[發(fā)明專利]RAA熒光法檢測狂犬病病毒的探針及試劑盒在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201810149632.2 | 申請(qǐng)日： | 2018-02-13 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN108315478A | 公開（公告）日： | 2018-07-24 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 吳斌;蘇立明;梁華;李忠起;梁健健;郭利川;王智宏;應(yīng)清界 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 吳斌;江蘇奇天基因生物科技有限公司 |
| 主分類號(hào)： | C12Q1/70 | 分類號(hào)： | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 大連東方專利代理有限責(zé)任公司 21212 | 代理人： | 劉慧娟;李馨 |
| 地址： | 116000 遼*** | 國省代碼： | 遼寧;21 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 狂犬病病毒 試劑盒 探針 熒光法檢測 臨界陽性質(zhì)控品 等溫?cái)U(kuò)增檢測 熒光報(bào)告基團(tuán) 反應(yīng)緩沖液 試劑盒操作 陽性質(zhì)控品 陰性質(zhì)控品 引物混合物 淬滅基團(tuán) 反應(yīng)試劑 基礎(chǔ)熒光 檢測試劑 現(xiàn)場檢測 小型儀器 攜帶方便 種檢測 檢測 可用 靈敏 通用 配合 應(yīng)用 基層 | ||
1.RAA熒光法檢測狂犬病病毒的探針，其特征在于，
所述探針為5’端序列(熒光報(bào)告基團(tuán))(THF)(淬滅基團(tuán))3’端序列；其中：
所述5’端序列的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；
所述3’端序列的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；
所述THF為四氫呋喃殘基；
所述熒光報(bào)告基團(tuán)選自FAM、HEX、TET、JOE、VIC、ROX、Cy3或Cy5中的任一種；
所述淬滅基團(tuán)選自TAMRA、Eclipse、BHQ1、BHQ2、BHQ3或DABCYL中的任一種。
2.一種狂犬病病毒RAA熒光法檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括權(quán)利要求1所述的探針以及下述引物：上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的狂犬病病毒RAA熒光法檢測試劑盒，其特征在于，所述的探針終濃度為0.02-0.05mM，所述上游引物及下游引物終濃度分別為0.05-0.1mM。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的狂犬病病毒RAA熒光法檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括試劑RAA基礎(chǔ)熒光通用反應(yīng)試劑和反應(yīng)緩沖液。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的狂犬病病毒RAA熒光法檢測試劑盒，其特征在于，所述反應(yīng)緩沖液包括以下含量組分：濃度為500mmol/L的Tris-HCl緩沖液、濃度為250mmol/L的MgAc和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10％的PEG20000，緩沖液PH7.6。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的狂犬病病毒RAA熒光法檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括如下試劑：陰性質(zhì)控品、陽性質(zhì)控品和/或臨界陽性質(zhì)控品；
所述陽性質(zhì)控品含為狂犬病病毒的基因組DNA片段，使用濃度為1.0×105IU/mL；
所述臨界陽性質(zhì)控品為含狂犬病病毒的基因組DNA片段，使用濃度為1.0×102IU/mL；
所述陰性質(zhì)控品為不含有狂犬病病毒的基因組DNA片段的試劑。
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