[發明專利]一種穩定性強的血清無機磷(酶法)檢測試劑盒

在審

• 申請號: 201810164809.6
• 申請日: 2018-02-27
• 公開（公告）號: CN108486090A
• 公開（公告）日: 2018-09-04
• 發明（設計）人: 羅維曉;胡曉飛;王美麗
• 申請（專利權）人: 山東博科診斷科技有限公司
• 主分類號: C12N9/96
• 分類號: C12N9/96;C12Q1/26;C12Q1/28;C12Q1/48
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• 代理人: 暫無信息

本發明涉及臨床體外檢測試劑技術領域，特別涉及一種穩定性強的血清無機磷(酶法)檢測試劑。試劑R1中含有Tris緩沖液pH7.5、次黃嘌呤核苷、嘌呤核苷磷酸化酶PNP、黃嘌呤氧化酶、過氧化物酶、甘油、丙二醇?單甲醚、4?甲基苯硼酸(4?FPBA)、D?海藻糖、氯化鋰，試劑R2中含有Tris緩沖液pH7.5、2,4,6?三溴?3?羥基苯甲酸(TBHBA)、NaN₃ 0.5g/L，該試劑適合與各種全自動生化分析儀配套使用，準確度和抗干擾能力良好，且具有良好的熱穩定性。

技術領域

本發明涉及臨床體外檢測試劑技術領域，特別涉及一種穩定性強的血清無機磷（酶法）檢測試劑。

背景技術

1.背景

人體內含磷(Phosphorus)約17mol(530g)，其中87%存在于骨骼中，其余存在于軟組織、細胞內。體內許多重要的物質如某些蛋白質、酯類化合物、核酸、輔酶等都含有磷，在酸堿平衡中磷酸鹽也具有重要作用。

血液中的磷可分為4部分：無機磷、有機磷或磷酸酯、含磷脂類和少量的其他磷化物。血液中的磷與骨骼中的磷維持動態平衡，體內的磷主要以磷酸基形式參與許多對生命活動非常重要的物質代謝過程。例如：構成磷脂，進而與蛋白質構成細胞的組成成分；參與能量代謝，尤其是氧化磷酸化過程，形成ATP等；參與DNA、RNA以及許多輔酶(如焦磷酸硫胺素、輔酶I及輔酶II等)的構成；磷還作為某些酶的激活劑或抑制劑，參與多種酶促反應，糖、脂類和蛋白代謝過程中的許多生化反應，也都需要磷參與。

2.臨床意義

血清無機磷增高：甲狀旁腺功能減退癥、假性甲狀旁腺功能減退癥、維生素D過多癥、腎功能不全或衰竭、多發生骨髓瘤和骨折愈合期、急性酸中毒、白血病、淋巴瘤、骨腫瘤、老年性白內障、妊高征孕婦。高磷血癥常無癥狀，但當鈣、磷濃度(mg/dl)乘積大于70時，可發生轉移性鈣化，引起鈣鹽在關節、韌帶、心肌、血管、皮下、角膜、結膜等以為沉淀，臨床出現關節痛、眼結膜炎、角膜炎及皮膚瘙癢等癥狀。此外，高磷血癥常伴有不同程度的低鈣血癥和腎功能衰竭的有關癥狀。

血清無機磷降低：甲狀旁腺功能亢進癥、佝僂病或軟骨病、糖利用增加、腎小管變性病變、乳糜瀉、甲亢、肝硬化和肺心病。

3.檢測方法

目前無機磷測定使用的方法有比色法、分光光度法和酶法。

(1)硫酸亞鐵磷鉬藍比色法

原理：以三氯醋酸沉淀蛋白，在無蛋白濾液中加入鉬酸銨試劑，與無機磷結合生成磷鉬酸，再以硫酸亞鐵為還原劑，還原成藍色化合物，進行比色測定。

評價：該方法需要樣本除蛋白，操作步驟繁瑣，誤差大。

(2)紫外分光光度法

原理：血清中無機磷在酸性溶液中與鉬酸銨作用所形成的復合物，直接在340nm或325nm波長測定其吸光度。

評價：該方法顯色穩定，試劑配置簡單，且適用于全自動生化分析儀，但由于血清中存在還原性物質，容易導致檢測結果不準確。

(3)黃嘌呤氧化酶比色測定法

原理：磷酸鹽陰離子與次黃嘌呤核苷酸在嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)的催化下，生成次黃嘌呤和核糖-1-磷酸。黃嘌呤氧化酶氧化次黃嘌呤生成尿酸和過氧化氫。用Trinder反應呈色，吸光度的變化與磷酸鹽陰離子的濃度成比例。

評價：該方法操作簡便，具有良好的線性、重復性和抗干擾能力，適合全自動生化分析儀。

發明內容