[發明專利]一種使用支撐浴的多噴頭快速3D打印腫瘤組織模型的方法

有效

• 申請號: 201810236195.8
• 申請日: 2018-03-21
• 公開（公告）號: CN108587903B
• 公開（公告）日: 2021-10-26
• 發明（設計）人: 薛巍;宋镕光;阮淼亮;戴箭;王永周
• 申請（專利權）人: 暨南大學
• 主分類號: C12M3/00
• 分類號: C12M3/00;B33Y30/00
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 崔紅麗;陳燕嫻

1.一種使用支撐浴的多噴頭快速3D打印腫瘤組織模型的方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)腫瘤細胞墨水的制備

以含有10％體積FBS的25mM HEPES緩沖液為溶劑，配置光固化明膠2％～8％與海藻酸鈉1％～5％磁力攪拌均勻，紫外滅菌處理，加入0.1％Irgacure2959光引發劑；加入含腫瘤細胞的DMEM完全培養基，用移液槍吹打均勻，放入培養箱待用；

(2)正常組織細胞墨水的制備

以含有10％體積FBS的25mM HEPES緩沖液為溶劑，配置光固化明膠2％～8％與海藻酸鈉1％～5％磁力攪拌均勻，紫外滅菌處理，加入0.1％Irgacure2959光引發劑；將正常組織細胞加入DMEM完全培養基，用移液槍吹打均勻，放入培養箱待用；

(3)水凝膠的支撐浴的制備

水凝膠支撐浴的主要材料為丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交聯共聚物，采用高溫滅菌處理；再以0.3M氯化鈣溶液為溶劑配置質量分數為0.1％～1％的卡波姆凝膠，放入無菌環境待用；

(4)3D打印制備

采用多噴頭，程序切換的打印技術，實現3D打印快速切換；載入腫瘤組織模型，程序切片處理；第一步打印正常細胞組織模型，第二步進行腫瘤細胞的打?。蛔詈笥谜＜毎M行封裝；紫外功率800mW在5～10cm處交聯30～60s完成腫瘤組織的雙重交聯成型；全程均在卡波姆凝膠中進行，光照后卡波姆凝膠粘度降低，水沖洗將其除去，得到完整的腫瘤組織模型；打印機采用擠出型生物3D打印機，打印溫度設定為37±1℃；打印速度為15mm/s～25mm/s；打印針頭為同軸針頭，外針內徑0.1～0.25mm；內部打印壓強為0.2～0.6KPa。

2.根據權利要求1中所述的使用支撐浴的多噴頭快速3D打印腫瘤組織模型的方法，其特征在于：

步驟(1)、(2)中所述的光固化明膠為GelMA。

3.根據權利要求1或2中所述的使用支撐浴的多噴頭快速3D打印腫瘤組織模型的方法，其特征在于：

步驟(1)中所述的光固化明膠的濃度為2％～5％。

4.根據權利要求1中所述的使用支撐浴的多噴頭快速3D打印腫瘤組織模型的方法，其特征在于：

步驟(1)、(2)中所述的海藻酸鈉的濃度為1％～3％。

5.根據權利要求1中所述的使用支撐浴的多噴頭快速3D打印腫瘤組織模型的方法，其特征在于：

步驟(1)中所述的腫瘤細胞的濃度為1～3×10⁶/mL。

6.根據權利要求1中所述的使用支撐浴的多噴頭快速3D打印腫瘤組織模型的方法，其特征在于：

步驟(2)中所述的正常組織細胞的濃度為1～3×10⁶/mL。

7.根據權利要求1中所述的使用支撐浴的多噴頭快速3D打印腫瘤組織模型的方法，其特征在于：

步驟(3)中，以0.3M氯化鈣溶液為溶劑配置質量分數為0.4％～1％的卡波姆凝膠。

8.根據權利要求1中所述的使用支撐浴的多噴頭快速3D打印腫瘤組織模型的方法，其特征在于：

步驟(4)中所述的打印速度為15mm/s～20mm/s。

9.根據權利要求1中所述的使用支撐浴的多噴頭快速3D打印腫瘤組織模型的方法，其特征在于：

步驟(4)中所述的內部打印壓強為0.4～0.5KPa。