[發(fā)明專利]一種制備玉米赤霉烯酮-葡萄糖苷的方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201810162591.0 | 申請(qǐng)日： | 2018-02-26 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN108342432A | 公開(kāi)（公告）日： | 2018-07-31 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 韓錚;趙志輝;張志岐;范楷;聶冬霞;郭文博;楊俊花 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院 |
| 主分類號(hào)： | C12P19/62 | 分類號(hào)： | C12P19/62;C12P19/18;C12N15/70;C12N9/10 |
| 代理公司： | 上海容慧專利代理事務(wù)所(普通合伙) 31287 | 代理人： | 張竹梅 |
| 地址： | 201403 *** | 國(guó)省代碼： | 上海;31 |
| 權(quán)利要求書(shū)： | 查看更多 | 說(shuō)明書(shū)： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 制備 玉米赤霉烯酮 葡萄糖苷 催化酶 底物 甲醇 體外 乙腈 | ||
【權(quán)利要求書(shū)】：
1.一種制備玉米赤霉烯酮-葡萄糖苷的方法，其特征在于該方法包括如下步驟：
以ZEN和UDP作為底物，HvUGT14077為催化酶，20-40℃反應(yīng)5～10分鐘，甲醇或者乙腈終止反應(yīng)，制備得到ZEN-G。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備玉米赤霉烯酮-葡萄糖苷的方法，其特征在于其中HvUGT14077的制備方法如下：
重組表達(dá)載體的構(gòu)建：全基因合成大麥二磷酸尿苷葡萄糖-糖基轉(zhuǎn)移酶HvUGT14077基因，克隆入pET22b-MBP，構(gòu)建重組表達(dá)載體；
重組酶的表達(dá)純化：載體轉(zhuǎn)入大腸桿菌BL21，接種于LB培養(yǎng)基，25-40℃培養(yǎng)至OD600為0.6-0.8，加入誘導(dǎo)劑IPTG至終濃度0.1～1mmol/L，10-30℃誘導(dǎo)表達(dá)10-30小時(shí)，利用Ni-NTA Resin親和層析柱純化得到。
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