)、癥狀及危害[J].獸醫(yī)導(dǎo)刊,2010,(3):32-32]。

布魯氏菌感染動(dòng)物能導(dǎo)致流產(chǎn)、不育，給畜牧業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失；感染人能引起發(fā)熱、盜汗、疲勞，關(guān)節(jié)炎，心內(nèi)膜炎，腦炎，肝脾膿腫等全身性疾病[PAPPAS G,AKRITIDISN,BOSILKOVSKI M,et al.Brucellosis[J].New England Journal of Medicine,2005,352(22):2325.KUZMAN I,et al.Human brucelosis；an overview oftreatment；proceedings of the Croatian Congress on Infectious Diseaseszagreb,F,2006[C].]。目前認(rèn)為，免疫預(yù)防是防止布病最有效的方法[丁家波,毛開榮,程君生,等布氏桿菌病疫苗的應(yīng)用和研究現(xiàn)狀[J].微生物學(xué)報(bào),2006,46(5):856-859.]，疫苗的使用顯著降低了動(dòng)物布病的發(fā)生，但很多疫苗有干擾血清學(xué)診斷和使動(dòng)物致病的弊端[葉俊賢,馮宇,陳瑞愛,等.布魯氏菌S19疫苗應(yīng)用及研究進(jìn)展[J].中國獸藥雜志,2017,51(5):62-67.]，因此克服這些弊端，開展研發(fā)安全有效的疫苗，是人們努力的方向，而對布魯氏菌感染致病后發(fā)展規(guī)律的認(rèn)識是新型疫苗研發(fā)的前提。

研究感染性疾病的致病機(jī)制，尋找有效的防控措施，需要建立理想的動(dòng)物模型，靜脈接種被認(rèn)為是制備小鼠感染模型最常用的途徑[SZABO E K,MACCALLUM D M.Thecontribution of mouse models to our understanding of systemic candidiasis[J].Fems Microbiology Letters,2011,320(1):1–8.]。氣溶膠感染是布魯氏菌較為常見的感染途徑，不同感染途徑對機(jī)體的影響存在差異，不同來源的同一株菌毒副作用存在很大差異，因此建立布魯氏菌感染模型，確定菌株的毒力、感染途徑和劑量是關(guān)鍵。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種布魯氏菌液體氣溶膠肺遞送感染小鼠模型的制備方法。

第一方面，本發(fā)明要求保護(hù)一種制備布魯氏菌液體氣溶膠肺遞送感染動(dòng)物模型的方法。