[發(fā)明專利]一種受植物激素誘導(dǎo)的楊樹啟動(dòng)子pPsTMM及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810243492.5
• 申請(qǐng)日: 2018-03-23
• 公開（公告）號(hào): CN108251426B
• 公開（公告）日: 2021-07-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳英;樂(lè)麗娜;王浩然;滕青云;黃敏仁
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京林業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N15/113
• 分類號(hào): C12N15/113;C12N15/82;C12N15/66;C12N1/21;A01H5/00;A01H6/82;C12R1/01
• 代理公司: 南京蘇高專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 32204
• 代理人: 肖明芳

1.一種受植物激素誘導(dǎo)的楊樹啟動(dòng)子pPsTMM，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ IDNO：1所示。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述受植物激素誘導(dǎo)的楊樹啟動(dòng)子pPsTMM，其特征在于，所述植物激素為赤霉素、萘乙酸、脫落酸、水楊酸中的任意一種或幾種。

3.權(quán)利要求1或2任意一項(xiàng)所述受植物激素誘導(dǎo)的楊樹啟動(dòng)子pPsTMM的構(gòu)建方法，其特征在于，步驟如下：以小葉楊DNA為模板，設(shè)計(jì)簡(jiǎn)并引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增；所述簡(jiǎn)并引物包括：

第一對(duì)引物：

F1-5’ATTGGAGAGTGTGGCCCTCTTTTAC3’、

R1-5’CGATCAATCCACCCACCCAGCTTTA3’；以及

第二對(duì)引物：

F2-5’TGTTGAGCCTGAGTAGCTGTTGGTT3’、

R2-5’GTTGGTGCGTGGAGTGAAAAGGCTA3’。

4.含權(quán)利要求1或2任意一項(xiàng)所述受植物激素誘導(dǎo)的楊樹啟動(dòng)子pPsTMM的載體，其特征在于，在所述載體的啟動(dòng)子pPsTMM 3’端組裝GUS基因。

5.權(quán)利要求4所述載體的構(gòu)建方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)將pMD19-pPsTMM載體使用HindIII和BamHⅠ雙酶酶切，回收帶酶切位點(diǎn)的pPsTMM啟動(dòng)子；

(2)將35S-pBI121-GUS載體使用HindIII和BamHⅠ雙酶酶切，得到缺失35S啟動(dòng)子區(qū)的pBI121-GUS載體；

(3)將步驟(1)得到的帶酶切位點(diǎn)的pPsTMM啟動(dòng)子和步驟(2)得到的缺失35S啟動(dòng)子區(qū)的pBI121-GUS載體使用T4DNA連接酶連接，得到pPsTMM-pBI121-GUS載體。

6.含權(quán)利要求1或2任意一項(xiàng)所述受植物激素誘導(dǎo)的楊樹啟動(dòng)子pPsTMM的重組菌。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的重組菌，其特征在于，所述重組菌為重組農(nóng)桿菌。

8.權(quán)利要求1或2任意一項(xiàng)所述受植物激素誘導(dǎo)的楊樹啟動(dòng)子pPsTMM在植物激素脅迫下誘導(dǎo)GUS基因上調(diào)表達(dá)中的應(yīng)用，所述的植物激素為赤霉素、萘乙酸、脫落酸、水楊酸中的任意一種或幾種。