[發明專利]一種培育水稻抗稻瘟病兩系不育系的方法

有效

• 申請號: 201810149916.1
• 申請日: 2018-02-13
• 公開（公告）號: CN108496790B
• 公開（公告）日: 2020-01-14
• 發明（設計）人: 査中萍;夏明元;戚華雄;李進波;萬丙良;杜雪樹;殷得所
• 申請（專利權）人: 湖北省農業科學院糧食作物研究所
• 主分類號: A01H1/02
• 分類號: A01H1/02;A01H1/04
• 代理公司: 42229 武漢市首臻知識產權代理有限公司
• 代理人: 高琴

1.一種培育水稻抗稻瘟病兩系不育系的方法，其特征在于：

所述方法依次包括以下步驟：

一、先以水稻光溫敏核不育系廣占63-4S為母本、帶有抗稻瘟病基因Pi1和Pi2的GD-7為父本，兩者雜交得到F₁，再種植F₁后與廣占63-4S回交獲得BC₁F₁；

二、先種植BC₁F₁種子以獲得BC₁F₁群體，然后在BC₁F₁群體中利用分子標記輔助選擇帶有Pi1和Pi2基因標記的可育單株與廣占63-4S回交得到BC₂F₁；

三、先種植BC₂F₁種子以獲得BC₂F₁群體，然后在BC₂F₁群體中利用分子標記輔助選擇帶有Pi1和Pi2基因標記的單株，收獲BC₂F₂種子；

四、先種植BC₂F₂種子以獲得BC₂F₂群體，再結合分子標記輔助選擇、育性鑒定以及農藝性狀考察選擇帶有Pi1和Pi2基因純合標記的不育單株，保留其稻蔸，并在可育環境條件下繁種，收獲BC₂F₃種子；

五、先種植BC₂F₃種子以獲得BC₂F₃株系，然后通過農藝性狀考察和育性鑒定，選擇優良的不育單株，保留其稻蔸，并在可育環境條件下繁種，獲得BC₂F₄種子；

六、先種植BC₂F₄種子獲得BC₂F₄株系，按照步驟五所述方法繁殖獲得BC₂F₅種子，再種植BC₂F₅種子以獲得BC₂F₅株系，然后對BC₂F₅株系經Pi1和Pi2基因標記驗證純合，并通過人工冷水池處理選擇育性轉換起點溫度低于23.5℃的株系，繁殖選中株系得到的自交種子即為培育得到的水稻抗稻瘟病兩系不育系，其中，所述人工冷水池處理具體為：先在水稻幼穗分化第4～7期將植株從大田挖出，盆栽后置于自然狀態下至植株活蔸，再將盆栽活蔸的單株放入冷水池中，灌入冷水處理6～8天后移至自然狀態下生長，然后選擇劍葉與倒二葉葉枕距在±2cm內的單穗，待抽穗后鏡檢，其中，所述處理期間水溫設置為：開機溫度23.1℃，停機溫度22.8℃。

2.根據權利要求1所述的一種培育水稻抗稻瘟病兩系不育系的方法，其特征在于：

步驟四中，所述育性鑒定具體為：先用I₂-KI溶液對取自稻穗的花粉進行染色，再通過觀察花粉染色情況和形狀選擇不育花粉率不低于99.5%的單株，其中，不育花粉率=不育花粉數/總花粉數*100%，不育花粉數為染色后出現典敗或圓敗現象的花粉數量。

3.根據權利要求1或2所述的一種培育水稻抗稻瘟病兩系不育系的方法，其特征在于：

所述分子標記輔助選擇中，

Pi1基因分子檢測的引物為：

F:ATTGCTGCAAAGTGGGAGAC

R:AAGTGGAGGCAGTTCACCAC；

Pi2基因分子檢測的引物為：

F:GTGCATGAGTCCAGCTCAAA

R:GTGTACTCCCATGGCTGCTC。