[發(fā)明專利]一種基于示差檢測器測定牛磺酸含量的高效液相色譜法

在審

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• 申請日: 2018-03-13
• 公開（公告）號: CN108490087A
• 公開（公告）日: 2018-09-04
• 發(fā)明（設計）人: 王麗霞;仵淑紅
• 申請（專利權）人: 北京市東城區(qū)食品藥品安全監(jiān)控中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京東方芊悅知識產權代理事務所(普通合伙) 11591
• 代理人: 彭秀麗

本發(fā)明屬于藥物分析技術領域，具體涉及一種基于示差折光檢測器測定牛磺酸顆粒或牛磺酸滴眼液中牛磺酸含量的高效液相色譜方法。本發(fā)明所述基于示差折光檢測器測定牛磺酸含量的高效液相色譜法，將高效液相色譜與示差折光檢測器結合，建立直接測定牛磺酸含量的高效液相色譜示差檢測器方法，以NH₂柱為分離柱，以示差折光顯示器進行檢測，整個檢測過程，無需使用載氣，無需對牛磺酸進行衍生處理，且無中間反應過程，線性范圍寬，能夠簡便、快速、準確的直接測定牛磺酸含量，該方法可實現(xiàn)牛磺酸顆粒和牛磺酸滴眼液中牛磺酸含量的測定。

技術領域

本發(fā)明屬于藥物分析技術領域，具體涉及一種基于示差折光檢測器測 定牛磺酸顆粒或牛磺酸滴眼液中牛磺酸含量的高效液相色譜方法。

背景技術

牛磺酸(Taurine)，又稱β-氨基乙磺酸，分子式為C₂H₇NO₃S，分子量 125.15，是一種含硫的非蛋白氨基酸，最早由牛黃中分離出來。牛磺酸分子 小，不具有苯基類基團，化學性質穩(wěn)定，不溶于乙醚等有機溶劑，在體內 以游離狀態(tài)存在，不參與體內蛋白的生物合成，但它卻與胱氨酸、半胱氨 酸的代謝密切相關，是人及動物的重要營養(yǎng)物質。它以游離形式存在于哺 乳動物幾乎所有的臟器中，在中樞神經系統(tǒng)中含量尤其豐富。牛磺酸具有 重要的生理作用，具有調節(jié)神經系統(tǒng)興奮性、解熱、鎮(zhèn)痛，退燒、增強人 體抵抗力等作用，能促進大腦細胞發(fā)育、提高免疫力、緩解疲勞、調節(jié)神 經傳導；此外，牛磺酸還具有重要的藥理作用，具有消炎、解熱、鎮(zhèn)痛、 抗病毒之功效。牛磺酸顆粒是一種可用于緩解感冒初期發(fā)熱的常用藥物， 牛磺酸滴眼液可用于牛磺酸代謝失調引起的白內障疾病治療。為有效控制 牛磺酸顆粒或牛磺酸滴眼液等牛磺酸制劑質量，有必要開發(fā)一種準確、方 便和有效的牛磺酸含量測定方法。

《中國藥典》2015年版收載的牛磺酸原料藥含量測定方法采用電位滴 定法；受限于牛磺酸紫外吸收度的限制，《中國藥典》2015年版收載的牛 磺酸顆粒和牛磺酸滴眼液中的牛磺酸含量測定方法，均采用了在高效液相 中色譜柱后反應管內，以鄰苯二甲醛對牛磺酸衍生化，利用衍生物中苯基 的紫外特征，用紫外檢測器檢測法間接測定牛磺酸的含量，該方法不僅需 要高效液相色譜中配備反應管，對設備要求較高，同時操作比較繁瑣，對 反應過程，反應轉化率難以有直觀的判斷，影響牛磺酸含量的準確性。國 家藥品標準新藥轉正標準第42冊收載的復方牛磺酸滴眼液質量標準中，采 用苯乙稀共聚體與磺基(Ca-配位)結合的凝膠為填充劑，水-乙腈(3：2) 為流動相，內消旋肌醇為內標物的高效液相色譜-示差折光檢測器法，該方 法是在外標法的基礎上，在樣品和對照品里溶液中分別加入內消旋肌醇內標 物，通過對比內標物的峰面積或峰高的變化相對值得出樣品中牛磺酸的含 量。但該方法相對外標法操作程序較為麻煩，要求分析時內標物和試樣都 要準確稱量，通常用于體系不穩(wěn)定，操作條件變化誤差大，或氣相色譜中 載氣進樣體積難以掌握的情況，通過引入內標物消除體系的誤差，以達到 其精確度滿足檢驗要求。

近年來，文獻報道了不同的牛磺酸的含量測定方法，主要有乙酰丙酮 顯色反應后分光光度法、高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測法、質譜法等。電 位滴定法通常適用于不含干擾物質或雜質較少的原料藥樣品的測定，乙酰 丙酮顯色反應后分光光度法，同樣需要顯色反應，操作繁瑣，對反應過程， 反應轉化率難以有直觀的判斷，影響牛磺酸測定的準確性；高效液相色譜- 蒸發(fā)光散射檢測法原理是先將柱洗脫液霧化形成氣溶膠，然后在加熱的漂移管中將溶劑蒸發(fā)，最后余下的不揮發(fā)性溶質顆粒在光散射檢測池中得到 檢測，需要高壓氮氣或空氣作為載氣，使用不便，載氣穩(wěn)定性，霧化過程， 待測樣品的熱穩(wěn)定性都會影響測量的準確性；質譜法特異性強，準確度高， 但是費用昂貴，儀器操作復雜，常用于物質純度、結構或未知樣品的定性 或定量，但是其用于常規(guī)已知樣品的日常檢驗，儀器使用成本及檢驗時間 成本相對較高，不利于常規(guī)檢驗室檢驗成本的節(jié)約和檢驗效率的提高。