[發明專利]基于多肽的重組高密度脂蛋白前體及其制備方法與應用

在審

• 申請號: 201810166595.6
• 申請日: 2018-02-28
• 公開（公告）號: CN110151972A
• 公開（公告）日: 2019-08-23
• 發明（設計）人: 李寧;許若丹;胡鏡清;李子贇
• 申請（專利權）人: 中國中醫科學院中醫基礎理論研究所
• 主分類號: A61K38/17
• 分類號: A61K38/17;A61K47/24;A61P9/10;A61P3/06
• 代理公司: 北京海虹嘉誠知識產權代理有限公司 11129
• 代理人: 高芬芳

1.重組高密度脂蛋白前體，其特征在于：由包含ApoA-I功能多肽和磷脂的原料在微流控芯片中自組裝制備而成。

2.根據權利要求1所述的重組高密度脂蛋白前體，其特征在于：所述重組高密度脂蛋白前體為盤狀重組高密度脂蛋白。

3.根據權利要求1或2所述的重組高密度脂蛋白前體，其特征在于：所述重組高密度脂蛋白前體為粒徑20納米-40納米的納米顆粒。

4.根據權利要求1所述的重組高密度脂蛋白前體，其特征在于：所述微流控芯片為聚二甲基硅氧烷微流控芯片。

5.根據權利要求1或4所述的重組高密度脂蛋白前體，其特征在于：

所述ApoA-I功能多肽是通過雙通道流體注射泵傳輸至所述微流控芯片；所述磷脂是通過單通道流體注射泵傳輸至所述微流控芯片；所述單通道流體注射泵設置在所述雙通道流體注射泵之間；

所述雙通道流體注射泵與所述微流控芯片之間由聚四氟乙烯軟導管連接；所述單通道流體注射泵與所述微流控芯片之間由聚四氟乙烯軟導管連接；

所述ApoA-I功能多肽與所述磷脂在所述微流控芯片上匯集，形成可調控的雙微渦旋和雷諾系數在75-150的聚焦模式；

所述自組裝為所述磷脂從有機相轉變為水相，引發脂質體的形成；所述雙微渦旋促使所述ApoA-I功能多肽迅速摻入新生的脂質體中，瞬時形成高密度脂蛋白前體的納米顆粒。

6.根據權利要求5所述的重組高密度脂蛋白前體，其特征在于：所述ApoA-I功能多肽和所述磷脂分別以流速為2.5ml/min～10ml/min和0.5ml/min～2ml/min的速度灌流混合。

7.根據權利要求1或6所述的重組高密度脂蛋白前體，其特征在于：所述ApoA-I功能多肽和所述磷脂的質量比為0.1～1.6：1。

8.根據權利要求1所述的重組高密度脂蛋白前體，其特征在于：所述ApoA-I功能多肽選自如下(1)～(11)的單體序列或所述單體序列以脯氨酸或丙氨酸連接形成的聚體形式或在所述功能多肽N端或C端連接熒光標簽后形成的修飾多肽：

(1)序列表中序列12所示的氨基酸序列組成的單體序列；和/或

(2)序列表中序列13所示的氨基酸序列組成的單體序列；和/或

(3)序列表中序列14所示的氨基酸序列組成的單體序列；和/或

(4)序列表中序列15所示的氨基酸序列組成的單體序列；和/或

(5)序列表中序列16所示的氨基酸序列組成的單體序列；和/或

(6)序列表中序列17所示的氨基酸序列組成的單體序列；和/或

(7)序列表中序列18所示的氨基酸序列組成的單體序列；和/或

(8)序列表中序列19所示的氨基酸序列組成的單體序列；和/或

(9)序列表中序列20所示的氨基酸序列組成的單體序列；和/或

(10)序列表中序列21所示的氨基酸序列組成的單體序列；和/或

(11)序列表中序列22所示的氨基酸序列組成的單體序列。

9.根據權利要求1或8所述的重組高密度脂蛋白前體，其特征在于：所述ApoA-I功能多肽為如下(a)或(b)或(c)的多肽：

(a)序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的多肽；

(b)在(a)中的氨基酸序列經過取代、缺失或添加一個或幾個氨基酸且具有ApoA-I蛋白功能的由(a)衍生的多肽；

(c)在所述(a)或(b)的多肽N端或C端連接熒光標簽后形成的修飾多肽。

10.根據權利要求1所述的重組高密度脂蛋白前體，其特征在于：所述磷脂為天然磷脂或合成磷脂；所述天然磷脂選自大豆、蛋黃、腦或脊髓中天然磷脂成分；所述合成磷脂選自二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二硬脂酰基磷脂酰膽堿、二油酰基卵磷脂或1-棕櫚酰基-2-油酰基卵磷脂。