[發(fā)明專利]一種帶血管網(wǎng)的人工肌組織及其制備方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810184818.1
• 申請(qǐng)日: 2018-03-06
• 公開（公告）號(hào): CN108434525A
• 公開（公告）日: 2018-08-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 連芩;周李念;李滌塵;何曉寧;焦天;徐峰
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 西安交通大學(xué)
• 主分類號(hào): A61L27/38
• 分類號(hào): A61L27/38;A61L27/20;A61L27/22;B33Y10/00;B33Y70/00;B33Y80/00
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責(zé)任公司 61200
• 代理人: 徐文權(quán)

1.一種帶血管網(wǎng)的人工肌組織，其特征在于，包括若干依次相連接的人工肌組織本體，各人工肌組織本體均包括血管網(wǎng)結(jié)構(gòu)(1)以及設(shè)置于血管網(wǎng)結(jié)構(gòu)(1)上且與血管網(wǎng)結(jié)構(gòu)(1)平行分布的若干組肌細(xì)胞束(2)，各組肌細(xì)胞束(2)依次分布且相鄰組肌細(xì)胞束(2)之間有間隙，每組肌細(xì)胞束(2)內(nèi)的各肌細(xì)胞束(2)呈線性排列，各組肌細(xì)胞束(2)上均設(shè)置有若干內(nèi)皮細(xì)胞束(3)，各內(nèi)皮細(xì)胞束(3)與與其對(duì)應(yīng)組肌細(xì)胞束(2)內(nèi)的各肌細(xì)胞束(2)相交。

2.一種權(quán)利要求1所述的帶血管網(wǎng)的人工肌組織的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)繪制帶血管網(wǎng)的人工肌組織模型，然后將繪制得到的帶血管網(wǎng)的人工肌組織模型導(dǎo)入到3D打印設(shè)備中；

2)配制用于血管網(wǎng)結(jié)構(gòu)(1)打印的細(xì)胞懸液A、用于內(nèi)皮細(xì)胞束(3)打印的細(xì)胞懸液B及用于肌細(xì)胞束(2)打印的細(xì)胞懸液C；

3)將交聯(lián)劑與步驟2)配置的細(xì)胞懸液A分別置于3D打印設(shè)備中注射泵上不同的注射器中，再將細(xì)胞懸液B及細(xì)胞懸液C分別置于3D打印設(shè)備中不同的點(diǎn)膠針筒中；3D打印設(shè)備根據(jù)步驟1)繪制的帶血管網(wǎng)的人工肌組織模型進(jìn)行打印，打印完成后利用交聯(lián)劑進(jìn)行交聯(lián)，得帶血管網(wǎng)人工肌組織模型實(shí)體；

4)對(duì)步驟3)得到的帶血管網(wǎng)人工肌組織模型實(shí)體進(jìn)行體外動(dòng)態(tài)培養(yǎng)，實(shí)現(xiàn)多細(xì)胞的共同培養(yǎng)，得帶血管網(wǎng)的人工肌組織。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的所述的帶血管網(wǎng)的人工肌組織的制備方法，其特征在于，細(xì)胞懸液A為內(nèi)皮細(xì)胞及海藻酸鈉溶液的混合溶液，其中，細(xì)胞懸液A中內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞密度為1×10⁶個(gè)/ml，海藻酸鈉溶液中海藻酸鈉的質(zhì)量濃度為3％。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的所述的帶血管網(wǎng)的人工肌組織的制備方法，其特征在于，細(xì)胞懸液B為內(nèi)皮細(xì)胞與明膠-海藻酸鈉混合水凝膠的混合溶液，其中，細(xì)胞懸液B中內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞密度為1×10⁶個(gè)/ml，明膠-海藻酸鈉混合水凝膠中明膠及海藻酸鈉的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為5％和6％。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的所述的帶血管網(wǎng)的人工肌組織的制備方法，其特征在于，細(xì)胞懸液C為肌細(xì)胞與明膠-海藻酸鈉混合水凝膠的混合溶液，細(xì)胞懸液C中肌細(xì)胞的細(xì)胞密度為1×10⁶個(gè)/ml，明膠-海藻酸鈉混合水凝膠中明膠及海藻酸鈉的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為5％和6％。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的所述的帶血管網(wǎng)的人工肌組織的制備方法，其特征在于，細(xì)胞懸液A及交聯(lián)劑由注射泵作為壓力裝置通過同軸噴頭進(jìn)行打印；細(xì)胞懸液B及細(xì)胞懸液C由氣壓泵作為壓力裝置通過擠壓式噴頭進(jìn)行打印。

7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的所述的帶血管網(wǎng)的人工肌組織的制備方法，其特征在于，步驟4)中進(jìn)行體外動(dòng)態(tài)培養(yǎng)的過程中，將帶血管網(wǎng)人工肌組織模型實(shí)體置于溫度為37℃、二氧化碳的體積百分?jǐn)?shù)為5％的培養(yǎng)箱中，利用蠕動(dòng)泵對(duì)帶血管網(wǎng)人工肌組織模型實(shí)體進(jìn)行灌流，以實(shí)現(xiàn)多細(xì)胞的共同培養(yǎng)。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的所述的帶血管網(wǎng)的人工肌組織的制備方法，其特征在于，注射泵的流量范圍為1-1.5ml/min，氣壓泵的氣壓范圍為0.1～0.3MPa，3D打印設(shè)備的打印速度為5～20mm/s。