[發明專利]黃芪促生內生菌及其促生長方法與應用

有效

• 申請號: 201810199611.1
• 申請日: 2018-03-12
• 公開（公告）號: CN108467839B
• 公開（公告）日: 2021-09-28
• 發明（設計）人: 孫海峰;孔留利;高紅;柴智;郭蘭萍;高建平
• 申請（專利權）人: 山西大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/02;A01P21/00;C12R1/01;C12R1/38
• 代理公司: 太原晉科知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 14110
• 代理人: 王瑞玲

1.一種促進黃芪促生內生菌生長的方法，其特征在于：所述黃芪促生內生菌為含1-氨基環丙烷-1-羧酸脫氨酶即ACC脫氨酶的內生菌菌株：鞘氨醇桿菌（Sphingobacterium sp.）菌株KSC01和草假單胞菌（Pseudomonas poae）菌株KSC02；兩菌株于2017年11月21日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號分別為：CGMCC No.14945、CGMCCNo.14946，菌種來源于黃芪鮮藥材；

黃芪促生內生菌的分離方法為：以5年生黃芪鮮根為材料，采用組織塊分離培養法從黃芪鮮根中分離黃芪內生菌，在加入ACC的DF鹽固體培養基上，連續培養5次，均可以生長的菌株即為含ACC脫氨酶活性的菌株；用不含(NH₄)₂SO₄的 DF 鹽固體培養基連續傳代5次，仍能生長的菌株，具有固氮活性；牛肉膏蛋白胨液體培養基中添加色氨酸的過夜培養物，與Salkowski反應液定性判斷菌株分泌植物生長激素—吲哚乙酸；LB固體培養基連續傳代培養5次，確定菌株產色素穩定性；參照《常見細菌系統鑒定手冊》進行菌株形態學、運動性、耐鹽度、耐受酸堿度及接觸酶實驗；16SrRNA結合形態學特征進行菌株鑒定，并保存菌種；其中分離純化所得的內生菌分別為鞘氨醇桿菌（Sphingobacterium sp）菌株KSC01和草假單胞菌（Pseudomonas poae）菌株KSC02；

促進黃芪促生內生菌生長的具體方法為：培養基中添加濃度為2～10μM的E-2-己烯醛促進鞘氨醇桿菌菌株KSC01的生長、添加濃度為5～625μM的正己醇促進鞘氨醇桿菌（Sphingobacterium sp）菌株KSC01的生長、添加濃度為25～625μM的正己醇促進草假單胞菌（Pseudomonas poae）菌株KSC02的生長。

2.權利要求1所述的促進黃芪促生內生菌生長的方法在增強黃芪脅迫條件生長中的應用。