[發(fā)明專利]硒化卡拉膠的應用、含有硒化卡拉膠的疫苗劑及其制備方法

在審

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• 申請日: 2018-03-19
• 公開（公告）號: CN108187041A
• 公開（公告）日: 2018-06-22
• 發(fā)明（設計）人: 胡云章;賈森泉;胡凝珠;孫靜;烏美妮;李彥涵;李建芳;施建東
• 申請（專利權）人: 中國醫(yī)學科學院醫(yī)學生物學研究所
• 主分類號: A61K39/39
• 分類號: A61K39/39;A61P37/04
• 代理公司: 昆明正原專利商標代理有限公司 53100
• 代理人: 徐玲菊

本發(fā)明涉及硒化卡拉膠的應用、含有硒化卡拉膠的疫苗劑及其制備方法，所述硒化卡拉膠作為佐劑在疫苗中的用量為：每單份疫苗液中含有0.1～1mg的硒化卡拉膠。本發(fā)明佐劑原料易得，疫苗制備工藝簡單，成本低，性能穩(wěn)定，毒副作用小，從機體免疫調節(jié)的多個方面共同促進免疫應答，有效提高了免疫應答水平，在免疫劑量范圍內使用是安全可靠的，能夠有效的誘導抗原特異性的體液免疫應答，顯著增強抗原特異性的體液免疫反應，效果優(yōu)于無佐劑，和鋁佐劑組相當。

技術領域

本發(fā)明涉及硒化卡拉膠的應用、含有硒化卡拉膠的疫苗劑及其制備方法，屬于免疫學領域。

背景技術

疫苗作為人類抵抗疾病的武器，從傳統(tǒng)的病毒疫苗到現在的亞單位、DNA疫苗，發(fā)展十分迅速。疫苗佐劑作為增強疫苗免疫效果的物質，隨著疫苗產業(yè)的發(fā)展，對其的研究也越來越受到重要。傳統(tǒng)疫苗佐劑雖然使用廣泛，但仍具有一些局限性和副作用，如鋁佐劑可能導致淋巴疾病和神經毒性，因此研發(fā)新型疫苗佐劑具有重要意義。

多糖物質是地球上最豐富的生物大分子物質之一，有許多研究表明多糖能介導機體炎癥、自生免疫、病原體感染等多種生理病理過程。卡拉膠(carrageenan)是從海藻中提取的天然硫酸多糖，廣泛應用于食品行業(yè)。卡拉膠具有炎癥刺激作用，被用于各種炎癥模型構建，不僅能促進巨噬細胞增殖、增強巨噬細胞吞噬能力、TNF-α分泌，還能通過上調TLR4表達進而激活NF-κB途徑。同時也有研究表明卡拉膠能夠通過與IL-8結合來刺激TLR4-BCL10介導的固有免疫反應。并且已有研究指出對其進行修飾后，其免疫活性更高。卡拉膠還具有抗HIV、HSV等病毒的抗病毒作用。硒位于金屬元素與非金屬元素之間，不僅是營養(yǎng)物質，而且對機體免疫也有重要影響。硒多糖具有抗氧化、抗病毒、抗癌等多種生理特性，且硒化后多糖活性能提高。硒化卡拉膠(Kappa-Selenocarrageenan)是由卡拉膠與無機硒(亞硒酸鈉、亞硒酸、硒粉)通過酸解或酶解化學合成的，一種新型的有機硒化合物，保留并增強了卡拉膠的生物活性。硒化卡拉膠不僅可以作為硒補充劑，還可增強T、B細胞增殖、增強腹腔巨噬細胞釋放的腫瘤壞死因子的活性及增加自然殺傷性細胞(NK細胞)活性，現在也被用于抗HBV病毒、肝癌的治療。目前，尚未出現將硒化卡拉膠用于疫苗佐劑的研究報道。

發(fā)明內容

為解決現有疫苗佐劑存在的價格昂貴、促進免疫應答效果不顯著等問題，本發(fā)明提供硒化卡拉膠在制備疫苗佐劑中的應用，以及提供一種經濟、有效、安全、穩(wěn)定的含有硒化卡拉膠的疫苗劑及其制備方法。

本發(fā)明通過下列技術方案實現：硒化卡拉膠在制備疫苗佐劑中的應用。

所述硒化卡拉膠作為佐劑在疫苗中的用量為：每單份疫苗液中含有0.1～1mg的硒化卡拉膠。

進一步地，作為一個優(yōu)選，所述硒化卡拉膠用量為0.5mg。

本發(fā)明的另一目的還在于提供一種含有硒化卡拉膠的疫苗劑，所述疫苗劑為300μL，由下列組分組成：

單份疫苗液、

硒化卡拉膠0.1～1mg、

生理鹽水為余量。

上述含有硒化卡拉膠的疫苗劑的制備方法，包括如下步驟：

(1)在適量的生理鹽水中加入0.1～1mg的硒化卡拉膠，待硒化卡拉膠完全溶解后得佐劑混合液；

(2)在步驟(1)所得佐劑混合液中加入單份疫苗液得到含佐劑的疫苗液；

(3)在步驟(2)所得含佐劑的疫苗液中加入生理鹽水至300μL，混合均勻，即得含有硒化卡拉膠的疫苗劑。

所述硒化卡拉膠為市購產品或按常規(guī)由卡拉膠與無機硒(亞硒酸鈉、亞硒酸、硒粉)通過酸解或酶解化學合成。硒化卡拉膠為硒化天然硫酸多糖，具有硒元素對免疫系統(tǒng)發(fā)育的促進和卡拉膠多糖對免疫反應反應的促進。