[發(fā)明專利]一種基于拉曼全譜分析的無損快速膽維丁含量定量方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810219592.4
• 申請(qǐng)日: 2018-03-16
• 公開（公告）號(hào): CN108802000A
• 公開（公告）日: 2018-11-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃梅珍;徐薈迪;林露璐;徐永浩
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海交通大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N21/65
• 分類號(hào): G01N21/65
• 代理公司: 上海恒慧知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 31317
• 代理人: 徐紅銀

本發(fā)明提供一種基于拉曼全譜分析的無損快速膽維丁含量定量方法，其中：步驟1，將膽固醇和維生素混合物與膽維丁配制成不同質(zhì)量百分比含量膽維丁的樣品；步驟2，通過拉曼光譜儀測(cè)量上述不同含量膽維丁樣品的光譜信號(hào)，經(jīng)過預(yù)處理后得到拉曼光譜數(shù)據(jù)；步驟3，采用多元統(tǒng)計(jì)分析方法對(duì)預(yù)處理后的拉曼光譜全譜數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理建立定量分析模型；步驟4，利用已建立的定量分析模型對(duì)未知含量的被測(cè)樣品進(jìn)行膽維丁定量分析。本發(fā)明有效得解決了膽維丁樣品拉曼譜峰偏移對(duì)定量測(cè)量精度的影響；本發(fā)明預(yù)測(cè)分析模型，對(duì)不同含量的膽維丁樣品實(shí)現(xiàn)預(yù)測(cè)，結(jié)果證明了基于拉曼光譜的全譜分析法在膽維丁含量定量分析中的有效性。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種膽維丁含量定量方法，具體地，涉及一種基于拉曼全譜分析的無損快速膽維丁含量定量方法。

背景技術(shù)

膽維丁是預(yù)防和治療佝僂病的安全有效的臨床常用藥物，具有促進(jìn)鈣、磷吸收利用和促進(jìn)骨正常鈣化的作用，其療效與肌肉注射維生素D相當(dāng)。為了保證療效，必須在膽維丁藥物的生產(chǎn)過程和成品質(zhì)量控制中檢測(cè)膽維丁成分含量，研究無損快速膽維丁含量定量的方法具有重要的意義。

膽維丁原料為晶體，目前僅有少數(shù)文獻(xiàn)報(bào)道其由維生素D₃與膽固醇通過氫鍵結(jié)合形成等摩爾分子加成物，但尚未對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行深入研究。膽維丁由維生素D₃和膽固醇組成，其結(jié)構(gòu)是由維生素D₃與膽固醇在羥基上形成等摩爾非共價(jià)鍵(氫鍵)結(jié)合物，化學(xué)反應(yīng)式為：

氫鍵鍵能最大約為200kJ/mol，一般為5-30kJ/mol，比一般的共價(jià)鍵、離子鍵和金屬鍵鍵能更小，但強(qiáng)于靜電引力。由于氫鍵不穩(wěn)定，膽維丁也可分解成游離維生素D₃和膽固醇。因此，維生素D₃和膽固醇既是起始原料，也是降解雜質(zhì)。

現(xiàn)有的液相方法無法區(qū)分游離的維生素D₃和游離的膽固醇，藥典標(biāo)準(zhǔn)和目前藥廠自擬的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)均沒有對(duì)游離的膽固醇和維生素D₃作為雜質(zhì)進(jìn)行控制，現(xiàn)有的含量檢測(cè)方法所測(cè)結(jié)果還包括其中的游離態(tài)的維生素D₃和膽固醇，無法準(zhǔn)確測(cè)出膽維丁的真正含量。

另一方面，常用的結(jié)構(gòu)確證手段如紅外光譜、紫外吸收光譜、核磁共振、質(zhì)譜以及元素分析等無法說明膽維丁的物質(zhì)基礎(chǔ)，無法證明氫鍵的存在。

經(jīng)檢索，目前僅上海上藥信誼藥廠有限公司藥物研究所通過差式掃描量熱分析、拉曼光譜及粉末X射線衍射發(fā)現(xiàn)了膽維丁原料中存在共晶現(xiàn)象，并對(duì)其進(jìn)行了表征，采用粉末X射線衍射建立了共晶與游離態(tài)維生素D₃和膽固醇含量的定量分析方法，其對(duì)應(yīng)申請(qǐng)的專利申請(qǐng)?zhí)枮?01510106721.5，其步驟為：

(1)提供不同膽維丁含量的膽維丁、膽固醇和維生素D3的標(biāo)準(zhǔn)混合物；

(2)提供上述標(biāo)準(zhǔn)混合物的X衍射光譜；

(3)基于上述標(biāo)準(zhǔn)混合物的膽維丁含量以及X衍射光譜中2θ＝4.0°或8.0°的衍射峰高度或面積提供線性回歸方程；

(4)提供膽維丁、膽固醇和維生素D₃的混合物的X衍射光譜；以及

(5)基于所述線性回歸方程和膽維丁、膽固醇和維生素D3的混合物的X衍射光譜中2θ＝4.0°或8.0°的衍射峰高度或面積確定膽維丁的含量。