[發明專利]能抑制和殺滅革蘭氏陰性菌的抗菌肽HV2及制備方法

在審

• 申請號: 201810238434.3
• 申請日: 2018-03-22
• 公開（公告）號: CN108276485A
• 公開（公告）日: 2018-07-13
• 發明（設計）人: 董娜;程寶晶;汪沉思;單安山
• 申請（專利權）人: 東北農業大學
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C07K1/20;C07K1/04;A61K38/17;A61P31/04
• 代理公司: 哈爾濱市哈科專利事務所有限責任公司 23101
• 代理人: 吳振剛

本發明涉及一種能抑制和殺滅革蘭氏陰性菌的抗菌肽HV2及制備方法。抗菌肽HV2的序列如序列表SEQ ID No.1所示。制備方法：1)根據β?發卡結構對稱性末端肽模板：(XY)₂X ^DP G X(YX)₂，X＝V；Y是帶正電荷氨基酸殘基H，設計獲得HV2。2)固相合成法合成肽樹脂；經TFA切割后得到該肽，反相高效液相色譜純化，及該抗菌肽在制備治療革蘭氏陰性菌感染性疾病藥物中的應用。本發明所得到的抗菌肽HV2對革蘭氏陰性菌具有較強的抑菌活性和較弱的溶血活性，治療指數較高，具有很大的發展潛力。是一種具有高細胞選擇性、專殺革蘭氏陰性菌的對稱末端β?發卡抗菌肽。

技術領域

本發明涉及一種能抑制和殺滅革蘭氏陰性菌的抗菌肽HV2及制備方法。

背景技術

抗菌肽(Antimicrobial peptides,AMPs)是動物機體天然免疫系統抵抗外界病原體入侵清除機體內有害突變細胞的一類小分子多肽，其廣泛存在于動植物體內各個組織器官中，抗菌肽主要生物學作用是其可殺滅包括革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌在內的多種細菌，具有抗菌廣譜，殺菌速度快的特點。除了抑制和殺死細菌外，還具有抗真菌、抗病毒、抑制或殺傷腫瘤細胞、殺滅引起瘧疾、利什曼病等疾病的寄生蟲、抗原蟲等作用。此外，抗菌肽的抑菌機理與抗生素不同，抗菌肽是通過物理滲透的方式作用于細菌的細胞膜結構，使細胞內溶物外泄從而殺死細菌，所以細菌不易對其產生耐藥性。因此抗菌肽有潛力成為抗生素的替代藥物。硫酸粘桿菌素又名硫酸粘菌素等，它是由多粘桿菌產生，對革蘭氏陰性菌有較強的抗菌作用，用于治療革蘭氏陰性菌引起的腸道疾病。一直以來硫酸粘桿菌素作為飼料添加劑，添加到豬飼料中具有明顯促生長作用。然而，中華人民共和國農業部公告第2428號規定，2016年11月1日起，飼料中禁止使用硫酸粘桿菌素預混劑，2016年10月31日(含)前生產的產品，可在2017年4月30號前繼續流通使用。硫酸粘桿菌素的禁用導致人民迫切需要尋找一種專殺革蘭氏陰性菌的抗菌劑。

發明內容

基于以上不足之處，本發明提供一種能抑制和殺滅革蘭氏陰性菌的抗菌肽HV2及制備方法。

本發明所采用的技術如下：一種能抑制和殺滅革蘭氏陰性菌的抗菌肽HV2，其序列如序列表SEQ ID No.1所示。

本發明還具有如下技術特征：

1、一種制備如上所述的能抑制和殺滅革蘭氏陰性菌的抗菌肽HV2的制備方法如下：

1)根據β-發卡結構對稱性末端肽模板：RR(XY)₂X ^DP G X(YX)₂RR，X＝V；Y是帶正電荷氨基酸殘基H，獲得抗菌HV2；

2)采用固相化學合成法通過多肽合成儀得到肽樹脂；將得到的肽樹脂經過TFA切割；然后經過反相高效液相色譜純化和質譜鑒定后，即完成該抗菌肽HV2的制備。

2、如上所述的一種能抑制和殺滅革蘭氏陰性菌的抗菌肽HV2在制備治療革蘭氏陰性菌感染性疾病藥物中的應用。