[發(fā)明專(zhuān)利]一種低溫α-淀粉酶Tcamy及其基因和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810198358.8
• 申請(qǐng)日: 2018-03-12
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108588056B
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-03-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 羅會(huì)穎;涂濤;姚斌;郭玉杰;楊雄震;王亞茹;黃火清;王苑;柏映國(guó);蘇小運(yùn);孟昆
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所
• 主分類(lèi)號(hào): C12N9/26
• 分類(lèi)號(hào): C12N9/26;C12N15/56;C12N15/70;C12N15/74;C12N15/81;C12N15/75;C12N1/21;C12N1/19
• 代理公司: 北京法信智言知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11737
• 代理人: 劉靜榮

本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種來(lái)源于真菌的低溫α?淀粉酶Tcamy及其基因和應(yīng)用。其氨基酸序列如SEQ ID NO.1或2所示。該淀粉酶Tcamy最適pH為5.0，在pH5.0?pH10.0范圍內(nèi)，該酶能夠維持其50％以上的酶活力，這說(shuō)明此酶具有很好的pH穩(wěn)定性。其最適溫度35℃，在0℃下保持有27％的活性；當(dāng)熱處理溫度超過(guò)其最適溫度之后，酶活驟降,為典型的低溫α?淀粉酶。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種低溫α-淀粉酶Tcamy及其基因和應(yīng)用。

背景技術(shù)

淀粉酶是一種用途極為廣泛的生物催化劑，可應(yīng)用于面包制作業(yè)、淀粉的糖化和液化、紡織品脫漿、造紙、清潔劑工業(yè)、化學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)的分析和制藥業(yè)等。淀粉酶家族包括α-淀粉酶、β-淀粉酶和葡萄糖淀粉酶。α-淀粉酶為內(nèi)切酶，以無(wú)規(guī)則的方式切開(kāi)淀粉分子內(nèi)部的α-1，4糖苷鍵，而使淀粉生成糊精和低聚糖，是一種鈣離子依賴(lài)性酶。

α-淀粉酶(EC.3.2.1.1)屬于糖苷水解酶13家族，能夠作用于可溶性淀粉、糖元、直鏈淀粉等α-1,4-葡聚糖，其水解淀粉的主要產(chǎn)物是一些由葡萄糖單位組成的低聚糖和糊精的混合物。根據(jù)淀粉酶催化活性的最適作用溫度不同，可將淀粉酶分為低溫、中溫和高溫淀粉酶。低溫淀粉酶在生物技術(shù)和工業(yè)應(yīng)用中具有廣泛的吸引力，低溫淀粉酶在低溫和中溫下具有較高的催化活性，它意味著在工業(yè)生產(chǎn)過(guò)程有著中更少的能量消耗。在烘焙行業(yè)中，α-淀粉酶被用來(lái)改善面包的柔軟性和體積，在此之后需要酶完全失活，這可以用熱不穩(wěn)定的低溫淀粉酶來(lái)完成而不影響產(chǎn)品品質(zhì)。作為洗滌劑的添加劑而言，低溫淀粉酶不僅能在低水溫環(huán)境中高效發(fā)揮作用，而且排放后對(duì)環(huán)境危害小。另外，應(yīng)用低溫淀粉酶來(lái)進(jìn)行廢水處理和生物修復(fù)也是未來(lái)的研究熱點(diǎn)。

本發(fā)明從Thermoascus crustaceus JCM12803菌株中得到了一個(gè)新的低溫α-淀粉酶基因Tcamy，其編碼的低溫α-淀粉酶具有以下幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)：低溫下催化活性高、廣泛的pH穩(wěn)定性。所有這些優(yōu)點(diǎn)都意味著新發(fā)明的低溫淀粉酶在飼料、食品、醫(yī)藥等行業(yè)中，將會(huì)比之前報(bào)道的淀粉酶更有應(yīng)用價(jià)值。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種能高效應(yīng)用的低溫α-淀粉酶。

本發(fā)明的再一目的是提供編碼上述低溫α-淀粉酶的基因。

本發(fā)明的另一目的是提供包含上述基因的重組載體。

本發(fā)明的另一目的是提供包含上述基因的重組菌株。

本發(fā)明的另一目的是提供一種制備上述低溫α-淀粉酶的基因工程方法。

本發(fā)明從Thermoascus crustaceus JCM12803中分離得到一種低溫α-淀粉酶Tcamy，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。