[發明專利]與菠菜雄性緊密連鎖的SSR標記SP_SSR04及其應用有效
| 申請號： | 201810162728.2 | 申請日： | 2018-02-27 |
| 公開（公告）號： | CN108165654B | 公開（公告）日： | 2021-03-16 |
| 發明（設計）人： | 秦瑞云;鄧傳良;李曉月;李書粉;高武軍 | 申請（專利權）人： | 河南師范大學 |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895;C12Q1/6879;C12N15/11 |
| 代理公司： | 新鄉市平原智匯知識產權代理事務所(普通合伙) 41139 | 代理人： | 路寬 |
| 地址： | 453007 河*** | 國省代碼： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 菠菜 雄性 緊密 連鎖 ssr 標記 sp_ssr04 及其 應用 | ||
1.與菠菜雄性緊密連鎖的SSR標記SP_SSR04，其特征在于：該SSR標記SP_SSR04通過以下特異引物對擴增獲得，其核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.1所示，該SSR標記的特異引物對可在菠菜雄株中擴增出176bp的特異條帶，在菠菜雌株中無擴增產物，所述特異引物對為：
上游引物：5’-TTGATTGCCTCAAGGTGTTG-3’；
下游引物：5’-TGGGTTCTTAGCCACTTTTTG-3’。
2.權利要求1所述的與菠菜雄性緊密連鎖的SSR標記SP_SSR04在菠菜性別鑒定中的應用，其特征在于具體過程為：首先提取待測菠菜的基因組DNA，以待測菠菜的基因組DNA為模板利用權利要求1中所示的特異引物對進行PCR擴增，PCR擴增反應體系為：10×PCR Buffer2μL、2.5mM dNTP Mixture 1μL、10μM/μL上游引物1.25μL、10μM/μL下游引物1.25μL、5U/μLTaq酶0.2μL、100-200ng模板DNA 1μL和無菌水13.3μL，PCR擴增反應程序為：95℃預變性2min；94℃變性1min，55℃退火1min，72℃延伸2min，共30個循環；最后72℃延伸7min；瓊脂糖凝膠電泳檢測擴增產物，若擴增出176bp的特異性條帶則為雄性，若無擴增產物則為雌性。
3.根據權利要求2所述的與菠菜雄性緊密連鎖的SSR標記SP_SSR04在菠菜性別鑒定中的應用，其特征在于：所述待測菠菜為菠菜栽培種或菠菜野生種。
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