[發(fā)明專(zhuān)利]一種清除鴨膽汁中異熊去氧膽酸的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810192425.5
• 申請(qǐng)日: 2018-03-09
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108299538B
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-06-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄧家國(guó);雷平;蔡宏軍;李國(guó)軍
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 常德云港生物科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C07J9/00
• 分類(lèi)號(hào): C07J9/00
• 代理公司: 常德市長(zhǎng)城專(zhuān)利事務(wù)所(普通合伙) 43204
• 代理人: 游先春

本發(fā)明公開(kāi)了一種清除鴨膽汁中異熊去氧膽酸的方法，包括鵝去氧膽酸粗品制備、結(jié)晶液的制備、析晶得鵝去氧膽酸結(jié)晶液、鵝去氧膽酸純品的制備等工藝步驟。通過(guò)本發(fā)明方法，既能提純鴨膽汁中的鵝去氧膽酸，又能分離出具有藥學(xué)價(jià)值的異熊去氧膽酸，最大程度地提高了膽汁酸資源的利用率。且本發(fā)明方法產(chǎn)生的下腳料少，能夠通過(guò)萃取循環(huán)利用，很大程度上減少了膽汁酸資源的流失。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物工程技術(shù)領(lǐng)域，具體地涉及一種清除鴨膽汁中異熊去氧膽酸的方法。

背景技術(shù)

人們對(duì)膽酸類(lèi)化合物的研究有著較長(zhǎng)的歷史，在生物化學(xué)快速發(fā)展的推動(dòng)下，對(duì)膽酸類(lèi)化合物的研究也在不斷的深入。鵝去氧膽酸是目前世界上用量最大的治療膽結(jié)石的藥物之一，又是合成熊去氧膽酸的主要原料，在鵝去氧膽酸和熊去氧膽酸的市場(chǎng)需求量不斷快速增長(zhǎng)的情況下，為了拓寬其原料的來(lái)源，人們開(kāi)始從低成本、原料易得的鴨膽汁中提取鵝去氧膽酸，以獲得更多的制備熊去氧膽酸的原料。

加工過(guò)程中，為了使鵝去氧膽酸的提取純度更高，人們采用了多種方法去除鴨膽汁中的別膽酸雜質(zhì)，然而效果并不顯著。經(jīng)過(guò)多年研究發(fā)現(xiàn)，鴨膽汁中還存在一種叫做異熊去氧膽酸的雜質(zhì)，該雜質(zhì)的含量一般在7-8%之間，僅次于鴨膽汁中別膽酸雜質(zhì)的含量，同樣屬于提純鵝去氧膽酸時(shí)最不好清除的雜質(zhì)，這必將影響鵝去氧膽酸制備熊去氧膽酸時(shí)的轉(zhuǎn)化率。

此外，異熊去氧膽酸是熊去氧膽酸的差向異構(gòu)體，生化分析檢測(cè)人體膽固醇代謝指標(biāo)時(shí)，需采用高純度的異熊去氧膽酸作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，因而異熊去氧膽酸具有重要的生物利用價(jià)值。所以說(shuō)從來(lái)源于鴨膽汁原料的鵝去氧膽酸中清除異熊去氧膽酸，不僅是提純鵝去氧膽酸的又一重要步驟，同時(shí)通過(guò)清除而得到的異熊去氧膽酸還可以用于生產(chǎn)膽汁酸的下游產(chǎn)品。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)上述問(wèn)題，本發(fā)明提供一種清除鴨膽汁中異熊去氧膽酸的方法，其目的是為了在鴨膽汁原料中提取鵝去氧膽酸時(shí)分離異熊去氧膽酸雜質(zhì)，該方法是利用鵝去氧膽酸和異熊去氧膽酸在酯類(lèi)、多元醇和脂肪烴類(lèi)化合物三者特定比例的混合溶劑中，存在的溶解度差異而結(jié)晶析出異熊去氧膽酸，從而實(shí)現(xiàn)鵝去氧膽酸的精制提取。

本發(fā)明的技術(shù)方案：一種清除鴨膽汁中異熊去氧膽酸的方法，其特征在于，工藝步驟如下：

（1）鵝去氧膽酸粗品制備：利用鴨膽汁原料，通過(guò)乙酸丁酯鎂鹽法制得鵝去氧膽酸粗品，粗品的濕重小于0.6%，別膽酸的含量小于1.0%，異熊去氧膽酸的含量大于7%。

（2）結(jié)晶液的制備：在步驟（1）制備的鵝去氧膽酸粗品中，加入粗品6倍量且水份小于1%的乙酸乙酯，以及粗品0.5倍量且純度為99.5%的乙二醇，攪拌加熱至沸，保沸溶解1小時(shí)至粗品完全溶解。靜置1小時(shí)分出下層水相，通過(guò)反應(yīng)釜回流分水器調(diào)節(jié)上層有機(jī)相的水分，使上層有機(jī)相的水分含量小于1.0%；然后將上層有機(jī)相采用常壓濃縮，在濃縮的有機(jī)相中計(jì)量回收加入的乙酸乙酯和乙二醇混合溶劑，回收量為混合溶劑加入量的一半；回收完畢，再次測(cè)定并調(diào)節(jié)有機(jī)相的水分含量為1.0%以下，冷卻至29-30℃，備用。

向上述有機(jī)相中加入步驟（1）中粗品0.003倍量的冰乙酸和0.15倍量的120#汽油，再于28-30℃的溫度條件下攪拌至澄清，測(cè)定并調(diào)節(jié)有機(jī)相的PH值為3.5-4之間、水分含量為1.2-1.5%。加入冰乙酸是為了增加膽汁酸的溶解度，加入脂肪烴類(lèi)化合物120#汽油是為了吸水和降低異熊去氧膽酸的溶解度。

（3）析晶：將步驟（2）制備的結(jié)晶液通過(guò)12-15HZ的變頻攪拌，冷卻至23-25℃，連續(xù)攪拌反應(yīng)10-12小時(shí)，結(jié)晶液由澄清逐漸變?yōu)闇啙幔ㄟ^(guò)嵌入式板框壓濾機(jī)壓濾，得到異熊去氧膽酸的濾渣和鵝去氧膽酸結(jié)晶液。其中，異熊去氧膽酸的濾渣呈淡灰色的絮狀物，經(jīng)檢測(cè)其濕重為29-31%，純度為89-91%。