[發明專利]一種增強性磁靶向細胞熒光納米探針及其制備方法

有效

• 申請號: 201810230648.6
• 申請日: 2018-03-20
• 公開（公告）號: CN108358978B
• 公開（公告）日: 2020-09-08
• 發明（設計）人: 羅擎英;黎杉珊;劉蜀坤;劉耀文;張志清;陳安均;申光輝;吳賀君;李美良;劉興艷;蘇趙;吳敏;曹洪芙
• 申請（專利權）人: 四川農業大學
• 主分類號: C07F15/02
• 分類號: C07F15/02;C09K11/06;C09B57/00;G01N21/64
• 代理公司: 成都智涌知識產權代理事務所(普通合伙) 51313
• 代理人: 周正輝

本發明提供了一種增強性磁靶向細胞熒光納米探針的制備方法，其步驟為：(1)將四氧化三鐵的乙醇溶液緩慢的加入乙醇水溶液中，于超聲的條件下，緩慢加入氨水；于攪拌的條件下，滴加TEOS、8?氯乙?；被臀镔|A；所述物質A的化學結構式如式l；(2)將步驟(1)所得物利用無水乙醇清洗后，再利用無水甲苯清洗，之后加入無水甲苯和APTES，于105℃下進行回流反應8小時，之后利用磁場分離磁性粒子，利用乙醇進行清洗，即得，所得納米熒光探針的粒徑為200～250nm。本發明可以實現對于體內細胞的成像，由于所得探針具有磁響應性，還可以用于磁靶向性的對體內細胞成像。

技術領域

本發明屬于生物醫學納米探針技術領域，具體涉及一種增強性磁靶向細胞熒光納米探針及其制備方法。

背景技術

目前，在細胞的成像工作中，主要采用熒光染料進行，常用的染料具有容易猝滅、使用周期短的缺點，使得細胞的熒光成像工作有著較大的環境及應用時長的限制。

隨著研究的不斷深入，利用細胞內的鈣離子、鎂離子、銅離子和鋅離子來進行相應的熒光檢測，成為開展細胞成像工作的科研方向之一。

在制備鋅離子探針方面，公開號為CN 101613344A的中國專利和公開號為CN102735662A的中國專利進行了有益的探索，獲得了較好的效果。不過，雖然鋅離子探針獲得了廣泛的研究，但是利用其進行深入的細胞成像的研究卻很少。

磁靶向探針由于具有磁導向性，在癌癥診斷及治療方面具有廣泛的應用。

因此，研發一種具有磁靶向功能、利用細胞內鋅離子進行細胞成像的探針，是本領域所亟需的。

發明內容

針對現有技術的缺點，本發明的目的在于提供一種增強性磁靶向細胞熒光納米探針的制備方法該制備方法的步驟為：

(1)將四氧化三鐵的乙醇溶液緩慢的加入乙醇水溶液中，于超聲的條件下，緩慢加入氨水；于攪拌的條件下，加入8-氯乙?；被臀镔|A，并滴加TEOS；

所述物質A的化學結構式如式l：

(2)將步驟(1)所得物利用無水乙醇清洗后，再利用無水甲苯清洗，之后加入無水甲苯和APTES，于105℃下進行回流反應8小時，之后利用磁場分離磁性粒子，利用乙醇進行清洗，即得。

在本發明中，發明人選用了與鋅離子能夠產生特異性識別反應的8-氯乙?；被?。不過發明人發現，當僅利用其制備磁性納米探針時，所得該熒光很弱，幾乎難以分辨，難以用于細胞成像。

通過反復試驗，發明人加入如式l所示的化合物后，發現可以顯著的增強對于在波長500nm處鋅離子檢測時的熒光強度，使得制備出來的探針可以直接用于細胞的熒光成像。

在此前的研究當中，授權公告號為CN 104198449 B的中國專利采用了如式Ⅱ所式的化合物作為探針，獲得了很好的細胞成像效果。不過，發明人發現，其難以用于磁靶向性細胞熒光納米探針的制備。當用其制備磁靶向性細胞熒光納米探針，熒光強度會出現大幅的下降，無法完成細胞成像工作。造成該現象的原因正在通過設計不同的、類似的化合物來進行進一步的摸索確認。

在具體的工作中，發明采用PC3細胞(人體前列腺癌細胞)進行，并發現了上述的現象，所采用的細胞是與授權公告號為CN 104198449 B的中國專利是一致的。