[發(fā)明專利]利用多種植物激素誘導(dǎo)三角褐指藻大量積累油脂的方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201810229289.2
• 申請日: 2018-03-20
• 公開（公告）號: CN108342349A
• 公開（公告）日: 2018-07-31
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 崔玉琳;初金玲;秦松
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院煙臺海岸帶研究所
• 主分類號: C12N1/38
• 分類號: C12N1/38;C12N1/12;C12P7/64;C12R1/89
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標(biāo)代理有限公司 21002
• 代理人: 李穎;周秀梅

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體的說是一種利用多種植物激素誘導(dǎo)三角褐指藻大量積累油脂的方法。向培養(yǎng)至對數(shù)生長期接近穩(wěn)定期的三角褐指藻液中加入添加劑進(jìn)行激素誘導(dǎo)，而后在23?25℃、光強(qiáng)30?35μmoL·m^?2·s^?1、光暗比12h/12h條件下培養(yǎng)6天，即實現(xiàn)油脂的積累；其中，添加劑為茉莉酸甲酯、脫落酸和水楊酸中的一種或幾種的組合，添加劑的添加量為每升藻液中13?15mg茉莉酸甲酯、5?7mg脫落酸和1?3mg水楊酸。本發(fā)明方法簡單易行、成本低、無污染、穩(wěn)定高效。采用本發(fā)明方法調(diào)控后獲得的藻體油脂含量高，增加迅速，可以作為工業(yè)化生物產(chǎn)油原料。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體的說是一種利用多種植物激素誘導(dǎo)三角褐指藻大量積累油脂的方法。

背景技術(shù)

全球化經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展，使得各國的能源消耗量急劇攀升。然而，地球上的化石能源儲存是有限的，按照目前的消耗速度終有一天會被消耗殆盡。屆時，人類社會的發(fā)展會受到嚴(yán)重限制。解決這一問題的關(guān)鍵在于尋找到新型可再生的清潔能源，這一壓力已經(jīng)迫在眉睫。生物柴油作為綠色可持續(xù)發(fā)展的新能源，受到越來越多的關(guān)注。我國傳統(tǒng)的工業(yè)化生物柴油目前主要還是大豆、棕掘油等植物脂肪和某些動物脂肪或者廢食用油作為原材料。原料雖然多樣，但來源是非常有限的，因此尋找新一代的生物柴油原料已經(jīng)迫在眉睫。而微藻因易于培養(yǎng)、具有單位面積產(chǎn)量大等優(yōu)點，被視為新一代的、甚至是唯一能實現(xiàn)完全替代石化柴油的生物柴油原料。

微藻生物柴油生產(chǎn)的一大難題是傳統(tǒng)油脂積累誘導(dǎo)方法復(fù)雜、困難、成本高昂。在眾多誘導(dǎo)方式中，利用添加植物生長調(diào)節(jié)劑的手段進(jìn)行人工誘導(dǎo)積累，較傳統(tǒng)誘導(dǎo)調(diào)控方式具有簡單、高效、直接、可控性高等特點。

三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)是硅藻門、羽文藻綱、褐指藻屬的一種單細(xì)胞浮游藻種，脂質(zhì)含量達(dá)細(xì)胞干重的20-30％，是微藻生物柴油開發(fā)的優(yōu)良藻種。但是其脂質(zhì)含量距離生產(chǎn)工藝開發(fā)尚有距離，選擇一種誘導(dǎo)效率穩(wěn)定高效的植物生長調(diào)節(jié)劑是當(dāng)前一項重要的內(nèi)容。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種操作簡單、速度快、成本低、穩(wěn)定高效的一種利用多種植物激素誘導(dǎo)三角褐指藻大量積累油脂的方法。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用技術(shù)方案為：

一種利用多種植物激素誘導(dǎo)三角褐指藻大量積累油脂的方法，向培養(yǎng)至對數(shù)生長期接近穩(wěn)定期的三角褐指藻液中加入添加劑進(jìn)行激素誘導(dǎo)，而后在23-25℃、光強(qiáng)30-35μmoL·m^-2·s^-1、光暗比12h/12h條件下培養(yǎng)6天，即實現(xiàn)油脂的積累；其中，添加劑為茉莉酸甲酯、脫落酸和水楊酸中的一種或幾種的組合，添加劑的添加量為每升藻液中13-15mg茉莉酸甲酯、5-7mg脫落酸和1-3mg水楊酸。

所述添加劑為每升藻液中14mg茉莉酸甲酯、6mg脫落酸和2mg水楊酸；獲得油脂量為0.403119mg/10L。

所述培養(yǎng)至對數(shù)生長期接近穩(wěn)定期的三角褐指藻液為將三角褐指藻在溫度23-25℃、光強(qiáng)30-35μmoL·m^-2·s^-1、光暗比12h/12h的條件下，培養(yǎng)至對數(shù)生長期接近穩(wěn)定期(OD₇₃₀為0.2-0.25)。

本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，其優(yōu)點是：

1.本發(fā)明方法簡單易行、成本低、無污染、穩(wěn)定高效。

2.采用本發(fā)明方法調(diào)控后獲得的藻體油脂含量高，增加迅速，可以作為工業(yè)化生物產(chǎn)油原料。

3.采用本發(fā)明方法，添加混合植物激素茉莉酸甲酯、脫落酸和水楊酸能夠誘導(dǎo)三角褐指藻大量積累甘油三酯，是單獨(dú)添加植物激素誘導(dǎo)三角褐指藻積累甘油三酯含量的2倍。

附圖說明