[發明專利]具有細胞毒活性的吲哚咔唑類生物堿及制備方法、用途

有效

• 申請號: 201810160712.8
• 申請日: 2018-02-27
• 公開（公告）號: CN108299467B
• 公開（公告）日: 2020-04-28
• 發明（設計）人: 李文利;肖菲;李花月;徐明遠;李通
• 申請（專利權）人: 中國海洋大學
• 主分類號: C07D498/22
• 分類號: C07D498/22;A61K31/553;A61P35/00;A61P35/02;C12P17/18;C12R1/465
• 代理公司: 青島合創知識產權代理事務所(普通合伙) 37264
• 代理人: 傅培

1.具有細胞毒活性的吲哚咔唑類生物堿，其特征在于：所述結構如式II所示：

2.如權利要求1所述的具有細胞毒活性的吲哚咔唑類生物堿在制備抗腫瘤藥物中的應用。

3.如權利要求1所述的具有細胞毒活性的吲哚咔唑類生物堿在在制備抗腫瘤藥物中的應用，其特征在于：所述的腫瘤為肝癌、結腸癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌或白血病。

4.如權利要求1所述的具有細胞毒活性的吲哚咔唑類生物堿在制備細胞增殖抑制劑中的用途。

5.一種藥物組合物，其特征在于：包括如權利要求1所述的具有細胞毒活性的吲哚咔唑類生物堿和藥學上可接受的載體。

6.吲哚咔唑類生物堿的制備方法，其特征在于：所述吲哚咔唑類生物堿的結構如式I和式II所示：

所述制備方法包括以下步驟：

1)將重組菌株接種于液體培養基I中，搖床培養，獲得種子液；所述的重組菌株通過下述方法構建得到：(a)以含有spc基因簇的黏粒pWLI625為基礎，采用同源重組的方法用硫酸安普拉霉素抗性基因aac(3)IV替代spcMA基因，aac(3)IV基因后被XbaI酶切去除；(b)再用aac(3)IV基因替代spcMB基因，aac(3)IV基因后被speI酶切去除；(c)獲得的黏粒加載上異源表達元件aac(3)IV-oriT-導入天藍色鏈霉菌Streptomyces coelicolorM1146中異源表達，獲得重組菌株M1146/pWLI628；

2)將步驟1)得到的種子液接種于液體培養基II中，搖床培養，萃取得發酵產物；

3)將步驟2)得到的發酵產物進行分離純化，得到化合物。

7.根據權利要求6所述的吲哚咔唑類生物堿的制備方法，其特征在于：步驟2)所述的萃取，具體為：將發酵液離心，菌體用丙酮超聲破碎后，蒸干丙酮，與上清混合，用兩倍體積乙酸乙酯萃取發酵產物；步驟3)所述的分離純化包括：發酵產物經制備柱色譜和半制備柱色譜獲得化合物。