[發(fā)明專利]用于人多能細(xì)胞培養(yǎng)的簡化基礎(chǔ)培養(yǎng)基在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810229027.6 | 申請日： | 2011-08-05 |
| 公開（公告）號： | CN108531444A | 公開（公告）日： | 2018-09-14 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | J·A·托馬森;陳國凱 | 申請（專利權(quán)）人： | 威斯康星校友研究基金會 |
| 主分類號： | C12N5/074 | 分類號： | C12N5/074 |
| 代理公司： | 上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 31100 | 代理人： | 陶啟長 |
| 地址： | 美國威*** | 國省代碼： | 美國;US |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 培養(yǎng)基 多能干細(xì)胞 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 多能細(xì)胞 增殖 克隆 成熟 | ||
1.一種完全限定的無異源的無白蛋白培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基由以下成分組成：水、鹽、氨基酸、維生素、葡萄糖、胰島素、FGF、硒、轉(zhuǎn)鐵蛋白、以及TGF-β和NODAL二者之一，各所述成分的量足以支持人多能干細(xì)胞增殖。
2.一種用于培養(yǎng)人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞的方法，所述方法包括以下步驟：
將人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞置于基質(zhì)上；以及
使所述細(xì)胞接觸完全限定的無異源的無白蛋白培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基由以下成分組成：
水、鹽、氨基酸、維生素、葡萄糖、胰島素、FGF、硒、轉(zhuǎn)鐵蛋白、以及TGF-β和NODAL二者之一，各所述成分的量足以支持人多能干細(xì)胞增殖。
3.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述基質(zhì)包含層粘連蛋白。
4.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述基質(zhì)包含玻連蛋白。
5.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，使所述細(xì)胞在低氧條件下接觸所述培養(yǎng)基。
6.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞產(chǎn)自成人體細(xì)胞。
7.一種用于克隆人多能干細(xì)胞的方法，所述方法包括以下步驟：
在完全限定的無異源的無白蛋白培養(yǎng)基中以克隆密度將產(chǎn)自成人體細(xì)胞的人多能干細(xì)胞鋪板，所述培養(yǎng)基由以下成分組成：水、鹽、氨基酸、維生素、葡萄糖、胰島素、FGF、硒、轉(zhuǎn)鐵蛋白、以及TGF-β和NODAL二者之一，各所述成分的量足以支持人多能干細(xì)胞克隆。
8.如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述培養(yǎng)基還包含ROCK抑制劑。
9.如權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于，所述ROCK抑制劑選自HA100和Y27632。
10.如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述培養(yǎng)基還包含肌球蛋白抑素。
11.一種凍存人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞的方法，所述方法包括以下步驟：
在完全限定的無異源的無白蛋白培養(yǎng)基中冷凍人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞，所述培養(yǎng)基由以下成分組成：水、鹽、氨基酸、維生素、葡萄糖、胰島素、FGF、硒、轉(zhuǎn)鐵蛋白、以及TGF-β和NODAL二者之一，各所述成分的量足以支持人多能干細(xì)胞增殖。
12.一種用于在限定條件下衍生人誘導(dǎo)性多能干(iPS)細(xì)胞的方法，所述方法包括以下步驟：
在完全限定的無異源的無白蛋白培養(yǎng)基中重編程成人體細(xì)胞，所述培養(yǎng)基由以下成分組成：水、鹽、氨基酸、維生素、葡萄糖、胰島素、FGF、硒、轉(zhuǎn)鐵蛋白、以及TGF-β和NODAL二者之一，各所述成分的量足以支持體細(xì)胞的重編程以衍生人iPS細(xì)胞。
13.如權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于，所述重編程步驟包括使所述細(xì)胞接觸TGF-β5～10天。
14.如權(quán)利要求13所述的方法，其還包括以下步驟：
在5～10天后移除TGF-β；以及
使所述細(xì)胞接觸培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基基本由以下成分組成：
水、鹽、氨基酸、維生素、碳源、胰島素、FGF、硒和轉(zhuǎn)鐵蛋白。
15.如權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于，所述重編程步驟包括使所述細(xì)胞接觸氫化可的松。
16.如權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于，所述重編程步驟包括使所述細(xì)胞接觸丁酸鹽。
17.如權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于，在無異源條件下衍生所述iPS細(xì)胞。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于威斯康星校友研究基金會，未經(jīng)威斯康星校友研究基金會許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201810229027.6/1.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
- 同類專利
- 專利分類
- 培養(yǎng)多能干細(xì)胞的方法和設(shè)備
- 多能干細(xì)胞的增殖方法
- 源自多能干細(xì)胞的褐色脂肪細(xì)胞、源自多能干細(xì)胞的細(xì)胞凝聚物，其制造方法以及細(xì)胞療法、內(nèi)科療法
- 誘導(dǎo)多能干細(xì)胞、制備誘導(dǎo)多能干細(xì)胞的方法
- 一種誘導(dǎo)多能干細(xì)胞分泌素的制備方法及其應(yīng)用
- 由多能干細(xì)胞制造心臟祖細(xì)胞和心肌細(xì)胞的制造方法
- 有效修復(fù)地中海貧血Westmead突變的方法及應(yīng)用
- 多能干細(xì)胞聚集抑制劑
- DJ-1功能喪失的細(xì)胞模型的構(gòu)建方法與應(yīng)用
- 牙髓來源細(xì)胞的制造方法
- 提高抗體表達(dá)量和改良糖基化水平的細(xì)胞培養(yǎng)方法
- 微生態(tài)檢測用試劑盒
- NK細(xì)胞的培養(yǎng)方法及無血清培養(yǎng)基組合
- 一種TIL細(xì)胞體外擴增培養(yǎng)基組合和培養(yǎng)方法
- 一種高活性的細(xì)胞凍存液
- 一種亞硝化細(xì)菌-硝化細(xì)菌-反硝化細(xì)菌的發(fā)酵生產(chǎn)方法
- 一種黨參組培快繁培養(yǎng)基及方法
- 一種細(xì)梗薔薇愈傷組織培養(yǎng)基及其制備方法和應(yīng)用
- 一種類器官的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法
- 一種用于藍(lán)莓莖段組織快繁的培養(yǎng)基及組織快繁方法
- 培養(yǎng)多能干細(xì)胞的方法和設(shè)備
- 多能性決定因子及其應(yīng)用
- 多能干細(xì)胞的增殖方法
- 源自多能干細(xì)胞的褐色脂肪細(xì)胞、源自多能干細(xì)胞的細(xì)胞凝聚物，其制造方法以及細(xì)胞療法、內(nèi)科療法
- 誘導(dǎo)多能干細(xì)胞、制備誘導(dǎo)多能干細(xì)胞的方法
- 一種誘導(dǎo)多能干細(xì)胞分泌素的制備方法及其應(yīng)用
- 由多能干細(xì)胞制造心臟祖細(xì)胞和心肌細(xì)胞的制造方法
- 誘導(dǎo)的多能性干細(xì)胞的評價方法及選擇方法、以及誘導(dǎo)的多能性干細(xì)胞的制備方法
- 多能干細(xì)胞聚集抑制劑
- DJ-1功能喪失的細(xì)胞模型的構(gòu)建方法與應(yīng)用
