[發(fā)明專利]流式細(xì)胞儀及粒子的檢出方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810238964.8
• 申請日: 2018-03-22
• 公開（公告）號: CN108693100B
• 公開（公告）日: 2022-09-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 木西基;加村翔平;立谷洋大;吉岡貴史;中島隆行
• 申請（專利權(quán)）人: 希森美康株式會社
• 主分類號: G01N15/14
• 分類號: G01N15/14
• 代理公司: 北京市安倫律師事務(wù)所 11339
• 代理人: 楊永波;劉思汶

本發(fā)明提供一種流式細(xì)胞儀使接受過特別訓(xùn)練的技術(shù)員以外的其他人員能在必要時輕松地提供高可信度的流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果。流式細(xì)胞儀10包括：輸入部60，接受用于確定測定項(xiàng)目的信息的輸入；條件選擇部71，從所述輸入部60接受的所述用于確定測定項(xiàng)目的信息所對應(yīng)的一個或數(shù)個測定條件中選擇測定條件；以及測定部65，具有供含有試樣中的粒子的含粒子液體通過的流動室20，與通過所述條件選擇部選擇的測定條件相應(yīng)地對通過所述流動室20的所述含粒子液體中的粒子進(jìn)行光學(xué)測定。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種流式細(xì)胞儀及粒子的檢出方法，更具體而言，本發(fā)明涉及一種能夠簡便地設(shè)定測定條件的流式細(xì)胞儀及粒子的檢出方法。

背景技術(shù)

流式細(xì)胞術(shù)這一方法會用到能以鞘流方式逐個逐個地檢出粒子的流式細(xì)胞儀，通過光學(xué)方式檢出分散于液體中的各個粒子的大小、結(jié)構(gòu)、熒光強(qiáng)度等，并根據(jù)檢出的信息計測粒子的數(shù)目、分布。關(guān)于流式細(xì)胞儀，既存在能根據(jù)用戶需求設(shè)定粒子的測定條件等參數(shù)的應(yīng)用范圍較廣的通用流式細(xì)胞儀，也存在專門檢出特定種類粒子的專用流式細(xì)胞儀(例如專利文獻(xiàn)1)。

流式細(xì)胞術(shù)能通過與熒光免疫染色進(jìn)行組合而檢出細(xì)胞表面、細(xì)胞內(nèi)存在的各種抗原，對細(xì)胞分析來說非常有用。最初開發(fā)的流式細(xì)胞儀只能使用一種熒光色素逐種逐種地分別檢出抗原。即，細(xì)胞表面存在數(shù)種抗原時，需要根據(jù)想要檢出的抗原數(shù)目相應(yīng)地增加化驗(yàn)次數(shù)，而且需要與化驗(yàn)次數(shù)相應(yīng)地增加測定所需要采集的細(xì)胞數(shù)目。而現(xiàn)在，流式細(xì)胞術(shù)中會用到的分析技術(shù)取得了飛躍性進(jìn)步，熒光色素穩(wěn)定化、多色化，用于激發(fā)熒光色素的各種各樣的激光光源被開發(fā)出來，基因重組技術(shù)之下多種抗原的大量生產(chǎn)使檢出抗體的產(chǎn)品線不斷充實(shí)。另外，人以及鼠的全基因序列已得以確定，許多蛋白質(zhì)、表面標(biāo)志得以鑒別。因此能作為流式細(xì)胞術(shù)分析對象的抗原、細(xì)胞內(nèi)標(biāo)志的數(shù)量變得非常龐大。在這一分析技術(shù)進(jìn)步、分析對象抗原等增加的背景之下，目前流式細(xì)胞術(shù)領(lǐng)域的主流技術(shù)是在一次化驗(yàn)中同時測定數(shù)種至十幾種抗原的多色流式細(xì)胞術(shù)。

與此同時，多色流式細(xì)胞術(shù)中存在一個問題-包括對細(xì)胞進(jìn)行免疫染色的階段在內(nèi)，測定條件的設(shè)定非常復(fù)雜。例如，伴隨著熒光色素的多色化，能一次性分析的抗原數(shù)目得以增加，但同時，要同時檢出數(shù)種熒光色素就需要針對每一熒光色素、每一激發(fā)激光光源分別調(diào)整流式細(xì)胞儀的靈敏度來實(shí)現(xiàn)各熒光色素最大精度的檢出。另外，熒光色素之間的某些組合方式下會出現(xiàn)一種熒光色素對其他熒光色素的熒光強(qiáng)度起干擾作用或放大作用的情形，因此需要了解相互組合的熒光色素之間的適配情況。另外，兩種以上的熒光光譜重疊的波長區(qū)域則需要對熒光強(qiáng)度的實(shí)測值進(jìn)行熒光補(bǔ)正。另外，在將免疫染色后的細(xì)胞供給流式細(xì)胞儀之前需要掌握抗體的特性信息，舉一例來說，要通過一次化驗(yàn)檢出多種抗原不僅需要根據(jù)作為檢出對象的細(xì)胞種類來選擇抗原，而且還要清楚檢出抗體是否針對與靶抗原同時檢出的其他抗原呈交叉反應(yīng)性，出現(xiàn)交叉反應(yīng)性的不同抗原需要?dú)w于不同的化驗(yàn)。綜上，要想通過多色流式細(xì)胞術(shù)獲得可信度高、再現(xiàn)性好的結(jié)果，負(fù)責(zé)多色流式細(xì)胞術(shù)的操作人員必須具備足以進(jìn)行如上所述的復(fù)雜的條件設(shè)定的龐大知識量。

為培養(yǎng)能使用復(fù)雜的多色流式細(xì)胞術(shù)的技術(shù)員，流式細(xì)胞儀廠商會為流式細(xì)胞術(shù)從業(yè)者召開研討會，力圖普及流式細(xì)胞術(shù)技術(shù)、提高技術(shù)員水平。此外，日本細(xì)胞測定學(xué)會（JapanCytometrySociety）設(shè)立了細(xì)胞測定技術(shù)員認(rèn)定制度，旨在培養(yǎng)一定水平以上的細(xì)胞測定技術(shù)員、推動技術(shù)水平提高。

即，目前為應(yīng)對如上所述的多色流式細(xì)胞術(shù)的復(fù)雜性而出現(xiàn)的各種舉措均著眼于培養(yǎng)、教育技術(shù)員，而非對流式細(xì)胞儀的硬件、軟件進(jìn)行改良。

現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)

專利文獻(xiàn)

【專利文獻(xiàn)1】日本專利（特開）2003－287491號公報。

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明要解決的技術(shù)問題