[發明專利]一種廣譜抑菌活性的貝萊斯芽孢桿菌HNt7及制備方法和應用

有效

• 申請號: 201810202569.4
• 申請日: 2018-03-13
• 公開（公告）號: CN108330089B
• 公開（公告）日: 2019-12-24
• 發明（設計）人: 徐文興;趙梓茜;郭大勇;尤華鋒;王利平;洪霓;王國平
• 申請（專利權）人: 華中農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/02;A01P3/00;C12R1/07
• 代理公司: 42001 武漢宇晨專利事務所
• 代理人: 王敏鋒

本發明公開了一種廣譜抑菌活性的貝萊斯芽孢桿菌HNt7及制備方法和應用，拮抗細菌貝萊斯芽孢桿菌HNt7，編號為CCTCC M 2018022。步驟是：A、無菌環境下挑取貝萊斯芽孢桿菌HNt7菌株單菌落，接種于培養基，調節溫度，振蕩培養；B、每瓶裝發酵液，按照比例加入單菌落菌液，放置在大振幅恒溫冷凍搖床中，振蕩培養；C、拮抗菌的分離：用濃度的酒精浸泡，再用無菌水漂洗，于培養箱中暗培養，將長出來的細菌菌落轉移至新的培養基上劃線分離純化單菌落；D、分離純化后，獲得貝萊斯芽孢桿菌HNt7。該菌在制備治療或預防梨果實腐爛病藥物中的應用。該菌株具有顯著的防病效果，防效達到70.76%以上。經過貝萊斯芽孢桿菌HNt7噴施的梨樹，顯著抑制梨樹提前落葉，有利于增強樹勢。

技術領域

本發明屬于植物病害生物防治技術領域，更具體涉及一種廣譜抑菌活性的貝萊斯芽孢桿菌HNt7，同時還涉及一種廣譜抑菌活性的貝萊斯芽孢桿菌HNt7的制備方法，再涉及一種廣譜抑菌活性的貝萊斯芽孢桿菌HNt7的用途。

背景技術

梨樹銹病由擔子菌門膠銹菌屬梨膠銹菌(Gynmosporangium haraeanum Syd.＝Gynmosporangium asiaticum Miyabe ex Yamada)引起，在中國梨園內發生較為普遍，可以導致葉片和果實脫落，嚴重影響產量。目前中國主要采用化學藥劑進行防治，如代森錳鋅、烯唑醇、三唑酮等，生物防治除了有報道采用梨膠銹菌重寄生菌(葡酒銹生座孢Tuberculina vinosa Sacc.)進行防治外，尚無商品化的生防制劑。長期施用化學農藥可以導致農殘超標，并易使病原菌產生抗藥性，導致防治效果下降。此外，長期、反復和大量使用化學農藥可引起土壤、水體和大氣的污染，同時也殺傷了其他有益微生物，破壞了生態平衡。從植物內篩選利用有益微生物，抑制病原菌的生長進行防病具有顯著的經濟和生態效益。

目前，抗病微生物以芽孢桿菌為主，已經發現具有防病潛力的芽孢桿菌主要包括枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、解淀粉芽孢桿菌(B.amyloliquefaciens)、蠟樣芽孢桿菌(B.cereus)、巨大芽孢桿菌(B.megaterium)、短小芽孢桿菌(B.pumilis)、多粘芽孢桿菌(Paenibacillus polymyxa)、側胞芽孢桿菌(B.laterosporus)、短小芽孢桿菌(B.pumilus)等，但這些芽孢桿菌主要用于防治由曲霉、鐮孢菌、鏈格孢、輪枝孢和腐霉菌引起的作物根部的病害如立枯病、猝倒病、枯萎病、根腐病、莖腐病、立枯病【Kabaluk T,Gazdik K:Directory of Microbial Pesticides for Agricultural Crops in OECDCountries.Agriculture and Agri-Food.http://www4.agr.gc.ca/resources/prod/doc/pmc/pdf/micro_e.pdf 2005,accessed November 2014】，沒有涉及梨樹銹病的防治。