[發明專利]一種從泡桐花中分離異戊烯基黃酮類化合物的方法及應用

在審

• 申請號: 201810190537.7
• 申請日: 2018-03-08
• 公開（公告）號: CN108409700A
• 公開（公告）日: 2018-08-17
• 發明（設計）人: 鄭曉珂;李苗;張靖柯;李孟;呂錦錦;張志廣;馮衛生
• 申請（專利權）人: 河南中醫藥大學
• 主分類號: C07D311/30
• 分類號: C07D311/30;C07D311/32;C07D311/40;A61P9/00
• 代理公司: 鄭州天陽專利事務所(普通合伙) 41113
• 代理人: 聶永杰

1.一種從泡桐花中分離異戊烯基黃酮類化合物，其特征在于，分子結構式為：

2.權利要求1所述的從泡桐花中分離異戊烯基黃酮類化合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：(1)、制備組分Fr.5-1～Fr.5-5，方法是：

將泡桐花碾壓粉碎，用體積濃度為50％含水丙酮做提取液提取4次，每次提取液用量為泡桐花重量的10倍，提取液濃縮干燥，得第一次干燥物，第一次干燥物先用水分散溶解，再依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，石油醚提取5次，石油醚每次用量是泡桐花重量的二分之一，乙酸乙酯提取8次，乙酸乙酯每次用量是泡桐花重量的二分之一，正丁醇提取8次，正丁醇每次用量是泡桐花重量的二分之一，分別濃縮干燥，依次得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和余下的水部位；乙酸乙酯部位采用重量比1:1硅膠拌樣，進行梯度洗脫，洗脫液為二氯甲烷：甲醇體積比分別為:100:0、100:1、80:1、50:1、20:1、10:1、5:1、1:1、0:100，流速10ml/min，每個部位的流動相用量為柱體積的25倍，每500ml檢識一次，每個梯度流動相的用量以茴香醛-濃硫酸薄層檢識來判斷，7d洗脫完畢，根據薄層檢識得到Fr.1-9九個不同組分，其中組分Fr.5再次以硅膠柱層析，采用二氯甲烷和甲醇作洗脫液進行梯度洗脫，二氯甲烷：甲醇的體積比為30:1、25:1、20:1、15:1、10:1，洗脫流速10ml/min，每個部位的流動相用量為柱體積的10倍，每50ml檢識一次，每個梯度流動相的用量以茴香醛-濃硫酸薄層檢識來判斷，3d洗脫完畢，得到組分Fr.5-1～Fr.5-5；

(2)、制備化合物paulownione D和paulownione E，方法是：

將步驟1得到的組分Fr.5-1用甲醇溶解，通過Sephadex LH-20柱色譜，用甲醇洗脫，流速1.0ml/min，流動相用量為組分Fr.5-1重量的200倍，以茴香醛-濃硫酸薄層檢識，合并150～350ml之間的流份，得組分Fr.5-1-1，(合并351～450ml之間的流份，標為組分Fr.5-1-2)；組分Fr.5-1-1用體積濃度70％的甲醇溶解，通過Toyopearl HW-40色譜柱，再用體積濃度70％甲醇洗脫，流速1.5ml/min，流動相用量為組分Fr.5-1重量的100倍，以茴香醛-濃硫酸薄層檢識，合并150～400ml之間的流份，濃縮干燥得到Fr.5-1-1-1，組分Fr.5-1-1-1用半制備HPLC分離，上規格型號為：250×10mm,粒徑5μm,孔徑12nm的YMC-Pack ODS-AA色譜柱，流動相為乙腈和水，體積比為乙腈：水＝12：88，流速3ml/min，收集保留時間t_R＝25.7min的流份和保留時間t_R＝28.4min的流份，分別濃縮干燥，得到化合物paulownione D和paulownione E；

(3)、制備化合物paulownione F和化合物paulownione G，方法是：

將步驟1制備的組分Fr.5-3用體積濃度70％甲醇溶解，通過Toyopearl HW-40柱色譜，用體積濃度為70％的甲醇作流動相洗脫，流速1.5ml/min，流動相用量為組分Fr.5-3重量的100倍，以茴香醛-濃硫酸薄層檢識，合并150-350ml之間的流份，得組分Fr.5-3-1，合并351-500ml之間的流份，得組分Fr.5-3-2，合并501-800ml之間的流份，得組分Fr.5-3-3；組分Fr.5-3-2用ODS柱拌樣，組分Fr.5-3-2與ODS柱重量比為1:1，通過ODS柱色譜，依次用水、體積濃度為10％、20％、30％、40％甲醇梯度洗脫，流速3ml/min，以茴香醛-濃硫酸薄層檢識來判斷洗脫終點，每20ml檢識一次，2d洗脫完畢，合并30％甲醇洗脫流分，得組分Fr.5-3-2-1；用半制備HPLC分離，上規格型號為：250×10mm,粒徑5μm,孔徑12nm的YMC-Pack ODS-AA色譜柱，流動相為體積比的乙腈：水＝20：80，流速3ml/min，收集保留時間t_R＝31.9min的流份，濃縮干燥，得到化合物paulownione F；合并40％甲醇洗脫流分，得組分Fr.5-3-2-2，用半制備HPLC分離，上規格型號為：250×20mm，粒徑5μm，孔徑12nm的YMC-Pack ODS-AA色譜柱，流動相為體積比的甲醇：水＝37：63，流速3ml/min，收集保留時間t_R＝19.8～23.5min的流份，濃縮干燥，得組分Fr.5-3-2-2-1；組分Fr.5-3-2-2-1通過半制備HPLC，上規格型號為：250×10mm,粒徑5μm,孔徑12nm的YMC-Pack ODS-AA色譜柱，流動相為體積比的乙腈：水＝17：83，流速3ml/min，收集保留時間t_R＝45.6min的流份，濃縮干燥，得到化合物paulownione G。