[發明專利]一種提高發酵產物中納豆激酶及抗氧化物質產量的方法

在審

• 申請號: 201810225335.1
• 申請日: 2018-03-19
• 公開（公告）號: CN108359693A
• 公開（公告）日: 2018-08-03
• 發明（設計）人: 林戀竹;趙謀明;鄒穎;蘇國萬
• 申請（專利權）人: 華南理工大學
• 主分類號: C12P1/04
• 分類號: C12P1/04;C12R1/125
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 何淑珍;馮振寧

本發明公開了一種提高發酵產物中納豆激酶及抗氧化物質產量的方法。以蕎麥為原料，通過常溫浸泡、加水打漿、高壓均質制備蕎麥勻漿液，聯合耐高溫α?淀粉酶處理，獲得以蕎麥為底物的發酵培養基。采用酶法制備大豆蛋白酶解產物，作為補充氮源添加至發酵培養基中，滅菌后，接種納豆菌，控制液態發酵條件，制備具有高納豆激酶活性、富含谷物多酚且具有強抗氧化活性的發酵產物。本發明工藝操作簡單、生產成本低、無污染，所得發酵產物中，納豆激酶活力>150FU/mL，總酚含量>100mg/L，抗氧化物質含量>25000μmol trolox equiv/L，大大提高了納豆菌液態發酵產納豆激酶活力以及發酵產物中總酚、抗氧化物質含量。

技術領域

本發明屬于微生物發酵領域，具體涉及一種提高發酵產物中納豆激酶及抗氧化物質產量的方法。

背景技術

納豆激酶(nattokinase簡稱NK)是一種在納豆發酵過程中由納豆菌(Bacillusnatto)或納豆枯草桿菌(B.subtilis natto)產生的絲氨酸蛋白酶。納豆激酶具有高效溶血栓作用，開發前景相當廣闊。近年來依靠枯草芽孢桿菌液體發酵生產納豆激酶已經成為趨勢。選擇廉價的發酵底物，并對發酵培養基及發酵條件進行優化以實現發酵底物的高效利用，是降低納豆激酶生產成本的重要途徑。蕎麥含有豐富的碳水化合物、蛋白質、維生素、膳食纖維、礦物元素等營養成分。黃酮類化合物如蘆丁，是蕎麥最為重要的生物活性物質之一，具有很強的抗氧化活性，對預防心血管疾病，調節血糖、血脂具有顯著效果。采用納豆菌液態發酵蕎麥，生產具有高納豆激酶活性、富含谷物多酚且具有強抗氧化活性的發酵產物具有很強的社會經濟價值。

肽類物質對于微生物而言是極具價值的氮源，甚至優于游離氨基酸，對于某些微生物甚至起到生長因子的重要作用，具有促進其生長發育和活躍新陳代謝的作用。枯草芽孢桿菌液體發酵培養基多使用蛋白胨作為氮源，但蛋白胨成本較高，且無商品化的食品級蛋白胨。以大豆蛋白為原料，采用食品級蛋白酶酶法制備大豆蛋白酶解物具有綠色、安全的特點，可以取代國內發酵工業中所用的價格高昂的蛋白胨類產品，達到降低成本提高經濟效益的目的。

發明內容

本發明的目的在于提供一種提高發酵產物中納豆激酶及抗氧化物質產量的方法。該方法以蕎麥為原料，通過常溫浸泡、加水打漿、高壓均質制備蕎麥勻漿液，聯合耐高溫α-淀粉酶的前處理方法，獲得以蕎麥為底物的發酵培養基。采用酶法制備大豆蛋白酶解產物，作為補充氮源添加至發酵培養基，滅菌后，接種納豆菌，控制液態發酵條件，制備具有高納豆激酶活性、富含谷物多酚且具有強抗氧化活性的發酵產物。

本發明工藝操作簡單、生產成本低、無污染，所得發酵產物中，納豆激酶活力>150FU/mL，總酚含量>100mg/L，抗氧化物質含量>25000μmol trolox equiv/L，大大提高了納豆菌液態發酵產納豆激酶活力以及發酵產物中總酚、抗氧化物質含量。

本發明的目的通過如下技術方案實現。

一種提高發酵產物中納豆激酶及抗氧化物質產量的方法，以蕎麥為原料，通過常溫浸泡、加水打漿、高壓均質制備蕎麥勻漿液，聯合耐高溫α-淀粉酶的前處理方法，獲得以蕎麥為底物的發酵培養基。采用酶法制備大豆蛋白酶解產物，作為補充氮源添加至發酵培養基，滅菌后，接種納豆菌，控制液態發酵條件，制備具有高納豆激酶活性、富含谷物多酚且具有強抗氧化活性的發酵產物，具體包括如下步驟：

(1)常溫浸泡：取干蕎麥，加入水，浸泡后瀝干多余水分；

(2)加水打漿、高壓均質：取步驟(1)所得濕蕎麥，加入水，高速剪切后過膠體磨，再進行高壓均質，得到蕎麥勻漿液；

(3)耐高溫α-淀粉酶處理：加熱步驟(2)所得蕎麥勻漿液后，加入耐高溫α-淀粉酶，高溫酶解結束后，再次加入水，勻速攪拌，獲得以蕎麥為底物的發酵培養基；