[發明專利]一種肝癌細胞靶向抗菌肽嵌合體M27-39-HTPP及其應用

有效

• 申請號: 201810196235.0
• 申請日: 2018-03-09
• 公開（公告）號: CN108530544B
• 公開（公告）日: 2021-10-22
• 發明（設計）人: 盧雪梅;陳朝霞;桂水清;張倫;劉阿龍;唐亞男;汪潔;劉文彬;金小寶;朱家勇
• 申請（專利權）人: 廣東藥科大學
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;A61K38/17;A61P35/00
• 代理公司: 廣州科沃園專利代理有限公司 44416
• 代理人: 張帥

本發明公開了一種肝癌細胞靶向抗菌肽嵌合體M27?39?HTPP及其應用，該肝癌細胞靶向抗菌肽嵌合體M27?39?HTPP由Musca domestica cecropin的第27～39位融合肝靶向穿膜肽HTPP而得，氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本發明采用固相化學合成法獲得M27?39?HTPP靶向抗菌肽嵌合體粗品，并使用反相高效液相色譜和電噴射質譜法對合成的多肽進行純化和鑒定。該肝靶向M27?39?HTPP具有靶向抗肝癌作用，在醫學和生物制藥領域，尤其是抗肝癌藥物的制備領域具有較大的實際意義和廣闊的應用前景。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體涉及一種肝癌細胞靶向抗菌肽嵌合體M27-39-HTPP及其應用。

背景技術

目前對肝癌的預防和治療仍缺乏有效藥物，以靶向分子為載體，攜帶抗癌藥物為彈頭的生物靶向治療，是近20年以來肝癌研究的熱點課題，具有較大的社會和經濟意義。

肝靶向穿膜肽(hepatocyte-targeting and penetrating peptide，HTPP)來源于瘧原蟲環子孢子蛋白(circumsporozoite protein,CSP)保守I區上游，研究顯示HTPP不僅含有硫酸肝素結合序列，可特異性結合肝細胞表面的受體—硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(heparan sulfateproteoglycans，HSPG)，還含有一個PELEX/VTS基序，能夠有效穿透細胞膜，介導CSP進入細胞內部，實現細胞亞定位。HSPG是由核蛋白分子和糖胺聚糖(gly-cosaminoglycan，GAG)通過糖苷鍵共價結合組成的復合大分子，研究顯示肝臟的HSPG具有獨特的GAG鏈，其硫酸化程度顯著高于其它組織，此外，肝癌組織中HSPG表達與正常肝組織有顯著差異，且表達水平與癌細胞轉移潛能成正比。因此，HTPP不僅可作為肝靶向分子，將藥物富集肝臟，還可以干擾HSPG受體功能，抑制腫瘤轉移。

抗菌肽(Antimicrobial peptides,AMP)是生物免疫系統產生的一類抵抗外界病原體感染的小分子多肽，具有一系列引人注目的生物學活性，包括抗菌、抗炎、抗病毒、抗寄生蟲、抑制腫瘤細胞及免疫調節活性等。抗菌肽能夠破壞細菌細胞膜或穿過細胞膜作用于胞內靶位點，作用機制獨特，不易產生耐藥性，對正常人體細胞毒、副作用小。因此，在傳統抗菌、抗病毒和抗腫瘤藥物研發和臨床效果不盡如人意的現今，抗菌肽的上述特點使其顯示出了良好的應用開發前景。Musca domestica cecropin是廣東藥科大學/廣東省生物活性藥物研究重點實驗室從家蠅幼蟲脂肪體cDNAf文庫中克隆的一種昆蟲抗菌肽，該基因的ORF區全長為192bp，可編碼63個氨基酸的前體蛋白，1～23位氨基酸是以保守4肽結尾的信號肽，其成熟肽含有40個氨基酸，具有較強的抗菌和抗腫瘤活性，并且我們在前期基礎上，進一步研究發現衍生肽M27-39與天然Musca domestica cecropin相比，不僅在抗腫瘤方面具有更顯著優異的生理活性，且相較天然Musca domestica cecropin相比分子更小，更易進入胞內。

目前沒有相關研究報道將Musca domestica cecropin衍生肽M27-39與HTPP進行改造，構建具有肝癌細胞靶向作用的嵌合體，用于制備靶向抗肝癌藥物中的應用。

發明內容

為解決現有技術存在的問題，本發明的目的在于提供一種肝癌細胞靶向抗菌肽嵌合體M27-39-HTPP。

本發明的另一個目的在于提供所述的肝癌細胞靶向抗菌肽嵌合體M27-39-HTPP在制備靶向抗肝癌藥物中的應用。

為了實現上述目的，本發明是通過以下技術方案予以實現的：

本發明肝癌細胞靶向抗菌肽嵌合體M27-39-HTPP，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

具體地，所述的SEQ ID NO:1為VAQQAANVAATLKNSRSLGENDDGNNEDNEKLR。