[發(fā)明專利]一種雞肉中肌苷酸含量液相色譜檢測(cè)方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810232442.7
• 申請(qǐng)日: 2018-03-21
• 公開（公告）號(hào): CN108181409A
• 公開（公告）日: 2018-06-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 席斌;高雅琴;褚敏;李維紅;郭天芬;陳效威;楊曉玲
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種雞肉中肌苷酸含量液相色譜檢測(cè)方法，其特征在于，包括以下步驟：

第一步，選定原材料；

第二步，選定試劑及主要儀器；

第三步，配制主要溶液；

第四步，原材料處理；

第五步，色譜條件設(shè)置；

第六步，檢測(cè)結(jié)果的分析的計(jì)算。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種雞肉中肌苷酸含量液相色譜檢測(cè)方法，其特征在于：所述第一步，選定原材料的具體步驟如下，選取一定量的新鮮肉雞胸肌樣品，并置于-20℃、常壓的狀態(tài)下保存待用。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種雞肉中肌苷酸含量液相色譜檢測(cè)方法，其特征在于：所述第二步，選定試劑及主要儀器的具體步驟如下，試劑包括：肌苷酸標(biāo)準(zhǔn)品，含量65.32％；甲醇，色譜純；甲酸銨，分析純；高氯酸，優(yōu)級(jí)純，含量70％～72％，主要儀器包括：液相色譜儀；紫外檢測(cè)器；高速離心機(jī)；高速組織勻漿機(jī)；絞肉機(jī)。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種雞肉中肌苷酸含量液相色譜檢測(cè)方法，其特征在于：所述第三步，配制主要溶液的具體步驟如下，所述主要溶液包括甲酸銨緩沖溶液、肌苷酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液和肌苷酸標(biāo)準(zhǔn)工作液；

甲酸銨緩沖溶液的配制：稱3.15g甲酸銨置于燒杯內(nèi)，并向燒杯內(nèi)加500ml去離子水，再向燒杯內(nèi)倒入0.5mol/L的氫氧化鈉溶液，將燒杯內(nèi)的混合液調(diào)至pH為6.5，定容至1000ml，選用0.45μm濾膜進(jìn)行過濾，再置入超聲水浴內(nèi)脫氣20min；

肌苷酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的配制：準(zhǔn)確稱取15.31mg肌苷酸標(biāo)準(zhǔn)品，用濃度為5％的甲醇水溶液定容至10ml，并且充分搖勻；

肌苷酸標(biāo)準(zhǔn)工作液的配制：取配制好的肌苷酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1ml，用濃度為5％的甲醇水溶液定容至10ml，并且充分搖勻。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種雞肉中肌苷酸含量液相色譜檢測(cè)方法，其特征在于：所述第四步，原材料處理的具體步驟如下，將肉雞胸肌樣品用絞肉機(jī)絞碎后稱取5g，準(zhǔn)確至0.0001g，置于50ml塑料離心管中，分次加入共20m濃度為l6％的高氯酸，用高速組織勻漿機(jī)勻漿，勻漿液以8000r/min的速度離心13min，離心過濾后將上清液置于100ml三角瓶中，將離心后得到的沉淀物用15m濃度為l6％的高氯酸再次進(jìn)行勻漿、離心，過濾出第二次離心的上清液并倒入三角瓶中，用5.0mol/L和0.5mol/L的NaOH溶液將三角瓶中液體的pH值調(diào)至6.5，再將三角瓶內(nèi)的溶液轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶中，定容并且充分搖勻，用0.45μm濾膜過濾后制得樣品提取液備用。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種雞肉中肌苷酸含量液相色譜檢測(cè)方法，其特征在于：所述第五步，色譜條件設(shè)置的具體步驟如下，色譜柱：WatersAtlantisTMdC18柱(5μm，Φ4.6mm×150mm)；流動(dòng)相：50mmol/LpH6.5甲酸銨緩沖溶液(含5％甲醇)；流速：1ml/min；柱溫：25℃；進(jìn)樣量：5μl；紫外檢測(cè)波長：254nm；運(yùn)行時(shí)間：肌苷酸標(biāo)準(zhǔn)工作液運(yùn)行4min，樣品提取液運(yùn)行11min。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種雞肉中肌苷酸含量液相色譜檢測(cè)方法，其特征在于：所述第六步，檢測(cè)結(jié)果的分析的計(jì)算的具體步驟如下，將樣品提取液和肌苷酸標(biāo)準(zhǔn)工作液在設(shè)置的色譜條件下進(jìn)行分析，根據(jù)兩種溶液峰面積響應(yīng)值計(jì)算出原材料中肌苷酸的含量。