[發明專利]一種抗病毒顆粒中告依春的含量測量方法

在審

• 申請號: 201810178183.4
• 申請日: 2018-03-05
• 公開（公告）號: CN108490084A
• 公開（公告）日: 2018-09-04
• 發明（設計）人: 彭招華;曾德成;劉然;張潤容;王芹
• 申請（專利權）人: 四川光大制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京精金石知識產權代理有限公司 11470
• 代理人: 張黎

1.一種抗病毒顆粒中告依春的含量測量方法，其特征在于，包含以下步驟：

(1)色譜條件：采用Shim-pack VP-ODS色譜柱，流動相：選自甲醇-0.015％磷酸、0.2％乙酸水溶液-甲醇；檢測波長：245nm；柱溫：35-40℃；流速：0.5-0.6mL/min；

(2)供試品溶液的制備：

①取抗病毒顆粒，研磨，置于不銹鋼萃取池，以超純水為萃取溶劑進行萃取，過濾得濾液和濾渣；

②取①中濾渣加提取劑，微波提取兩次，過濾得濾液；

③合并①和②中濾液，過固相萃取小柱，用氨水-甲醇溶液洗脫，洗脫液用N2吹至0.1-0.5mL，即為提取液；

④將③中提取液置于容量瓶中，加甲醇定容至刻度，過濾，取濾液，即得供試品溶液；

(3)對照品溶液的制備：取適量(R,S)-告依春，精密稱定，加甲醇制成每1mL含(R,S)-告依春3-20μg的溶液，即得；

(4)測定法：分別精密吸取上述供試品溶液、對照品溶液10-15μL，注入高效液相色譜儀，進行檢測。

2.根據權利要求1所述的測量方法，其特征在于，所述的抗病毒顆粒，采用板藍根、連翹、石膏、知母、蘆根、地黃、廣藿香、石菖蒲和郁金制成。

3.根據權利要求1所述的測量方法，其特征在于，步驟(1)中，所述色譜條件：采用Shim-pack VP-ODS色譜柱，流動相：體積比為(8-9):(92-91)的甲醇-0.015％磷酸；檢測波長：245nm；柱溫：35℃；流速：0.6mL/min。

4.根據權利要求1所述的測量方法，其特征在于，步驟(1)中，所述色譜條件：采用Shim-pack VP-ODS色譜柱，流動相：體積比為(75-85):(25-15)的0.2％乙酸水溶液-甲醇；檢測波長：245nm；柱溫：40℃；流速：0.5mL/min。

5.根據權利要求1所述的測量方法，其特征在于，步驟(2)中，所述供試品溶液的制備：①取抗病毒顆粒，研磨過80-100目篩，精密稱定3-5g置于不銹鋼萃取池，以超純水為萃取溶劑進行萃取，萃取溫度110-120℃，萃取時間30-40min，萃取1次，沖洗體積100％萃取池體積，吹掃時間60s條件下進行萃取，過濾得濾液和濾渣；

②取①中濾渣加提取劑，料液比1:(15-20)，浸泡時間10-15min，提取時間2-4min，微波提取兩次，過濾得濾液；

③合并①和②中濾液，過固相萃取小柱，用氨水-甲醇溶液洗脫，洗脫液用N2吹至0.1-0.5mL，即為提取液；

④將③中提取液置于容量瓶中，加甲醇定容至刻度，過0.22μm濾膜，取濾液，即得供試品溶液。

6.根據權利要求5所述的測量方法，其特征在于，步驟(2)中，所述供試品溶液的制備：①取抗病毒顆粒，研磨過80目篩，精密稱定3g置于不銹鋼萃取池，以超純水為萃取溶劑進行萃取，萃取溫度120℃，萃取時間40min，萃取1次，沖洗體積100％萃取池體積，吹掃時間60s條件下進行萃取，過濾得濾液和濾渣；

②取①中濾渣加提取劑，料液比1:20，浸泡時間15min，提取時間2min，微波提取兩次，過濾得濾液；

③合并①和②中濾液，過固相萃取小柱，用體積比為4:96的氨水-甲醇溶液洗脫，洗脫液用N2吹至0.2mL，即為提取液；

④將③中提取液置于10mL容量瓶中，加甲醇定容至刻度，過0.22μm濾膜，取濾液，即得供試品溶液。

7.根據權利要求5或6所述的測量方法，其特征在于，所述②中提取劑為水或乙醇，微波功率為300-500W；所述③中，濾液過柱前采用甲醇溶液活化固相萃取小柱，過固相萃取小柱的流速控制在1-2s/滴。

8.根據權利要求1所述的測量方法，其特征在于，步驟(3)中，所述對照品溶液的制備：取適量(R,S)-告依春，精密稱定，加甲醇制成每1mL含(R,S)-告依春3-10μg的溶液，即得。

9.根據權利要求1所述的測量方法，其特征在于，步驟(4)中，所述測定法：分別精密吸取上述供試品溶液、對照品溶液10μL，注入高效液相色譜儀，進行檢測。