[發明專利]一種熊膽粉滴眼液原液的提取方法

在審

• 申請號: 201810249822.1
• 申請日: 2018-03-26
• 公開（公告）號: CN110354143A
• 公開（公告）日: 2019-10-22
• 發明（設計）人: 王寶成
• 申請（專利權）人: 長春長慶藥業集團有限公司
• 主分類號: A61K35/413
• 分類號: A61K35/413;A61K9/08;A61P27/02;A61P31/04
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• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種熊膽粉滴眼液原液的提取方法，包括如下工藝步驟：(1)取1重量份的熊膽粉，研磨成粉末；(2)制備熊膽粉水溶液；(3)熊膽粉醇沉步驟選擇特定的混合溫度和醇沉溫度；(4)沉淀物洗滌；(5)合并上清液。本發明能夠大幅去除了脂類蛋白等無效成分，保證提取液中主藥成份牛磺熊去氧膽酸的含量和活性。

技術領域

本發明涉及分子生物分離領域，具體涉及一種熊膽粉滴眼液原液的提取方法。

背景技術

熊膽粉為黑熊引流膽汁的干燥粉末，其主要化學成分包括膽汁酸結合型牛磺熊去氧膽酸、鵝去氧膽酸、膽酸、去氧膽酸、微量膽色素及非膽汁酸類成分蛋白質、肽、微量游離氨基酸、膽固醇、脂肪酸和無機元素。

牛磺熊去氧膽酸(TUDCA)，是由熊去氧膽酸(UDCA)的梭基與牛磺酸的氨基之間縮水而成的結合型膽汁酸。牛磺熊去氧膽酸是熊膽汁的有效成分，膽汁酸組合物具有較強的退熱、抗菌、止痛鎮痙作用，對革蘭氏陽性菌有較強的抑制作用。工藝中去除過飽和脂質蛋白應是制劑關鍵目的，目前現有工藝中針對去脂提純制備參數隨意性較大，醇沉后洗滌技術不達標，制備過程控制不了蛋白變性等不利復雜因素，導致大規模生產用于產品純度不高。

本發明為了解決現有工藝中蛋白分離技術的缺點，根據膽汁酸中生物分子對溫度、濃度、時間的敏感特性，嚴格限定溶解、醇沉技術參數，達到提取具有生物活性的目的物質牛磺熊去氧膽酸。

發明內容

為解決上述技術問題，本發明以熊膽粉為原料，提供一種制備工藝簡單、分離效果優異的熊膽粉滴眼液原液提取方法。

一種熊膽粉滴眼液原液的提取方法，包括如下工藝步驟：

(1)取1重量份的熊膽粉，研磨成粉末；

(2)熊膽粉水溶液的制備：

另取5～6重量份注射用水，在21℃～25℃或40℃～50℃的溫度下邊攪拌邊加入1重量份熊膽粉末，至完全溶解；

(3)熊膽粉醇沉步驟如下：

將步驟(2)溶液達到18℃～20℃邊攪拌邊加入，熊膽粉10～12重量份95％乙醇緩慢細流，攪勻，21℃～25℃靜置24h，取上清液4℃備用；

或

將步驟(2)溶液降至4℃～6℃邊攪拌邊加入，熊膽粉10～12重量份95％乙醇緩慢細流，攪勻，4℃～6℃靜置24h～48h，取上清液4℃備用；

(4)將步驟(3)剩余沉淀物，再添加10～12重量份95％乙醇洗滌，洗滌液在4℃～6℃的溫度下放置2h～6h，取上清液；

(5)合并步驟(3)和(4)的上清液，回收至無醇味，即得。

優選地，步驟(2)中，1重量份的熊膽粉加入5重量份的乙醇。

優選地，步驟(4)中，醇沉殘渣洗滌前溫度降至20℃以下。

優選地，步驟(4)中靜置時間為3-5h。

優選地，步驟(4)中洗滌液的靜置溫度為4℃。

與國家藥品標準相比，本發明設定的溶解劑醇沉液濃度、溫度、時間對熊膽粉提取原液進行熊膽粉雜質峰指紋圖譜定性定量分析，大幅去除了脂類蛋白等無效成分，保證提取液中主藥成份牛磺熊去氧膽酸的含量和活性。

具體實施方式

下面將結合本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本發明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發明保護的范圍。

實施例1